淫羊藿对小鼠肝组织部分生化指标的影响

宁康健， 蔺姗姗， 李 磊， 吕锦芳

(安徽科技学院 动物科学学院，安徽 凤阳 233100)

淫羊藿又名仙灵脾，始载于《神农本草经》，是小檗科淫羊藿属多年生草本植物，为传统补益类中药。《本草纲目》记载：茎、叶入药，辛温无毒，有坚筋骨、益精气、补腰膝、强心力等作用[1]。淫羊藿的主要成分是黄酮类和多糖，此外还含有生物碱、木脂素类、蒽醌类、花青素、植物甾醇、萜类化合物、绿原酸、必需脂肪酸、微量元素Zn、Cu、Ca、Mn、Sr等营养成分和生物活性成分[2-3]。淫羊藿总黄酮有促进免疫、参与骨代谢、抗肿瘤、增强心血管功能，淫羊藿苷能促进大鼠间质细胞睾酮的基础分泌，促进幼年小鼠附睾及精囊的发育，促进cAMP的生成[4]，并有明显的拟雌激素样作用[5]，促进成骨细胞的生长增殖[6]，还能减少生殖细胞凋亡，通过抑制生殖细胞衰老基因蛋白表达这一途径延缓衰老[7-8]。淫羊藿多糖同样能促进细胞增殖和延缓细胞衰老[9]。现今，淫羊藿苷、淫羊藿多糖、淫羊藿总黄酮等已经被广泛用于很多药物中。本试验通过给小鼠饮用淫羊藿浓缩物，测定其肝脏指数及部分生化指标，探讨淫羊藿对肝脏发育及部分物质代谢的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物

昆明种雄性小白鼠40 只，体重为28～32 g，由安徽科技学院实验动物中心提供。

1.2 供试药物和试剂

淫羊藿提取物(8 倍浓缩，宣城百草植物工贸有限公司，批号为20180126)；肌糖原及肝糖原测定试剂盒(南京建成生物工程研究所产品，批号为20180419)；甘油三酯测定试剂盒(上海科欣生物技术研究所产品，批号为20180415)；胆固醇测定试剂盒(上海科欣生物技术研究所产品，批号为20180425)；蛋白质测定试剂盒(南京建成生物工程研究所产品，批号为20180517)。

1.3 主要仪器

722N 可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；DY 89-1型电动玻璃匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；HH-S 恒温水浴锅(江苏国胜实验仪器厂)；TDL-80-2B离心机(上海安亭科技仪器厂)；移液器(上海雷勃分析仪器有限公司)；FA-1004N电子天平(上海精密科学仪器有限公司)等。

1.4 淫羊藿口服液的制备

将淫羊藿提取物按不同给药剂量要求，加蒸馏水溶解，得到质量浓度分别为0、2、4、8 g/L的淫羊藿口服液，备用。

1.5 动物分组与采样

将40 只雄性小鼠随机均分4 组，分别为对照组(0 g/L)、低浓度组(2 g/L)、中浓度组(4 g/L)、高浓度组(8 g/L)，对照组和试验组饮用相应的淫羊藿口服液，每天早晚2次更换，连续21 d。试验结束前禁食24 h，称重，颈椎脱臼处死，取完整肝脏，称重，先称取不多于0.1 g的肝脏样本测定肝糖原含量，同时取肝左叶组织约0.5 g，在冰生理盐水中漂洗，滤纸拭干，放入组织匀浆器中，最终制成10%肝组织匀浆，离心，取上清液，分别按照相应试剂盒说明书测定组织样本中甘油三酯、胆固醇的含量。

1.6 观察指标

肝脏指数(LI)=肝质量(g)/体质量(g)×100%

肝糖原、甘油三酯、胆固醇含量测定：按试剂盒说明书,用分光光度计测定。

1.7 数据处理

2 结果与分析

2.1 淫羊藿对小鼠肝脏指数的影响

由表1可见，与对照组、高剂量组比较，低浓度组肝脏指数升高(P<0.05)，其余各组间差异不显著(P>0.05)。以上结果说明，低浓度组可以明显提高小鼠的肝脏指数。

表1 小鼠肝脏指数的比较Table 1 Comparison of mice liver index

注：同列肩标小写字母者不同者，表示差异显著(P<0.05)，大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01)，字母相同则差异不显著(P>0.05)。下同。

Note:The different small letters indicate significant difference atP<0.05, the diffenent big letters indicate remarkable(P>0.05).The same below.

2.2 淫羊藿对小鼠肝脏部分生化指标的影响

由表2可知，肝糖原含量：与对照组比较，低浓度组肝糖原含量升高(P<0.05)，中、高浓度组显著升高(P<0.01)；甘油三酯含量：与对照组比较，低、中、高浓度组甘油三酯含量均升高(P<0.01)；与低浓度组比较，中、高浓度组其含量均升高(P<0.01)；胆固醇含量：与对照组比较，中、高浓度组胆固醇含量升高(P<0.01)。

表2 小鼠肝脏部分生化指标的比较Table 2 Comparison of partial biochemical indicators in mice liver

3 结论与讨论

肝脏作为解毒器官，其质量变化可能与外源化合物胁迫所导致的能量支出多少有关系。因此，本试验将肝脏质量作为一个指标来考查淫羊藿对小鼠肝脏功能的影响。饮用低浓度淫羊藿浓缩物溶液肝脏指数提高，提示其可能有促进肝脏的发育功能。

肝脏对糖原的存储、分布和调节起重要作用。增加糖原的储备可以缓解低血糖，从而提高其运动能力，而糖原储备不足或血糖水平降低，可以导致运动机体产生疲劳[10]。淫羊藿苷元、环淫羊藿素具有抑制α-葡萄糖苷酶作用，能够显著降血糖，淫羊藿总黄酮具有降糖作用，并且能够显著提高大鼠葡萄糖利用率和胰岛素敏感性，可增加肝糖原和肌糖原含量[11]，饮用淫羊藿浓缩物各浓度组的肝糖原含量均不同程度升高，是因为淫羊藿能降低机体血糖的含量，使生物体通过糖异生途径增加了肝糖原的含量。

肝脏等组织还可以进行甘油三酯、胆固醇及胆固醇酯的合成。本试验肝脏中甘油三酯和胆固醇含量均显著升高，甘油三酯的含量升高尤为明显。淫羊藿总黄酮由于所含酚羟基的抗脂质过氧化作用，能直接捕捉、清除自由基，生成自由基中间体，阻断或终止自由基连锁反应链，从而阻止或抑制氧自由基反应和脂质过氧化反应，降低组织中脂肪含量，在大鼠动物模型中淫羊藿苷表现出一定的降脂作用[12]。然而在现代应用与新药研发中，含淫羊藿的多种中药复方制剂被发现造成人体一定程度肝脏损伤的情况，被认为是可能具有肝脏毒性的潜在毒性中药[13]，亦有报道鲜淫羊藿和巫山淫羊藿造成肝损伤情况相对较大[14]，但据药物性肝损伤的标准，认为淫羊藿导致肝损伤这一推论有待进一步研究确定。本试验肝组织中TG、TC含量升高，其原因是多方面的，采用淫羊藿浓缩物饮水，其成分由多种化合物组成，其中某些成分，或较大剂量可能增加TG、TC在肝中沉积，诱发脂肪肝趋势，从而有可能导致肝损伤。