吸收放散试验及抗体增强方法在173例ABO疑难血型鉴定中的应用研究

胡志涛

（北大医疗鲁中医院，山东 淄博 255400）

临床实践经验表明，如何提高ABO血型鉴定准确性，考验相关人员责任心与技术。在基层医院，很多输血科尚未普及基因检测技术，以血清检验方法为主，在应对疑难血型鉴定时，主要采用吸收放散试验方法，虽然效果显著，但是低效价血清抗体检测操作效率比较，为进一步提高鉴定准确性，采用吸收放散试验及抗体增强方法，取得满意效果。现对173例ABO疑难血型鉴定结果进行回顾性分析，探讨鉴定方法及效果。

1 材料与方法

1.1 患者资料

调取所在医院173例需要输血治疗的患者的临床资料，所选患者均满足本研究病例收集标准[1]，本组患者中，男性患者90例，女性患者83例，年龄范围20～70岁，平均年龄（52.33±3.48）岁。本组患者血标本均为ABO血型鉴定正反定型不符情况，其中血型抗原减弱89例，ABO亚型30例，高效价冷凝集素29例，抗体效价降低25例。排除标准：（1）未成年人；（2）合并明显诊疗风险者；（3）对诊疗情况不知情者。

1.2 鉴定材料

血清试剂、抗体筛选红细胞、ABO反定型红细胞等均购自国内某医药公司，抗A、抗B血清有所在医院输血科室自主完成制备，效价确定为1：32。全自动血型分析仪及配套试剂由国内某公司提供，同时准备37℃恒温水浴箱、血清学离心机，均有国内公司提供。

1.3 鉴定方法

（1）吸收放散试验：将微柱凝胶法检验后正反定型不相符的血液标本单独列出，利用吸收放射试验，对血清抗A、抗B抗体、红细胞ABO抗原进行检测。在被检测血清中，添加试剂红细胞（A型或B型），将其置放在4℃环境中，时间控制在2～4 h，期间每隔一刻钟对血清进行振摇。与此同时，采用生理盐水，对红细胞进行洗涤，次数为5～6次。按照1：1比例标准，在压积红细胞中添加生理盐水，将其置放在56℃水浴放散，时间为10 min，然后开展离心处理，取上清液。在上清液中添加1滴红细胞悬液，再次行离心处理，然后利用显微镜进行观察，做好详细记录和分析。

（2）抗体增强方法：对于离心处理不发生凝集反应的血清（低效价），适当增加离心处理的次数，并在此基础上对反应时间进行延长，或者采用增加血清检测量的方法，在4℃环境中静置15 min。通过上述方法，使检验试剂中的红细胞所含的抗体数量得到明显增加，从而强化凝集的效率与强度，为血型鉴定操作提供更多便利条件。

1.4 观察指标

对本组173份正反定型不相符血标本的吸收放散试验及抗体增强方法检测结果进行分析，做好详细统计。

2 结 果

本组173例患者直接抗人球蛋白试验呈阴性，被红细胞吸收后，抗A、抗B血清效价明显降低，所有患者均产生预期血型抗原抗体反应，最终ABO血型正反定型相符。

3 讨 论

ABO血型鉴定是临床重要检验项目，是判断输血相容性的重要依据，对保证输血安全具有重要意义。ABO血型鉴定主要利用定型试剂，对血清红细胞抗原及血清抗体进行测定，只有正反定型方相符，才能准确鉴定血型。一般而言，红细胞抗原凝聚强度要达到3+或4+，鉴定准确性能够得到保证。若＜2+，则可将其认定为多种因素导致的亚型情况[2]。基于上述分析认为，一旦出现正反定型不相符现象，不仅对血型结果判断带来影响，同时也会使得输血及时性和有效性受到制约。吸收放散试验，主要是利用物理方法洗脱红细胞冷凝集素，保证输血相容性检测准确性[3]。通过本研究证实，吸收放散试验配合抗体增强，可增强输血相容性，将其置放在4℃环境中，可促使弱小凝集效应消失，在ABO血型鉴定中发挥重要作用，使血型正反定型相符，为血型判断提供帮助。