姜帅先,田 野
(1.吉林体育学院,吉林 长春 130000;2.长春建筑学院,吉林 长春 130000)
猴头菇(Hericium erinaceus) 又名猴头菌,因其子实体圆而厚,基部狭窄或略有短柄而上部胖大,外形酷似猴头而得名[1]。猴头菇菌肉味香鲜嫩,香醇可口,素有“山珍猴头、海味燕窝”“素中荤”的说法,是我国著名的八大山珍之一,在古代只有皇家贵族才能享用。猴头菇不仅营养美味,还具有一定的药用价值,对于脾胃气虚、腹胀痛等胃肠病有很好的疗效[2]。目前已经有许多的猴头菇多糖片、猴头菇粉、猴头菇胶囊和口服液等药品,还有猴头菇饼干、猴头菇饮料等保健品。这主要利用猴头菇提取液含有的多糖、多肽类物质和丰富的蛋白质、氨基酸和磷、维生素等营养元素[3]。
职业运动员应该是健康、强壮的代表,但对于运动员来说,日常的运动训练让他们的身体和心理都长期处理一个疲劳状态。一方面,身体的免疫系统会产生压迫,造成“免疫抑制”,而运动员在剧烈运动后会有一个疲劳窗口期,很容易导致免疫力下降,反而更容易受到病菌的感染[4]。同时,过度的运动会对免疫系统产生短暂的抑制作用;另一方面,长时间运动身体的肌肉骨骼时常会有疲劳损伤,引起的抗炎症反应也削弱了抵抗细菌或病毒的能力,这种疲劳就是运动性疲劳。而猴头菇提取液中含有的有效成份,可以有效清除人体内多余的自由基,修复受损运动细胞,减轻运动产生的抗炎症反应[5]。已有研究表明,猴头菇提取液具有很强的抗氧化和抗疲劳作用,可以抵御因运动产生的炎症和疲劳,促进身体自身免疫力的提升,加速运动组织的修复和再生[6]。通过对猴头菇在抗运动性疲劳方面的研究,进一步探讨猴头菇的食药用功效。
猴头菇干品,古田县胜峰食用菌有限公司(胜峰品牌;猴头菇菇体直径≥9 cm;水分≤85%;杂质≤0.1%)。无水乙醇、丙酮、蒸馏水(分析纯),开封东大化工有限公司试剂厂;丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒均,上海哈灵生物科技有限公司。
FW100实验室高速微型粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司;TGL16M台式高速冷冻离心机,湖南凯达离心机厂;202-00BA电热恒温干燥箱,南京晓晓仪器设备有限公司;RHTQ-G型超声波辅助提取设备,济宁荣汇超声波设备有限公司;AU680全自动生化分析仪,贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司。
猴头菇有效成份主要是多糖、多酚、多肽等大分子结构物质,属于水溶性成分,因此常用的提取方法有热水浸提、回流、超声浸提、乙醇提取等[7]。具体的操作方法如下。
猴头菇干品清洗后60℃烘干30 min,粉碎过80目筛后与蒸馏水按料液比为1∶10充分混合,制成猴头菇干粉悬浮液,放入超声波辅助提取设备,在80 KHz声频下80℃连续提取3 h,上离心机在4 000 r·min-1下离心15 min,取上清液在60℃下浓缩至5倍体积。继续在浓缩液中加入3倍体积的95%的乙醇静置24 h后收集乙醇沉淀物,再依次用75%乙醇、无水乙醇、丙酮滤洗两次后,60℃下烘干直到呈干燥粉末状,得猴头菇有效成份提取物。
试验选用同一批次鼠龄一致的SPF级小鼠40只,由常州卡文斯实验动物有限公司提供,生产许可证编号:SCXK(苏) 2016-0010。分笼适应性饲养1周,自由饮食和饮水、动物房饲育室温度25℃、相对湿度50%、12 h交替照明。适应性饲养结束后称重记录分组,每组10只小鼠。高剂量组每日定时经口给小鼠灌胃1次剂量为400 mg·kg-1BW的猴头菇提取液;中剂量组每日定时经口给小鼠灌胃1次剂量为200 mg·kg-1BW的猴头菇提取液;低剂量组每日定时经口给小鼠灌胃1次剂量为100 mg·kg-1BW的猴头菇提取液;空白对照组灌胃同样体积生理盐水,连续灌胃30 d。每周记录小鼠的体重变化。
1.3.1 小鼠负重游泳试验
在末次灌胃前一天对每组小鼠进行力竭游泳试验。小鼠放入水槽中迫使其游泳,观察并记录小鼠从入水到沉入水面下10 s后的时间,作为小鼠力竭游泳时间。剔除力竭游泳时间差异过大的小鼠,在末次灌胃1 h后,将每组筛选出的小鼠进行负重游泳试验。在小鼠尾部系5%~10%体重的重物,先将小鼠全身放入水槽浸湿后松开记录时间。记录到小鼠沉入水面下7 s~10 s的时间即为负重游泳时间,水槽水温控制在25℃左右。
1.3.2 小鼠抗氧化试验
小鼠负重游泳试验结束后,将小鼠擦干,摘取小鼠眼球后在眼眶处采血并分离血清。采用分光光度法测定按照丙二醛(MDA)试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD) 试剂盒说明,测定丙二醛含量和总超氧化物歧化酶活力。
1.3.3 小鼠血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮检测
将采集的血样用生化分析仪进行血液指标检测,主要进行血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮含量检测。
小鼠体重变化结果见表1。
表1 猴头菇提取液对小鼠体重的影响Tab.1 Effect of Hericium erinaceus extract on body weight of mice
由表1可知,经过4周的饲养,灌胃高剂量、中剂量、低剂量猴头菇提取液的小鼠体重与对照组相比均有明显的增加。3个剂量组小鼠平均增重44.12 g,与灌胃生理盐水的对照组相比增加了14.84%;试验结果显示,小鼠增加的重量与灌胃的剂量并没有量价关系,增重幅度相差不大。
小鼠负重游泳试验结果见表2。
表2 猴头菇提取液对小鼠负重游泳时间的影响Tab.2 Effect of Hericium erinaceus extract on weight-bearing swimming time in mice
由表2可知,灌胃3种剂量猴头菇提取液的试验组与对照组相比,小鼠的平均负重游泳时间都有增加,其中高剂量组对小鼠负重游泳时间的影响最大,与对照组相比提升了40.28%。灌胃3种剂量猴头菇提取液的小鼠平均负重游泳时间为111.87 min,与对照组相比提升了26.16%;猴头菇提取液的灌胃剂量与负重游泳时间呈一定的正比量价关系。
小鼠抗氧化试验结果见表3。
表3 猴头菇提取液对小鼠抗氧化能力的影响Tab.3 Effect of Hericium erinaceus extract on antioxidant capacity of mice
由表3可知,低剂量组、中剂量组与对照组相比,丙二醛含量均有所上升,中剂量组略高于低剂量组;但高剂量组的丙二醛含量下降明显,高剂量组与对照组相比丙二醛含量下降了17.77%。高剂量组、中剂量组、低剂量组与对照组相比超氧化物歧化酶含量均有所上升,中剂量组上升幅度为27.78%;而高剂量组上升幅度达59.36%,并且猴头菇提取液的灌胃剂量与超氧化物歧化酶含量呈一定的正比量价关系。
小鼠血乳酸、肌酸激酶、血尿素氮检测结果见表4。
表4 猴头菇提取液对小鼠血乳酸含量的影响Tab.4 Effect of Hericium erinaceus extract on LD content in mice
由表4可知:1)3个剂量组小鼠血乳酸含量与对照组相比均有明显的下降,分别下降了46.50%、27.90%和16.87%,并且猴头菇提取液的灌胃剂量与血乳酸含量呈一定的反比量价关系。2) 3个剂量组小鼠肌酸激酶含量与对照组相比均有明显的下降,其中高剂量组与对照组相比下降了32.74%;而中剂量组、低剂量组与对照组相比分别下降了18.26%和19.63%,相差不大。3)3个剂量组小鼠血尿素氮含量与对照组相比均有明显的上升,而低剂量组反而出现下降。其中高剂量组、中剂量组与对照组相比分别上升了41.87%和13.23%,而低剂量组与对照组相比反而下降了19.09%。
通过连续30 d给小鼠灌胃猴头菇提取液,小鼠的体重均有明显的增加。分析其原因是猴头菇提取液中含有的丰富蛋白质和氨基酸等营养物质,可以有效补充小鼠的运动营养需求。运动会燃烧机体的糖等能量,一旦运动量过大,机体就会消耗蛋白质来弥补糖类消费量,就会造成蛋白质流失引起体重下降。而额外补充蛋白质,可以为机体提供更多的能量来源。同时,蛋白质是肌肉细胞生长和修复的重要物质。补充足量的蛋白质可以有效增加肌肉生长速度;同时,猴头菇提取液中含有的维生素和矿物质也可以提高进食的营养物质利用率,让机体吸收更好的营养。消减运动疲劳给机体带来的肌肉流失,提高机体的免疫力和抗疲劳能力。