BO新生儿溶血诊断指标（卡式法）与临床指标相关性分析

辛磊，林琼琳，彭燕，郭雅春，徐晶心

（南昌市第三医院 输血科,江西 南昌 330000）

0 引言

新生儿溶血病是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。以ABO新生儿溶血最常见，新生儿因遗传父亲显性抗原即A（B）抗原，母亲在妊娠期间反复“经胎盘出血”，抗原进入母亲体内并刺激母体产生免疫性抗体，当足量IgG抗体进入胎儿体内时，即可导致新生儿红细胞溶血被破坏[1]。本文旨在研究新生儿溶血诊断指标包括母亲抗体效价、溶血三项（卡式法）和临床新生儿溶血常用指标（血红蛋白和血清总胆红素）之间的关联。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2017年1月至12月临床上疑为新生儿溶血症状的胎儿及其母亲血液，共127例。其中，母亲血型均为O型；新生儿年龄均≤9 d且血型为A或B型，总胆红素为33.2-691.2 umol/L。

1.2 材料与试剂

微柱凝胶抗球蛋白卡、浓度0.8%的A、B、O标准红细胞、甘氨酸/EDTA放散试剂均由长春博讯生物技术有限责任公司提供、2-Me优上海血液生物医药有限公司提供、ADVIA2400生化分析仪和ADVIA500i血细胞分析仪均由德国西门子公司提供。

1.3 方法

IgG抗A（B）抗体效价检测方法：采用微柱凝胶法检测抗体效价。取127例O型血母亲得200 uL血浆，加入等量2-Me液混匀，置37℃水浴约15 min，排6个小管，取上述混合液20 μL加生理盐水300 μL（1∶32）第1管。第2-6管；分别加入生理盐水200 μL。从第1管吸出200 μL加入第2管。再从第2管吸出200 μL加入第3管，依次倍比稀释滴度32、64、128、256、512、1024。取抗球蛋白检测卡，每孔分别加入与新生儿同型的0.8% A型B型O型标准红细胞试剂50 μL，然后依次加入倍比稀释好的血浆各50 μL。37℃专用孵育箱孵育15 min，离心（900-1500）g，最后判断结果[2]。

新生儿溶血三项检测方法和诊断标准：直抗试验：取新生儿全血洗涤三次后配成浓度4%红细胞悬液，取25 uL加入至抗球蛋白检测卡中，离心（900-1500）g，判断结果。游离试验：在标有A、B、O抗球蛋白卡检测卡中，加入新生儿血浆各50μL，加入相应的4%A型、B型、O型标准红细胞试剂25μL，放置37℃专用孵育箱孵育15 min，离心（900-1500）g，判断结果。放散试验：在标有A、B、O抗球蛋白卡检测卡中，放入新生儿红细胞酸放散后的放散液各50 μL，加入相应的4%A型、B型、O型标准红细胞试剂25 μL，放置37℃专用孵育箱孵育15 min，离心（900-1500）g，判断结果。新生儿溶血病血清学检查判断详见表1[3]。

表1 新生儿溶血病血清学检查

血红蛋白和血清总胆红素测定皆由仪器完成，其中，血红蛋白≤130 g/L则判定为新生儿贫血[4]。若血清总胆红素（STB）＜220.6 umol/L为轻度黄疸，若STB水平介于220.6-342.0 umol/L则为中度黄疸，若STB＞342.0 umol/L则为重度黄疸。

1.4 统计学处理

应用SPSS 20.0软件中χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

（1）O型血母亲血清抗体效价与溶血三项判定的ABO新生儿溶血相关性分析：O型血母亲血清IgG 抗 体 效 价 ≤ 1∶32，=1∶64，=1∶128，=1∶256，=1∶512，≥1∶1024，各对应的新生儿溶血率发生率 分 别 为 7.1%，29.4%，32.0%，75.0%，80.0%，85.7%。χ2检验值为 45.991，P＜0.05，说明 O型血母亲血清IgG抗体效价越高，其相对应的新生儿发生ABO新生儿溶血概率越高，详见表2。

表2 母亲IgG抗体效价与新生儿溶血发生率的相关性分析

（2）新生儿通过溶血三项确定的新生儿溶血病与其所对应的血红蛋白之间的相关性溶血三项结果能证实为ABO新生儿溶血的总共有60例，其中有13例存在新生儿贫血；无法证实为ABO新生儿溶血的总共有67例，其中只有10例存在新生儿贫血。两者交叉关联所得到的χ2值为0.160，P＞0.05。故无法判断两者之间的相关性，详见表3。

表3 通过溶血三项确定的新生儿溶血病与其所对应的血红蛋白之间的相关性分析

（3）新生儿通过溶血三项确定的新生儿溶血病与其所对应的黄疸程度之间的关联性。其中溶血三项结果能证实为ABO新生儿溶血的总共有60例，其中21例是轻度黄疸或以下，31例为中度黄疸，8例为重度黄疸；无法证实为ABO新生儿溶血的总共有67例，其中有47例是轻度黄疸或以下，10例为中度黄疸，10例为重度黄疸。这两项结果的χ2值为20.596，P＜0.05，认为溶血三项检测结果与黄疸程度有一定关联，且溶血三项试验阳性的黄疸程度越严重，见表4。

3 讨论

新生儿溶血是指母胎血型不一致而使得胎儿产生免疫性溶血的疾病。在我国以ABO血型不合者占多数，RhD血型不合者较少[5]。ABO新生儿溶血病是因为胎儿血反复刺激母亲体内免疫系统，到达一定程度时产生的抗体即可破坏红细胞而产生溶血症状[6]。从上述过程可以看出，母亲的免疫性抗体效价和新生儿红细胞上的免疫性抗体成为重要检测对象。而新生儿溶血最常见的临床表现是贫血和黄疸等，测定新生儿血红蛋白和血清总胆红素常作为临床诊断、治疗乃至预后的重要指标。

表4 通过溶血三项确定的新生儿溶血病与其所对应的黄疸程度相关性分析

本次研究中，发现随着母亲为O型血的血清中IgG抗A或B效价的增加，其新生儿发生新生儿溶血的概率也随之提升。这说明在新生儿溶血病，母亲的抗体效价测定在产前诊断可以提供一定程度的帮助，并客观的表明新生儿溶血病发生的可能性。研究中选取的127例样本皆为临床怀疑或需排除新生儿溶血病的临床病例，而这次研究也表明了新生儿溶血的有无与胎儿的黄疸程度有一定的相关性，而与新生儿贫血有无未发现相关性，这可能是ABO溶血更容易提升新生儿体内的血清游离胆红素，而相对于血红蛋白，因新生儿自身的代偿以及ABO溶血的自限性而使得相对稳定，也有可能所选取的样本中因其他因素比如疾病、出生时间等所造成的影响，最终对血红蛋白的波动更不敏感[7-8]。总之，O型血母亲抗A（B）抗体效价一定程度上可以对新生儿溶血率进行预测。ABO溶血三项的检测结果与黄疸严重程度有一定联系，但无法判断新生儿贫血与否，临床上需合理结合各诊断指标来综合判断患儿病情和预后，选取最优的治疗手段，有效的处理新生儿溶血病。