晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义

袁 博（南阳市第一人民医院肿瘤血液科，河南473000）

化疗是指通过使用化学治疗药物杀灭癌细胞的一种治疗方法，对于潜在转移病灶（癌细胞已经转移但临床尚未检测出）和已经发生临床转移的恶性肿瘤具有较好的疗效，是大部分恶性肿瘤手术后的重要辅助治疗方法，也是部分不适宜采用手术的恶性肿瘤患者的唯一一种治疗方法[1]，通过化疗不但可以延续患者的生命周期，还能提高患者的生命质量。对外周血T淋巴细胞亚群的监测是观察化疗效果的重要临床辅助诊断方法，可以通过如免疫荧光法等检测外周血T淋巴细胞亚群指标值的变化来判断化疗的效果及预后等。为此，作者就晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群监测及临床意义进行研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年12月至2016年11月在本院接受化疗治疗的73例晚期恶性肿瘤患者作为研究对象。其中男41例，女32例；年龄49～76岁，平均（65.8±2.6）岁；其中肺癌晚期21例，胃癌晚期15例，乳腺癌晚期13例，肠癌晚期12例，肝癌晚期8例，其他恶性肿瘤晚期4例。所有患者均经过前期不同方法治疗后正接受后期化疗。

1.2 方法 73例患者均采用免疫荧光法进行外周血T细胞亚群指标检测，具体方法如下。

1.2.1 采血 采集患者静脉血（通常取手臂部位即可，注意在静脉穿刺部位上方4～6 cm处扎紧止血带）。在行常规消毒后取血（注意针头斜面向上与皮肤成15°～30°，通常抽取5 mL即可），取血后注意压迫止血。

1.2.2 制样 将获得血液注入试管内（切勿注入泡沫），并均匀摇晃（可视血液情况添加抗凝剂），并迅速封存待进行荧光法分析。

1.2.3 荧光法分析 （1）确定淋巴细胞区：在前散射（FSC）和侧散射（SSC）的二维Dot-plot图中划出淋巴细胞区。（2）荧光强度检测：对淋巴细胞作异硫氰酸荧光素（FITC）和藻红蛋白（PE）强度检测。选择滤过片为（530±10）nm带通荧光Ⅰ（FL1）为FITC进行检测，选择滤光片为（575±10）nm带通荧光Ⅱ（FL2）为PE进行检测。

1.2.4 检查时间 化疗前1周及化疗结束后的2周。

1.2.5 评价指标 将免疫功能指标值（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）作为评价指标。

1.3 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，计量资料以表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者化疗前后的评价指标比较 73例患者化疗2周后的CD3＋、CD4＋、CD8＋均较化疗前有一定改善，差异均有统计学意义（P＜0.05）；化疗前后的CD3＋/CD8＋比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。

表1 两组患者化疗前后的评价指标比较（±s）

表1 两组患者化疗前后的评价指标比较（±s）

阶段化疗前化疗后t P CD3＋（%）55.8±8.7 69.3±9.2 3.17＜0.05 CD4＋（%）28.5±3.7 36.1±4.8 2.25＜0.05 CD8＋（%）23.9±3.1 28.3±3.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.33±0.32 2.47±0.58 0.94＞0.05

2.2 不同性别患者化疗前后的评价指标比较 化疗前，男性患者的CD8＋和CD3＋/CD8＋与女性患者比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），化疗前男、女性患者CD3＋、CD4＋接近，差异无统计学意义（P＞0.05）；不同性别化疗后的 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD3＋/CD8＋评价指标比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表 2、3。

表2 不同性别患者化疗前相关评价指标比较（±s）

表2 不同性别患者化疗前相关评价指标比较（±s）

性别男性女性t P CD3＋（%）54.3±5.2 56.7±4.9 0.83＞0.05 CD4＋（%）28.3±3.1 31.6±3.2 0.95＞0.05 CD8＋（%）23.8±3.9 19.6±2.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.28±0.32 2.89±0.58 3.94＜0.05

表3 不同性别患者化疗后相关评价指标比较（±s）

表3 不同性别患者化疗后相关评价指标比较（±s）

性别男性女性t P CD3＋（%）68.2±4.9 70.5±8.1 0.76＞0.05 CD4＋（%）37.1±3.3 35.9±4.2 0.84＞0.05 CD8＋（%）27.9±3.3 28.3±2.9 0.79＞0.05 CD3＋/CD8＋2.44±0.52 2.49±0.27 0.94＞0.05

3 讨 论

有研究表明，T细胞亚群的分布会随着肿瘤进展发生动态变化[2]。通过外周血T淋巴细胞亚群监测来观察晚期恶性肿瘤患者化疗的效果已经在临床上得以普遍应用，主要方法有免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）花环法、流式细胞术等[3]。恶性肿瘤病变间存在着细胞免疫功能的差异[4]。通过对免疫功能指标（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）的测定不仅可以获得患者化疗后的免疫功能改善情况，还可以为后期的化疗提供指导[5]。

本研究中化疗前不同性别的CD8＋与CD3＋/CD8＋有一定的差异，这可能与患者的不同肿瘤性质有关系[6]，女性患者以晚期乳腺癌为主要疾症；而化疗后不同性别的指标值基本接近，表明针对不同类型的晚期肿瘤，通过化疗其免疫指标均可得到一定改善；通过化疗药物可以提高 CD3＋、CD4＋、CD8＋的细胞阳性率，而CD3＋/CD8＋的变化差异较小仍表明免疫细胞处于抑制状态，所以改善效果基本接近，说明化疗作为晚期肿瘤患者的治疗方法其作用基本接近，这与目前已有的研究结果也基本吻合[7]。化疗可使调节性T细胞占T淋巴细胞比例降低[8]，从而达到治疗肿瘤的效果。有研究表明，时辰化疗在解除肿瘤对机体的免疫抑制及改善细胞免疫功能方面明显优于常规化疗，临床应加强研究[9]。

综上所述，进行外周血T淋巴细胞亚群监测可及时了解晚期肿瘤患者免疫指标值的改善情况，评估患者免疫功能状态[10]，对指导治疗和判断预后有极高的辅助监测临床意义。

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