三叶青种质资源及药理作用的研究进展

葛佳丽，马 扬，李慧琴，张 婷（通讯作者）

（浙江中医药大学 浙江 杭州 310000）

三叶青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）学名为三叶崖爬藤，葡萄科崖爬藤属植物，别名石猴子、石抱子、破石珠等。通常以野生块根或者全草入药，鲜用或晒干用药，药用价值很高。然而，三叶青地下块根生长缓慢，加上人为的过度开发，使野生三叶青濒临灭绝。因此，为了使具有优质药效的三叶青可以实现规模化生产，其药性可以得到充分的开发利用，现对三叶青的种质资源、有效成分、药理作用及临床应用进行综述。

1.三叶青的种质资源

目前，由于三叶青药用价值日益提高，市场需求量逐渐扩增，而三叶青药用部位地下块根生长缓慢，人工栽培技术体系还不够完善，造成三叶青资源紧缺。充分保护利用现有野生资源，培养高质量高产量的人工三叶青，是丰富三叶青种质资源亟待解决的。

1.1 三叶青的资源分布

三叶青多分布在我国南部地区，主要分布于浙江、广西、江西。其多生长在荫蔽度较高的山谷、灌丛等腐殖质处，生长情况与温度、光照、蒸腾作用等多种因素密切相关。

1.2 三叶青的栽培技术

为了提高三叶青的产量，科研工作者根据三叶青的形态结构、生长条件等方面提高人工快繁优质三叶青的栽培技术。王静等[1]发现带腋芽上端半木质化茎段作为外植体建立的三叶青高效繁殖体系，适合其规模化栽培。史清英[2]通过实验确定三叶青外植体组织培养的最佳条件。彭昕等[3]建立的三叶青愈伤组织颗粒状悬浮培养体系，可以极大地缩短生产周期。陆飞彪等[4]发现在培养基中添加天然有机物培养三叶青愈伤组织可以提高培养物总黄酮的含量，证明了采用组织培养技术提高三叶青总黄酮产量的可行性。余乐等[5]通过测定12 批浙产三叶青，得出三叶青水分、总灰分、浸出物及活性成分的限度标准建议，崔伟亮等[6]得出70%乙醇是三叶青粉浸出物的最佳提取溶剂，为三叶青质量标准控制提供建议。

2.三叶青提取物的药理作用及机制

2.1 抗肿瘤作用及机制

三叶青提取物抗肿瘤效果好，机制各不相同，主要通过抑制肿瘤细胞增殖，促进其凋亡或通过提高机体的免疫力，增强药物敏感性来降低肿瘤细胞的存活率，达到抗肿瘤作用。

2.1.1 乙酸乙酯提取物抗肿瘤 三叶青乙酸乙酯提取物（ethyl acetateextract, EAE）可以诱导细胞凋亡，抑制肺癌、肠癌、肝癌等多种肿瘤的生长。李华美等[7]的研究发现三叶青EAE 可能是通过上调凋亡蛋白bax、caspase¯3 的表达对荷瘤小鼠Lewis 肺癌细胞生长起抑制作用，高剂量处理组抑瘤效果更好。林霜等[8]的研究也证实三叶青EAE 可以通过激活caspase¯3 表达，诱导结肠癌HT29 细胞凋亡。WANG 等[9]发现三叶青EAE 可以通过线粒体途径介导的Caspase 依赖性诱导HepG2 细胞凋亡。

2.1.2 水提取物抗肿瘤 三叶青的水提物也有较好的抗肿瘤作用。丁丽等[10]发现三叶青水提物对人宫颈癌Hela229 细胞和人恶性黑色素瘤A375 细胞有增殖抑制作用，与浓度相关。袁雨等[11]通过实验发现三叶青水提取物能通过促进NK 细胞增殖，增强其杀伤胃癌BGC¯823 细胞活性，并猜测此现象可能与三叶青水提取物使NK 细胞PFP、GraB 和CD107a 表达上调相关。

2.1.3 石油醚提取物抗肿瘤 丁丽等[12]筛选三叶青不同溶剂萃取部分对不同肿瘤细胞进行体外抑制作用，发现石油醚部位提取物对AGS 细胞和5637 细胞均有较强的体外抑制作用，且有一定的浓度依赖，确定其为三叶青发挥抗肿瘤作用主要活性部位。同样的，熊艳等[13]研究了三叶青石油醚萃取物对Hela 细胞的作用，石油醚萃取物通过阻滞hela细胞周期在G2/M期，影响酶活性变化，诱导肿瘤细胞凋亡，且与时间和剂量相关。

3.其他药理作用及机制

三叶青同时还还具有明显的抗炎解热、保肝、抗病毒、抑菌等作用。如邢倩等[14]发现三叶青中牡荆苷可通过激活Nrf2 转录因子发挥抗炎作用；杨雄志等[15]发现三叶青提取物可以明显下调下丘脑5¯羟色胺（5¯HT）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）含量进行体温调节的机制，也研究[16]证明了三叶青多糖能降低肝损伤小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙二醛（MDA）水平以及提高超氧化物歧化酶（SOD）水平而起到保肝作用；董宜旋[17]、周武[18]、许海顺[19]、熊艳等分别研究发现三叶青抗病毒、化感自毒，抗氧化、抑菌作用。何文等[21]试验发现三叶青乙酸乙酯提取物抗氧化能力最强。

4.总结与展望

三叶青虽为中国传统中药，早在治疗小儿发热、肺炎等方面有应用，但遗憾的是三叶青至今未被《中国药典》收录，关于其植物基原也未有官方定性，将三叶青收录，纳入行政管理范畴，更有利于三叶青药性的规范开发和临床的治疗应用[21]。三叶青不同部位提取物的成分尚未完全鉴定，其活性成分和抗肿瘤作用机制仍不明确，限制了其在临床的使用。三叶青作为天然植物，本身基本无毒，尽管不能完全根治肿瘤，但能有效缓解肿瘤带来的疼痛，调节免疫力，降低化疗所产生的副作用，被誉为“植物抗生素”。因此，对于三叶青药性及机制的继续研究非常具有临床意义。