上皮性卵巢癌患者血浆中化疗耐药相关蛋白标志物的临床表达意义

张惠渊

卵巢恶性肿瘤发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌，列居第3位，其中以上皮性卵巢癌最常见，占卵巢肿瘤的50%～70%。目前治疗上皮性卵巢癌的主要方法是早期进行全面手术，术后进行化疗。但是恶性肿瘤细胞对化疗药物产生耐药常常最终导致化疗失败，进而影响患者恢复[1]。在治疗卵巢癌的过程中，使用生物标志物，预测卵巢癌的化疗耐药，对于治疗此种恶性肿瘤具有重要意义。本次研究通过对比分析化疗敏感和化疗耐药2组上皮性卵巢癌患者的血浆蛋白质，发现差异蛋白质表达点，预测与上皮性卵巢癌化疗耐药相关的蛋白标志物，进而指导化疗用药，为卵巢癌患者探索新的治疗方法。

1 材料与方法

1.1 一般资料

本次研究选取2014年12月至2016年12在本院接受治疗的上皮性卵巢癌患者169例，均采用手术与化疗联合治疗，化疗4～6个疗程。本研究经本院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。采集患者术后化疗的血浆标本，根据NCCN卵巢癌诊疗指南[2]，将患者标本分为2组。对照组85例，F/M为47/38例(化疗敏感：初期予以基础化疗，病情缓解，停止化疗半年后复发)，年龄45～55岁28例，年龄55～65岁33例，年龄65～75岁24例。试验组84例(化疗耐药：初期予以基础化疗，病情缓解，停止化疗半年内复发)，年龄45～55岁29例，年龄55～65岁37例，年龄65～75岁18例。2组患者年龄基本资料对比，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 患者纳入排除标准

纳入标准：①均为上皮性卵巢癌患者；②其他器官无恶性肿瘤且无相关恶性肿瘤疾病的病史；③均采用手术与化疗的联合治疗方法，化疗4～6疗程；④根据卵巢恶性肿瘤手术病理分期(FIGO)[3]分为Ⅰ～Ⅳ期。排除标准：①其他病理类型的卵巢癌患者；②未进行手术与化疗的联合治疗；③患有其他部位恶性肿瘤或有过相关疾病病史；④不符合FIGO病理分期。

1.3 上皮性卵巢癌复发标准

①肿瘤标志物水平升高；②影像学检查提供依据；③其他检查出现异常；④腹胀、腹痛、排便异常等消化道症状，部分患者阴道出血[4]。出现以上任一情况，可根据临床表现、症状及以上检查予以诊断复发。

1.4 检测方法

采集患者血浆标本，分为2组即对照组(化疗敏感)和试验组(化疗耐药)，运用双向凝胶电泳的技术，筛选2组患者的差异蛋白质表达点，并对其进行图像扫描分析并鉴定[5]。

1.5 统计学意义

2 结果

2.1 上皮性卵巢癌患者化疗耐药与手术病理分期的关系

本次研究中，对照组(化疗敏感)患者病例85例，其中Ⅰ期42例，Ⅱ期34例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例；试验组(化疗耐药)患者病例84例，其中Ⅰ期20例，Ⅱ期 31例，Ⅲ期 28例，Ⅳ期5例。2组对比，差异具有统计学意义(C=0.67，P=0.04)，说明化疗耐药与手术病理分期存在一定的相关性。

2.2 2组患者血浆2-DE结果比较及蛋白质鉴定

将2组血浆标本分为上皮性卵巢癌对照组(化疗敏感)和试验组(化疗耐药)，使用2-DE技术筛选出差异蛋白点并进行鉴定，蛋白质表达用灰度值表示，灰度值均值相除得到差异倍数，蛋白质表达上调或下调>200%，发现其中明显上调的有：凝集素、碳酸酐酶、补体 C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 链；明显下调的有：补体 C3、触珠蛋白、载脂蛋白 E、β-2-糖蛋白、甲状腺素运载蛋白、补体因子I轻链、Igγ-2 链C区、Igγ-1链C区、Igκ链C区，见表1。

表1 2组患者结果对比及蛋白质鉴定

3 讨论

卵巢癌是仅次于子宫颈癌和子宫体癌的女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，早期难以发现，致死率位居妇科恶性肿瘤首位。上皮性卵巢癌更是其中的典型，对妇女患者身体健康造成严重威胁[6]。目前治疗上皮性卵巢癌的大多数方法是手术基础上辅助化疗，联合治疗。化疗是目前治疗恶性肿瘤重要的手段之一，但是恶性肿瘤细胞对化疗药物的耐药常常最终导致化疗失败，进而影响患者恢复，这也是卵巢癌患者的致死率居高不下的原因[7-10]。对于妇科肿瘤临床而言，及早发现并诊断化疗耐药有利于进一步改善上皮性卵巢癌的预后。生物标志物是指可以标记系统、器官、组织、细胞及亚细胞结构或功能的改变或可能发生的改变的生化指标，应用广泛，目前多用于疾病诊断、判断疾病分期或新疗法在目标人群中的安全性及有效性[11-12]。本次研究通过筛选差异蛋白表达点，探讨蛋白质标志物对于治疗卵巢癌是否具有重要的临床应用意义。

本次研究中，运用双向凝胶电泳技术，分析对比上皮性卵巢癌患者的血浆，筛选出对照组(化疗敏感)与试验组(化疗耐药)不同患者的血浆中存在差异蛋白质表达点32个，其中试验组较对照组上调的蛋白质表达点共有20个，其中表现明显的有：凝集素、碳酸酐酶、补体C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 链；试验组较对照组下调的蛋白质表达点共有12个，其中表现明显的有：补体C3、触珠蛋白、载脂蛋白E、β-2-糖蛋白、甲状腺素运载蛋白、补体因子I轻链、Igγ-2链C区、Igγ-1链C区、Igκ链C区。这些差异蛋白质的下调或上调，可以反映患者的机体情况或者某些病情的改变，有利于在妇科肿瘤临床中筛选化疗耐药的生物标志物，对于卵巢癌的预测、预后及诊断复发有重要意义。

综上所述，上皮性卵巢癌患者中，化疗耐药与化疗敏感不同患者的血浆中存在差异蛋白表达点，其中表达明显的α1-抗胰蛋白酶、β-2-糖蛋白、触珠蛋白、甲状腺素运载蛋白等可能通过不同的机制影响了上皮性卵巢癌的化疗耐药，研究中标记出来的差异蛋白表达点有可能成为上皮性卵巢癌化疗耐药相关的蛋白质标志物，在临床应用中具有重要研究价值。