乳腺癌淋巴结转移患者癌组织lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1表达变化及意义

刘峰，陈凯，王斌

(天津市北辰医院，天津300400)

近年来研究显示，长链非编码RNA(lncRNA)在剂量补偿效应、表观遗传调控、细胞周期调控、细胞分化、细胞凋亡及肿瘤发生、发展调控等方面发挥重要作用[1]。随着高通量转录组测序技术的不断发展，越来越多的lncRNA被陆续发现，但目前大部分lncRNA的确切生物学功能及作用机制并不清楚[2]。lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3是新近发现的与恶性肿瘤侵袭转移相关的lncRNA[3～7]，本研究探讨其对乳腺癌淋巴结转移的预测价值。

1　临床资料

1.1基本资料选择2015年2月～2016年11月天津市北辰医院收治的60例乳腺癌患者，均为女性，年龄36～7(52.2±12.6)岁，病程(1.2±0.3)个月；术前病理穿刺，病理学或细胞学检查确诊为乳腺癌。均行乳腺癌切除手术，术前未进行新辅助放化疗、放疗或免疫治疗；术后病理检查根据WHO制定乳腺癌分期标准：Ⅰ期30例，Ⅱ期21例，Ⅲ期9例。排除标准：①年龄<18岁；②合并其他恶性肿瘤；③孕产妇；④HIV阳性。术中留取手术切除的原发肿瘤组织和配对区域淋巴结组织各60例份，在液氮中速冻，将组织置于-80 ℃冰箱保存。淋巴结组织行病理检查显示淋巴结转移30例份，将其配对原发肿瘤组织作为转移组；未发生淋巴结转移30例份，将其配对原发肿瘤组织作为非转移组。本研究通过医院伦理委员会审核，患者及家属均签署知情同意书。

表1　两组lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3相对表达量比较

注：与非转移组比较，*P<0.01。

图1　　　　转移组lncRNA HOTAIR与lncRNA MALAT1表达相关性散点图

1.3lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1对乳腺癌淋巴结转移的诊断效能绘制lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1诊断乳腺癌淋巴结转移的受试者工作特征(ROC)曲线，根据贝叶斯定量计算其诊断乳腺癌淋巴结转移的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、截断值、诊断优势比(DOR)及曲线下面积(AUC)。结果显示lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1诊断乳腺癌淋巴结转移的截断值分别为2.88、2.06，此时lncRNA HOTAIR诊断乳腺癌淋巴结转移的敏感性、特异性、阳性预测值、DOR及AUC均高于lncRNA MALAT1。见表2。

表2　lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1对乳腺癌淋巴结转移的诊断效能

2　讨论

lncRNA具有类型多、数量多、作用机制多等特点[7,8]。近年来研究显示，与未转移淋巴结组织比较，乳腺癌转移淋巴结组织中lncRNA HOTAIR表达明显升高；进一步的生物学研究采用siRNA技术下调乳腺癌细胞lncRNA HOTAIR表达，结果显示乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力明显减低；该研究认为lncRNA HOTAIR参与了乳腺癌的侵袭与转移，可作为抑制乳腺癌转移的分子靶点[9]。但目前大部分研究都集中在其分子机制上，且研究对象多为细胞系，应用分子生物学技术探讨lncRNA如何调控细胞增殖及侵袭转移，在临床患者中的相关研究较少。

研究发现，lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3 在多种肿瘤如肺癌、乳腺癌、肠癌、头颈部鳞癌组织中表达升高，且在转移病灶中的表达水平明显高于未转移病灶，提示上述lncRNA可能参与了上述肿瘤的转移过程[10～16]。本研究结果显示，转移组lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1相对表达量均明显高于对照组，且转移组lncRNA HOTAIR与lncRNA MALAT1相对表达量呈正相关，两组lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MEG3相对表达量比较差异均无统计学意义；提示lncRNA HOTAIR与lncRNA MALT1可能共同参与了乳腺癌的淋巴结转移过程。本研究还发现，lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1诊断乳腺癌淋巴结转移截断值分别为2.88、2.06时，lncRNA HOTAIR诊断乳腺癌淋巴结转移的敏感性、特异性、阳性预测值、DOR及AUC均高于lncRNA MALAT1；提示lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1可作为预测乳腺癌淋巴结转移的肿瘤标志物；但lncRNA HOTAIR的诊断效能高于lncRNA MALAT1。

综上所述，乳腺癌淋巴结转移患者癌组织lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1表达均升高，癌组织lncRNA HOTAIR检测对乳腺癌淋巴结转移的诊断价值高于lncRNA MALAT1。但本研究纳入患者例数较少，且患者均来自同一个医疗单位，可能存在研究对象的选择性偏倚。未来可扩大样本量并进行多中心临床研究，进一步明确lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1作为乳腺癌淋巴结转移预测标志物的可行性。

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