不同干燥方法对白芍药材初加工过程中品质的影响*

俞叶飞 王 盼 陈子林 浦锦宝 胡轶娟 徐 攀 梁卫青#

1 浙江省大盘山国家级自然保护区管理局 浙江 金华 322300

2 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

白芍为毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根[1]。本实验以浙产道地药材白芍为研究对象，采用自然晒干、烘箱干燥、真空干燥、微波干燥、微波真空干燥等方式，探讨不同干燥方法对白芍药材初加工过程中品质的影响。

1 仪器与材料

1.1 仪器：高效液相色谱仪(VARIAN，Prostar 230型三元泵，330型二极管阵列检测器，410型自动进样器)、色谱柱Hypersil C18柱(250×46mm,5µm)，电热恒温鼓风干燥箱、真空干燥箱、真空微波干燥仪、酸度计、电子恒温水浴锅、旋转蒸发仪、十万分子一电子天平。

1.2 材料：白芍采自浙江磐安中药材种植基地，经浦锦宝研究员鉴定为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110736-200833)，苯甲酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100419-200301)，葡萄糖(中国药品生物制品检定所，批号：110833-200503)。乙腈、甲醇、异丙醇均为色谱纯，水为超纯水，乙醇、磷酸、氢氧化钠、冰醋酸均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 加工方法：同一批新鲜白芍药材除去泥沙，洗净，除去头尾和细根，作为实验材料备用。每个加工处理方法重复3次。鲜品切片晒干（不经煮制）：取新鲜白芍样品，去皮后切片，切片厚度为2.0～3.0mm，平铺于样品盘中，置室外阳光下晾晒至干。自然晒干：取新鲜白芍样品，置沸水中煮制，去皮后切片，平铺于样品盘中，置室外阳光下晾晒至干。烘干：取新鲜白芍样品，置沸水中煮制，去皮后切片，平铺于样品盘中，置干燥箱进行干燥。真空干燥：取新鲜白芍样品煮制，去皮后切片，平铺于样品盘中，置真空干燥箱下进行干燥。微波干燥：取新鲜白芍样品煮制，去皮后切片，平铺于微波炉专用托盘上，均匀铺开，于微波下干燥。微波真空干燥：取新鲜白芍样品煮制，去皮后切片，平铺于微波炉专用托盘上，均匀铺开，设置真空度，于微波下干燥。

2.2 芍药苷含量测定：色谱条件：色谱柱：Hypersil C18柱(250mm×46mm，5µm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；流速：1.0ml/min；检测波长：230nm；柱温：30℃，进样量：10µl。参考中华人民共和国药典2015年版一部白芍项下，理论塔板数按芍药苷峰计算不应低于2000，在此条件下，芍药苷与相邻成分达到基线分离。

标准品溶液的配制：精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含60µg的溶液，即得。供试品溶液的配制：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超声处理30min，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得。样品含量测定：称取白芍样品，按上述方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进行分析，测定样品中芍药苷的含量，每个加工方法重复测定3次，取其平均值作为最终结果，见表1。

2.3 白芍总苷含量测定：色谱条件：色谱柱：Hypersil C18柱(250mm×46mm，5µm)。流动相：甲醇-0.1%磷酸-异丙醇-冰乙酸（85∶155∶4∶6）；流速：1.0ml/min；检测波长：230nm，柱温：30℃，进样量：10µl。

标准品溶液的制备：精密称取苯甲酸对照品适量，加流动相制成每1ml含200µg的溶液，即得。标准曲线的制备：分别精密吸取对照品溶液0.5ml、1ml、2ml、4ml、5ml、10ml置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，分别精密吸取10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值Y为纵坐标，苯甲酸量X（μg）为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为：Y=2.4657×107X-1.5343×106，r=0.9998。供试品溶液的制备：取本品粉末0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入稀乙醇50ml，超声处理30min，滤过，水浴挥干，残渣用5%氢氧化钠溶液5ml溶解，取该溶液0.5ml，置5ml具塞试管中，沸水浴水解2h，取出，冷却至室温，加流动相至2.5ml，摇匀，用0.45µm微孔滤膜滤过。根据峰面积测定苯甲酸的含量，再计算出白芍总苷的含量，公式为白芍总苷含量=[（水解后总苯甲酸含量-游离苯甲酸含量）×480.27/122.12]×100%。样品含量测定：取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，根据相应线性关系计算样品中白芍总苷的含量，每个加工方法重复测定3次，取其平均值作为最终结果，见表1。

2.4 多糖含量测定：标准曲线的绘制：精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖对照品适量，加蒸馏水溶解制成每1ml含200µg的标准溶液，依次移取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml于10ml棕色具塞试管中，各加蒸馏水至2.0ml，摇匀，另取2.0ml蒸馏水作空白管，然后各管加入5%苯酚1.0ml和浓硫酸5.0ml，混匀，置100℃水浴中加热15min，取出，置冰水浴中5min，取出，室温放置10min后，照紫外-可见分光光度法（2015版中国药典一部附录VA），在490nm波长处以空白溶液做参比，测定吸光度。以葡萄糖浓度(μg/ml)为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=0.05900X+0.1299(r=0.9989)。供试品溶液的制备：称取白芍粉末约1.0g，分别加水100ml水，精密称定重量，加热回流提取2h，提取完成后放冷，用蒸馏水补足重量，过滤，精密吸取滤液5.0ml，加入无水乙醇20ml，混匀5min，3000r/min离心5min，沉淀用80%乙醇洗涤数次，用水溶解并转移50 ml容量瓶，定容至刻度，即得。样品测定：精密吸取供试品溶液2.0ml于10ml棕色具塞试管中，照标准曲线制备项下显色，于490nm下扫描，测定吸光度值，以相应试剂为空白，按标准曲线计算样品中多糖含量。每个加工方法重复测定3次，取其平均值作为最终结果，见表1。

表1 样品含量测定结果（n=3）

结果显示，不同干燥方法对白芍药材中芍药苷、白芍总苷、多糖、苯甲酸的含量均有影响。不同加工干燥方法样品的芍药苷和白芍总苷含量存在一定差异，但水煮与否的加工方法对芍药苷和白芍总苷含量差异较大，尤其是游离苯甲酸的含量降低较为明显，同时，微波真空干燥方法大大缩短了白芍药材的干燥时间。

3 讨论

3.1 白芍水煮与否对白芍药材质量的影响：从芍药、白芍总苷、游离苯甲酸、多糖的含量变化来看，白芍水煮与否对白芍药材的质量有明显差异，且对芍药苷和白芍总苷含量的影响大于多糖含量的影响。结果表明，白芍经水煮制后，芍药苷和白芍总苷的含量均有所增加，可能因煮制过程使酶活力丧失，起到了杀酶保苷作用，同时多糖含量下降，而作为有害成分的游离苯甲酸则明显降低，苯甲酸在白芍中视为无效成分[2]，摄入一定量后还会增加肝脏的解毒负担，因此，白芍在产地加工过程中，应首先进行水煮制，再进行去皮切片干燥的方法。

3.2 不同干燥方法对白芍药材质量的影响：从芍药苷、白芍总苷、总多糖三种指标性成分的含量测定结果来看，不同干燥方法对白芍药材质量产生一定影响[3]，且对白芍总苷含量的影响大于芍药苷，加工干燥方法对白芍质量的影响已有一些报道[4-5]，比较分析的方法各异，结论也不尽相同。本研究结果显示：白芍微波真空干燥加工的芍药苷和白芍总苷含量都是最高，白芍经水煮后多糖含量有部分损失，而不同的干燥方式对多糖含量的影响相对较大，真空干燥和微波真空干燥由于在真空状态下，干燥温度低，时间短，多糖含量的损失较小。因此综合考虑，选择不同加工方法时，为尽可能保留白芍的指标性成分，同时又提高白芍的干燥效率，还是采用微波真空干燥法作为白芍的干燥加工方法较好。