两种药物对两个翘嘴鲌群体的急性毒性试验

周陆 王军 王成辉 张友良 余陆伟 张国奇

(1 上海市松江区水产良种场，上海 201616； 2 上海海洋大学，农业农村部淡水水产种质资源重点实验室，水产科学国家级实验教学示范中心，上海水产养殖工程技术研究中心，上海 201306)

翘嘴鲌(Culteralburnus)隶属于硬骨鱼纲、鲤形目、鲤科、鲌亚科、鲌属，俗称白丝、大白鱼、翘嘴白鱼等。该鱼以体型好、味道鲜美、肉质细嫩而著称，是我国重要的经济水产品种[1]。翘嘴鲌的分布较为广泛，在我国各大水系均有分布，但由于南北水域地理位置差异较大，形成了如长江水系、珠江水系、黑龙江水系等多个不同地理群体，不同水系群体的生殖生理特性具有显著差异[2-5]。

近年来，随着翘嘴鲌人工繁育技术的突破和人们对该品种的认知度逐渐提高，其养殖规模越来越大，养殖前景普遍看好。目前大量的研究聚焦于翘嘴鲌的良种选育、人工繁育、苗种培育、养殖病害和营养组成等，旨在提升翘嘴鲌养殖产业的发展[6-11]。之前的研究表明，不同水系的翘嘴鲌群体由于生存环境的差异，其遗传、生长和生理性能等方面存在明显差异[1-2]。但目前有关不同水系翘嘴鲌群体病害防治和药物使用的研究较少。活性碘和阿维菌素作为常用的消毒剂和杀虫剂被广泛运用在水产动物的养殖生产中[12-13]，对渔业生产具有重要的意义。为研究南北水系翘嘴鲌群体对这2种常用水产药物的耐受性差异，本文对前期构建的南北水系2个翘嘴鲌选育群体的鱼种进行了2种药物的急性毒性试验，试验结果可为翘嘴鲌养殖过程中进行消毒和杀虫工作提供数据参考和理论支持。

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验鱼来自上海市松江区水产良种场五厍基地，分别为南方水系翘嘴鲌群体F1(S-F1)和北方水系翘嘴鲌群体F1(N-F1)，南方水系翘嘴鲌群体的奠基群体来自于长江和淮河水系，北方水系翘嘴鲌群体的奠基群体来自于黑龙江水系。2个群体试验鱼的规格无明显差异，其中，南方水系群体试验鱼500尾，体长73～83 mm，体质量3.8～5.8 g；北方水系群体试验鱼500尾，体长67～75 mm，体质量4.2～5.9 g。试验前，将试验鱼放入暂养池内驯养48 h，每日换水，清除池底污物，保持水质清新，溶解氧充足。待试验鱼适应暂养池的水体环境后开始正式试验。选择活力好，无伤无病的个体作为试验对象。

试验药物为“金碘”(有效活性碘质量分数为1.8%～2.0%)和“混养安”(阿维菌素有效含量为1.0%)。用纯净水将“金碘”和“混养安”分别配制成质量浓度为100 mg/L和10 mg/L的母液待用。试验时，使用养殖水将药物母液稀释配制成试验所需的不同质量浓度。保持各试验组饲养环境一致，试验水温为22.7 ℃，盐度为0，pH为7.9～8.3，氨氮为0.24 mg/L，亚硝酸盐为0.09 mg/L，溶解氧为8.7 mg/L。

表1 试验药物质量浓度设置

1.2 试验方法

为了评估两种药物的合理试验浓度，本试验先开展了试验鱼耐受药物浓度的预试验。在8口规格为60 cm×50 cm×50 cm(长×宽×高)的玻璃缸中，分别放入质量浓度依次为0.1、1、10、100 mg/L的两种药物的溶液，每缸放入10尾试验鱼，每隔6 h观察鱼的死亡情况并进行记录，及时将死鱼捞出，试验时长为24 h。根据预试验结果逐渐缩小药物的浓度区间，以确定试验鱼耐受的药物浓度范围。

根据预试验结果，每种药物以等差数列设置5个质量浓度梯度，每个浓度组设3个平行，同时设1个空白对照组。具体试验药物浓度设置情况见表1。每个容器(60 cm×50 cm×50 cm)中放20尾试验鱼，同时在试验开始的6 h内不间断观察试验鱼的游动能力、平衡能力、体色变化等。随后分别在6、12、24、48和96 h时记录试验鱼的死亡数量并捞出死鱼，同时适时监测水体中溶解氧的情况，确保水体中溶解氧含量不低于5 mg/L。如发现试验鱼停止任何运动行为，且用玻璃棒触碰其身体无反应则可认定其死亡。

1.3 数据处理

运用SPSS 25.0软件建立各药物浓度与死亡率之间的线性回归方程[14]，分别计算活性碘和阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的半致死浓度(LC50)和95%置信区间[15]。安全质量浓度(SC)计算公式如下：

SC=0.3×48 h LC50/(24 h LC50/48 h LC50)2

(1)

式中，24 h LC50为24 h的半致死质量浓度，48 h LC50为48 h的半致死质量浓度。

根据《化学农药环境安全评价试验准则第12部分：鱼类急性毒性试验》(GB/T 31270.12—2014)中规定的有毒物质对鱼类毒性等级评价标准，96 h半致死质量浓度划分为4个等级：<0.1 mg/L为剧毒；0.1～1.0 mg/L为高毒；1～10 mg/L为中毒；>10 mg/L为低毒。

2 结果和分析

2.1 中毒症状

2个翘嘴鲌群体在安全质量浓度的活性碘药液和阿维菌素药液中能够正常活动，与空白对照组试验鱼的活动情况几无差异。在质量浓度分别为16 mg/L和20 mg/L的活性碘溶液中，2个群体的试验鱼表现出基本相同的行为或表观变化，主要表现为：呼吸困难，鳃盖张开，吸气时口部和鳃盖张大，体色逐渐加深转为暗白，体表黏液增多，停止游动，身体逐渐失去平衡，腹部向上翻转。在质量浓度分别为0.5 mg/L和0.6 mg/L的阿维菌素药液中，2个翘嘴鲌群体的试验鱼亦表现出相同的行为或表观变化，主要表现为：前期神经性兴奋，快速游动，有个别鱼撞击容器壁；中后期则游动无力，反应迟缓，体色逐渐转暗加深，身体失去平衡，腹部向上翻转，身体微微弯曲变形。

2.2 活性碘对2个翘嘴鲌群体的毒性比较

活性碘对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果及分析见表2、表3。结果显示，当活性碘质量浓度为4 mg/L时，2个水系的翘嘴鲌96 h内均无死亡。当质量浓度高于4 mg/L时，随着浓度的增加，2个水系翘嘴鲌的死亡率逐渐上升，与药液浓度呈正相关的关系。经计算，活性碘对南方水系和北方水系翘嘴鲌群体的安全质量浓度分别为2.140 mg/L和2.163 mg/L。

表2 活性碘对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果

表3 活性碘对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果分析

2.3 阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的毒性比较

阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果和结果分析见表4、表5。试验结果表明，随着阿维菌素药液浓度的增加，南北水系翘嘴鲌的死亡率逐渐上升，与药液浓度呈正相关关系。当阿维菌素质量浓度达到0.3 mg/L以上时，南北水系翘嘴鲌的死亡率随着药物胁迫时长的增加而上升。阿维菌素对南方水系和北方水系翘嘴鲌群体的安全质量浓度分别为0.085 mg/L和0.089 mg/L。

表4 阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果

表5 阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的急性毒性试验结果分析

3 总结和讨论

3.1 翘嘴鲌对2种药物的抗应激行为

活性碘是1种温和型消毒剂，在合理浓度范围内可使鱼体表的细菌、真菌等菌体内的蛋白质变性，致使病原生物死亡。阿维菌素是1种广谱杀虫剂，其作用机理与活性碘完全不同。阿维菌素通过干扰神经生理活动形成神经传导抑制，从而起到杀虫作用[16]。当翘嘴鲌在2种药物的安全质量浓度范围内，其活动不受影响，而当药物浓度超过翘嘴鲌承受范围时，翘嘴鲌产生了不同的抗应激行为。主要区别在于活性碘中毒时，鱼体反应较为温和，无猛烈运动，通过张开口和鳃盖等行为适应周边环境变化；而阿维菌素中毒时，因刺激其神经生理活动，鱼体则形成相对于活性碘较猛烈的运动，但当其神经元受损后又陷入无力状态，通过身体弯曲变形以适应周边环境变化。

3.2 活性碘对2个翘嘴鲌群体的毒性

活性碘是翘嘴鲌养殖生产过程中常用的消毒剂，对翘嘴鲌养殖中的病害具有良好的防治作用。李琳琳等[17]研究了聚维酮碘对兴凯湖翘嘴鲌的毒性，其安全质量浓度为3.95 mg/L；王连琪[18]研究了复合碘对兴凯湖翘嘴鲌的毒性，其安全质量浓度为8.818 mg/L；于振海等[19]研究了聚维酮碘对大鳞鲃的毒性，其安全质量浓度为13.397 mg/L。这些研究结果与本试验结果有所差异。本研究中，活性碘对南方水系和北方水系翘嘴鲌的安全质量浓度分别为2.140 mg/L和2.163 mg/L，相对较低，这可能与所使用的药品碘成分不同以及试验环境不同所致。北方水系翘嘴鲌对活性碘的耐受能力稍强于南方水系。根据国家标准化管理委员会公布的毒性等级评价标准(GB/T 31270.12—2014)，活性碘的药性等级应为中毒(1～10 mg/L)，因此在实际生产过程中使用活性碘作为消毒剂时，应将用量控制在其安全质量浓度范围内。

3.3 阿维菌素对2个翘嘴鲌群体的毒性

在翘嘴鲌养殖过程中，发生寄生虫病害的概率相对较小，阿维菌素的使用频率较低，因此在养殖生产上对其用量的把握应更为谨慎。阿维菌素作为养殖生产中常用杀虫剂，其对鱼类的急性毒性已有较多研究[20-22]，但针对鲌亚科鱼类的研究较少。本研究中，南方水系和北方水系翘嘴鲌对阿维菌素的安全质量浓度分别为0.085 mg/L和0.089 mg/L，北方水系翘嘴鲌对阿维菌素的适应能力稍强于南方水系。根据国家标准化管理委员会的毒性等级标准，阿维菌素的药性等级应为剧毒(<0.1 mg/L)。鉴于阿维菌素的作用机理是损坏受体的神经系统，因此在实际生产过程中，要精确计算用量，不得超过其安全质量浓度。

3.4 结论

本研究表明，活性碘和阿维菌素这2种药物的生产厂家所推荐的治疗药物浓度均低于该药物的安全质量浓度，可用于翘嘴鲌的养殖生产中。但药物使用对鱼的影响除了药物的浓度外，还受到许多其他因素的影响，如水温、天气、溶解氧、有机物、给药方式、鱼类摄食及活动情况等，应根据实际情况，在不超过安全质量浓度的条件下进行合理用药，以确保用药安全有效。