灵芝细胞外多糖对育肥猪生长性能和血液指标的影响

文贵辉，杨 海，刘增再

（1.湖南环境生物职业技术学院，湖南衡阳 421005；2.衡阳师范学院，湖南衡阳 421000； 3.长沙市动物疫病预防控制中心，湖南长沙 410000）

抗生素的使用可能增加动物源性食品中药物残留和致病菌产生耐药性的风险，因此，食源性抗菌药物被限制使用或禁用，我国养猪业正面临着来自疾病方面的严峻挑战。寻找新型饲料添加剂，改善猪健康、预防疾病成为当务之急。多年来，许多中药和天然产品被用作促进猪健康的饲料添加剂，一些天然草药可以改善猪肉品质和风味（胡丹等，2015）。多糖广泛存在于中药中，具有多种生物活性，如免疫调节、抗氧化、抗病毒、降糖、降脂等（刘慧，2007）。灵芝作为一种重要的促进健康的中药在中国已使用2000 多年，多糖是灵芝的主要活性成分之一。研究发现，灵芝多糖除具有抗肿瘤、抗氧化的作用以外，还可以通过增强抗原递呈细胞和单核吞噬细胞的功能来调节免疫水平，此外，灵芝多糖还具有一定的抗氧化性能和脂质代谢调节功能（杨美璐等，2018）。灵芝多糖生产成本较高，不利于推广使用，而灵芝细胞外多糖（EPG）经大规模人工浸没发酵，大大降低生产成本，使EPG 作为饲料添加剂成为可能。有报道称EPG 能促进T 淋巴细胞和B 淋巴细胞的增殖，增强免疫器官的重量，提高小鼠巨噬细胞的白细胞数量和吞噬能力（Kong 等，2000）。本文旨在评价EPG 对育肥猪生长性能和血液指标的影响。

1.1 试验材料 以灵芝浸没发酵液为原料制备灵芝细胞外多糖，去除菌丝体后，对发酵液滤液进行透析浓缩，加入95%（V/V）乙醇沉淀粗多糖。粗细胞外多糖经干燥、粉碎后用苯酚- 硫酸法测定EPG 含量为8.76%。

1.2 试验设计 试验在四川省某规模化养猪场进行，选择体重为（53.13±0.46）kg 的生长猪100头，随机分为4 组，每组5 个重复，每个重复5 头猪。试验1、2、3 组分别在对照组基础饲粮基础上添加0.1%、0.2%、0.3%EPG。试验分为两个阶段，对应的基础饲粮见表1，两个阶段分别持续35 d。

表1 饲粮配方和营养水平

1.3 样品采集及指标测定

1.3.1 生长性能 分别在两个阶段开始和结束时称量育肥猪的空腹体重，每天记录给料量和剩余料量。计算试验两个阶段和全期的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料肉比（F/C）。

1.3.2 血液指标 在试验第70 天早晨，每个重复随机选择2 头育肥猪，前腔静脉采血，10 mL/ 头，血液样本用EDTA 抗凝，采血前将猪饥饿12 h。血液在室温静置1 h 后离心收集上层血浆。用ELISA 试剂盒（赛默飞世尔科技公司）测定血浆中免疫球蛋白G（IgG）、白细胞介素2（IL-2），自动生化分析仪检测血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度。1.4 数据统计 采用SAS 9.2 对数据进行方差分析，采用Duncan’s 法多重比较。结果以“平均值± 标准误”表示，P ＜0.05 为差异显著。

2 结果

2.1 灵芝细胞外多糖对育肥猪生长性能的影响 由表2 可知，EPG 处理组育肥猪在试验第35 天和70 天时的体重与对照组无显著差异。在0 ～35 d 阶段，EPG 处理组ADG、ADFI、F/C 无显著变化（P ＞0.05）；35 ～70 d 阶段，与对照组相比，试验1、2、3 组育肥猪ADG 分别增加7.2%、9.5%、8.3%（P ＜0.05），F/C 降低4.5%、5.3%、4.6%（P＞0.05）。在整个试验期间，与对照组相比，试验2 组ADG 显著增加7.4%（P ＜0.05），试验1、3组ADG 分别增加5.3%、5.7%（P ＞0.05），试验1、2、3 组F/C 分 别 降 低3.0%、4.1%、2.9%（P ＞0.05）。

表2 灵芝细胞外多糖对育肥猪生长性能的影响

2.2 灵芝细胞外多糖对育肥猪血液指标的影响 由表3 可知，与对照组相比，试验1、2、3 组育肥猪血浆中IgG 浓度分别增加20.1%、36.1%、25.5%（P ＜0.05），IL-2 浓度分别增加16.6%、23.3%、14.4%（P ＜0.05），球蛋白浓度分别增加10.4%、13.0%、13.8%（P ＜0.05），甘油三脂浓度分别降低10.9%、28.1%、17.2%（P ＜0.05）。试 验2、3组育肥猪血浆中白蛋白和球蛋白的比值分别较对照组降低12.4%、11.5%（P ＜0.05），LDL-C 浓度分别降低12.8%、11.1%（P ＜0.05），试验2 组血浆中总胆固醇较对照组降低9.2%（P ＜0.05）。

表3 灵芝细胞外多糖对育肥猪血液指标的影响

3 讨论

3.1 灵芝细胞外多糖对育肥猪生长性能的影响 近年来有报道称，中草药多糖具有提高猪抗病力，营养物质消化率，改善猪生长性能的作用（刘慧，2007）。灵芝是灵芝属真菌，具有较高的药用价值，长期以来用于治疗糖尿病、支气管炎等疾病。随着技术进步，越来越多的研究开始分离灵芝的有效成分，现已报道的成分有200 多种，包括多糖、核苷类、生物碱等，其中灵芝多糖被广泛研究，是灵芝主要的生物活性物质（姜沅彤，2015）。研究表明，灵芝多糖具有多种生物学功能，包括（1）促进巨噬细胞分化，调节淋巴细胞的免疫应答，增强机体免疫功能；（2）促进INF-γ 分泌，激活P38等信号途径，抑制肿瘤细胞生长，并且在临床试验中也证实灵芝多糖的抗肿瘤作用；（3）清除自由基，起到抗氧化、抗衰老的作用；（4）调节糖代谢相关酶活性，降低血糖、提高胰岛素敏感性；（4）降低炎症因子表达，抑制炎症反应（王颖等，2019 ；胡丹等，2015）。而目前灵芝多糖对畜禽生长的相关报道较少，本研究发现，育肥猪饲粮中添加EPG 显著增加了育肥后期ADG，F/C 得到改善。Mushtaq 等（2017）研究表明，饲粮中分别添加灵芝、穿心莲、姜黄均显著提高肉鸡ADG，F/C 降低。邢瑞虎等（2013）以1 日龄肉鸡为研究对象，饲粮中添加灵芝培养物（主要成分为灵芝多糖和灵芝酸）显著改善低营养水平下肉鸡42 日龄时的饲料转化率。此外，将灵芝多糖饲喂罗氏沼虾发现，添加量为2.5 g/kg 时罗氏沼虾的生长性能和消化酶活性显著提高（Mohan 等，2016）。以上研究表明，饲粮中添加EPG 有助于提高育肥猪生长性能。

3.2 灵芝细胞外多糖对育肥猪血液指标的影响 血液指标可以直接反映机体代谢水平，并且与机体营养、健康状况相关。细胞因子是T 细胞和B细胞免疫反应极其重要的调节因子，IL-2 浓度增加可促进T 细胞增殖并启动细胞免疫，IgG 可以直接反映体液免疫状态。在本试验中，EPG 处理组育肥猪血浆中IL-2 和IgG 浓度均高于对照组，表明其体液免疫和细胞免疫功能均有改善。EPG对育肥猪免疫功能有增强作用，可以推测饲料中添加EPG 可以提高育肥猪健康状况和对传染病的抵抗能力。血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白在一定程度上能综合反应动物体对蛋白质的利用情况及免疫水平，白蛋白与球蛋白比值下降表明合成更多的球蛋白以改善机体免疫功能（王婷等，2017）。本研究结果显示，EPG 处理组育肥猪血浆中球蛋白含量、白蛋白/ 球蛋白显著升高，从另一个角度表明，EPG 对育肥猪免疫功能具有促进作用。邢瑞虎等（2013）发现，灵芝培养物能显著提高肉鸡新城疫疫苗的抗体效价。易霞等（2017）发现，添加灵芝多糖能显著降低血清中炎症因子IL-1β 浓度，促进注射蓝耳弱病毒组育肥猪产生特异性抗体。除此之外，在本试验中添加EPG 降低了血浆中甘油三酯和总胆固醇的浓度，两者在血浆中含量降低影响其在肉中的含量，进而提高肉质。Chen 等（2005）报道灵芝多糖影响高脂血症大鼠血脂代谢，降低血清中总胆固醇和甘油三酯含量。本研究结果与前人报道相符，表明饲粮中添加EPG 能增强育肥猪免疫功能，起到调节脂肪代谢的作用。

4 结论

综上所述，饲粮中添加EPG 显著影响育肥猪生长，这可能与EPG 增强育肥猪免疫功能有关，此外，EPG 还能影响育肥猪脂肪代谢，对肉质起到调节作用，最适添加量为0.2%。