血细胞参考测量实验室质量控制人员比对实验分析

陈微（通信作者），王会如，杨忠，康娟，宋伟，朱晋升

北京市医疗器械检验所·医疗器械检验与安全性评价北京市重点实验室 （北京 101111）

CNAS-CL01：2018《检测和校准实验室能力认可准则》[1]规定质量控制的要求，质量控制是利用现代科学管理的方法和技术分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠[2]。实验室质量控制可分为外部质量控制和内部质量控制，实验室外部质量控制一般通过实验室间比对、能力验证等方式进行，实验室内部质量控制一般通过人员比对、不同方法比对、不同仪器比对、质量控制图、回收实验等方式进行[3]。

随着我国科技的快速发展，对实验人员的要求越来越高。为保障实验室质量体系有效运行，确保数据结果的可追溯性，实验人员的经验和技能是首要影响因素，并关系到实验室专业技术水平、质量水平，故人员能力建设是重要组成部分，需要推进、完善、提升。人员比对实验是指在相同的环境条件下，采用相同的实验方法、相同的仪器，由不同实验人员对同一样品进行的实验[4]。采取人员比对的方式进行内部质量控制，不仅可提升实验人员的操作能力，而且可使用比对数据缩小实验人员数据结果的差异，发现存在的问题并进行纠正和改进。本研究通过对红细胞和白细胞参考测量方法进行人员比对实验，并对其结果进行分析评价，对于提高实验人员的技术能力、为本实验室的质量控制提供可靠的数据与依据具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

样本：选取15份新鲜血样本，红细胞要求正常范围3.8×1012/L～5.8×1012/L，白细胞要求正常范围3.5×109/L～9.5×109/L。

仪器与试剂：SYSMEX 半自动电阻抗粒子计数仪，乙二胺四乙酸二钾（ethylene diamine tetraacetic acid-K2，EDTAK2）采血管，移液器（20、200、1 000 μl），容量瓶（100、1 000 ml），稀释液，溶血剂。

1.2 方法

1.2.1 比对人员要求及比对频次

本实验室选取2名授权人员，工作满8年并取得中级以上职称资格；每半年进行1次内部比对考核。

1.2.2 实验方法

每名比对人员按照WS/T 245-2005《红细胞和白细胞计数参考方法》[5]操作。红细胞计数：使用20 μl 移液器吸取新鲜血样本，加入1 000 ml 容量瓶中，使其混合均匀，倒入稀释杯中，根据半自动电阻抗粒子计数仪红细胞操作规定得出该样本中红细胞个数。白细胞计数：使用200 μl 移液器吸取新鲜血样本及1 000 μl 移液器吸取溶血剂，分别加入100 ml 容量瓶中，使其混合均匀，静置15 min 后倒入稀释杯中，根据半自动电阻抗粒子计数仪白细胞操作规定得出该样本中白细胞个数。

1.3 评价方法

红细胞和白细胞比对结果应符合本实验室制定的作业指导书《参考测量项目人员间比对》规定要求，计算比对人员同一天红细胞和白细胞样本数值的平均值，将A 人员数据作为参考值，比对实验结果按照公式（1）进行评价：

其中， xi为B 人员测定值，x 为A 人员参考值。

红细胞2%、白细胞4%为《参考测量项目人员间比对》规定的相对允差。

2 结果与分析

2.1 结果

同一天使用3支新鲜血样本，计算每3支样本总平均值，由表1和表2可以看出，实验人员比对项目数据结果的相对允差全部符合规定要求，保证了实验过程和数据的可靠性、有效性，并发现具有提升空间。

表1 实验数据比对结果汇总

表2 人员比对结果分析评价

2.2 实验操作分析

（1）样本：新鲜血样本需在规定时间内完成实验，放置时间越长，血液成分变化越大，越易影响数据结果。（2）仪器设备：仪器设备的参数和维护是保证结果可靠的关键，SYSMEX 半自动电阻抗粒子计数仪由厂家定期校准计数体积，每周使用质控物监测仪器的稳定性，并由授权专人进行该台仪器的维护[6]。（3）人员：红细胞和白细胞参考测量方法是一项细致的实验工作[7]，需要高素质的专业技术人员及更多的经验积累，个人在独立完成操作的前提下，定期组织人员比对实验确保其在规定范围内，也是对实验人员技术能力的监督。（4）其他：实验过程中，环境的温度和湿度相对恒定，样本混匀程度和溶血时间等因素都会影响数据结果。

3 讨论

人员比对是内部质量管理控制的方法之一，在实验活动中实施内部质量控制和质量监督，采取纠正措施和预防措施持续改进管理体系，可提高实验人员的技术水平及素质能力，其主要通过考核实验结果的一致性来保证数据结果的可靠性和有效性[8]。如果实验人员未经过专业的培训和考核，不同实验人员对同一实验方法进行操作，得出的结果会有很大差异[9]。实验人员严格按照内部制定的作业指导书及标准进行实验，尽量减少环境设备等影响因素，可使内部质量得到有效控制；定期组织开展人员比对实验，分析实验人员之间的差异，可使其从自身分析过程中找出存在的问题。

总之，影响实验工作准确性的因素有很多，为切实提升实验室的能力，有效控制实验室的内部质量，需通过人员比对及外部机构组织的能力验证活动，了解真实水平，发现问题，并进行纠正和整改，才可有效达成目标[10]。