某规模化生猪养殖场种猪猪瘟抗体水平和仔猪母源抗体消退情况的检测分析

卓鸿璘 泉州市洛江区虹山乡畜牧兽医站 福建泉州 362015

我国研制的猪瘟兔化弱毒疫苗临床应用的效果很好，经过多年猪瘟强制免疫后，近年来猪瘟大规模的流行和暴发已经得到有效控制，但是目前非典型猪瘟及持续带毒情况仍然比较严重，给养猪业造成巨大的损失[1-3]。丘惠深等研究表明，非典型猪瘟的发生和疫苗的免疫效果关系密切，因此，加强猪瘟免疫抗体检测，根据抗体水平制定合理的免疫程序，提高疫苗的免疫效果对防控猪瘟的发生有重要的意义[2]。

本研究使用猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒对某规模化生猪养殖场种猪及未经过猪瘟疫苗免疫的仔猪进行猪瘟抗体检测，调查公猪、后备母猪、经产母猪及 5、10、15、20、25、30、35、40 日龄未经猪瘟疫苗免疫仔猪的抗体水平，分析不同胎次经产母猪的抗体差异，了解未经免疫猪瘟疫苗仔猪猪瘟抗体水平的消长情况，为评估猪瘟疫苗的免疫效果和确定仔猪猪瘟疫苗的首免日龄提供科学参考。

1 材料和方法

1.1 样品来源 共采集泉州市某规模化生猪养殖场血清样本268份，其中种猪68份 （见表1），5、10、15、20、25、30、35、40 日龄仔猪样本各 25 份 （抗体水平合格母猪所产且未经猪瘟疫苗免疫的健康仔猪）。

1.2 主要仪器和试剂 主要仪器：酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司，型号DNM-9602）；台式离心机（上海安亭科学仪器厂制造，型号TGL-16G）；eppendorf手动移液器。检测试剂：猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒，购自武汉科前生物股份有限公司。

1.3 检测方法 试验严格按照猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒使用说明书进行操作。

1.4结果判定 试验成立的条件是阴性对照OD630nm＞0.5，阳性对照的阻断率均＞50%。在试验成立的基础上将样品OD630nm值根据说明书提供的公式计算阻断率，如果阻断率≤30%判为阴性，如果阻断率≥40%判为阳性，阻断率在30%～40%，该样品判为可疑。

表1 种猪样本采集情况表

2 结 果

2.1 种猪猪瘟抗体检测结果 该猪场公猪、后备母猪的抗体合格率均为100%，经产母猪猪瘟抗体合格率为98%（见表2）。

2.2 仔猪猪瘟抗体检测结果 该场3头抗体水平合格母猪所产并且未经过猪瘟疫苗免疫仔猪的猪瘟抗体在 5、10、15、20、25 日龄合格率均为 100%，30日龄时猪瘟抗体合格率为96%，35日龄时猪瘟抗体合格率为68%，40日龄时猪瘟抗体合格率为20%（见表 3）。

3 分析与讨论

3.1 仔猪猪瘟母源抗体水平分析及制定首免日龄该猪场5日龄仔猪猪瘟母源抗体合格率达到100%，并且5～25日龄的合格率一直维持在100%。仔猪在30日龄后猪瘟抗体合格率低于100%，30日龄之后抗体合格率出现比较大的下降，35日龄时猪瘟抗体合格率降为68%，到40日龄时猪瘟抗体合格率下降为20%（见图1）。从抗体阻断率的分布情况看，仔猪猪瘟母源抗体阻断率离散度小，抗体水平比较均匀，但是抗体阻断率随着日龄的增加逐渐下降（见图2）。仔猪猪瘟疫苗的首免时间选择在仔猪母源抗体低于80%保护率、母源抗体还没完全消失的日龄，这个阶段免疫既能保证仔猪的保护率，又能避免母源抗体的干扰[4-6]。该场仔猪母源抗体合格率从30日龄后下降比较快，35日龄后出现大幅度的下降，35日龄时猪瘟抗体合格率降为68%，接近于农业部要求合格率70%的标准。因此，建议首免日龄为35日龄。

本次采集的仔猪为抗体水平合格母猪所产的健康仔猪，仔猪的母源抗体水平较好，抗体水平比较整齐。这部分仔猪的抗体水平能代表大部分仔猪母源抗体的情况，但是生产中有存在母猪抗体不合格和仔猪活力差等影响仔猪获得合格母源抗体的情况，因此，确保生产母猪有合格的抗体水平和减少弱仔仔猪及提高猪群免疫应答能力等对于提高猪瘟的防疫质量也很重要。

图1 仔猪猪瘟母源抗体合格率变化情况

图2 仔猪猪瘟母源抗体平均阻断率变化情况

3.2 种猪抗体水平分析 该场抽检的种猪猪瘟抗体水平比较好，说明猪瘟疫苗免疫效果很好，但是部分高胎龄的母猪抗体阻断率不高，有1头已经处于可疑期间，建议多关注高胎龄母猪的抗体水平。从抗体阻断率的分布情况看种公猪和后备母猪的离散度小，抗体阻断率比较均匀；经产母猪1～2胎和3～4胎抗体阻断率离散度小，但是随着胎龄的增加，5～6胎和7～8胎母猪的抗体阻断率的离散度明显变大。修金生等研究表明，对抗体不合格的种猪加强猪瘟疫苗免疫可以提高合格率水平[7]。建议养殖场定期对种猪的抗体水平进行检测，及时对抗体水平不合格的种猪进行补免，并淘汰补免后抗体水平仍然不合格的种猪。

表2 种猪猪瘟抗体检测结果

表3 仔猪猪瘟抗体检测结果