胃癌血清标志物与人表皮生长因子受体2、Ki-67表达及临床病理特征的关系

赵荣荣，张倩

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，早期临床症状较少，往往发现时已经是晚期，其发生率在所有肿瘤中排第五，而死亡率在全球排第三。胃癌发病原因至今仍不明确，但是与幽门螺旋杆菌感染和饮食习惯等环境影响以及基因异常表达有关，其临床分期较晚且预后不良。目前越来越多的人表皮生长因子受体2（HER-2）阳性晚期胃癌病人受益于曲妥珠单抗，因此对于胃癌病人来说，做HER-2 检查非常有必要。胃癌的检测方法有很多，而血清学肿瘤标志物的检查逐步广泛应用于临床上，其与胃癌的预后、转移等密切相关。然而，目前对于胃癌病人检测癌胚抗原、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原19-9（CA19-9）血清表达与HER-2、Ki-67蛋白表达相关性以及对临床诊断意义还没有明确结论，本研究主要是探索胃癌病人手术前血清学生物标志物癌胚抗原、CA125 和CA19-9 表达与HER-2 和Ki-67 蛋白表达的相关性，以及与临床病理特征的相关性分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2017年10月至2018年12月在安徽医科大学第一附属医院高新院区治疗的132例胃癌手术病人，男性95 例，女性37 例。所有研究对象手术前均未进行化疗，手术切除的肿瘤组织对其进行病理检查，确诊为胃癌。病人或其近亲属知情同意，本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求。

1.2 方法

1.2.1

血清学检测 所有病人术前空腹抽血3 mL，离心取上清液，保存于-20 ℃环境中。采用罗氏的全自动生化分析仪E170 模块和上海酶联生物科技有限公司的试剂盒检测癌胚抗原、CA125、CA19-9水平。正常值范围：癌胚抗原为0～5.0 μg/L，CA125为0～35.0 kU/L，CA19-9 为0～27.0 kU/L，超出正常范围视为阳性。

1.2.2

免疫组织化学检测 病人手术取下的组织立即用固定液固定，取材，脱水，包埋，制片，苏木精-伊红（HE）染色，镜下观察选取具有代表性的肿瘤组织蜡块，再切片（3 μm），进行免疫组织化学染色（IHC）。IHC 检测使用的仪器购自罗氏公司，使用的一抗均是罗氏公司购买的即用型抗体，HER-2（4B5）和Ki-67（30-9）。

1.2.3

免疫组织化学判读 HER-2：细胞膜表达呈棕黄色，当未染色或膜染色＜10% 肿瘤细胞时为（0）；当≥10% 肿瘤细胞膜弱染色或部分细胞膜染色时为（+）；当≥10% 肿瘤细胞弱至中度的基底侧膜、侧膜或完全膜染色时为（2+）；当≥10% 肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全膜强染色为（3+）。Ki-67：细胞核表达呈棕黄色，随机选择5个高倍视野，阳性肿瘤细胞比例≤10% 者为阴性，＞10%～25% 为弱阳性，＞25%～50%判为中度阳性，＞50%则为强阳性。

1.3 统计学方法

所有数据使用SPSS 16.0 软件统计，计数资料以例数或者百分比表示，组间比较采用

χ

检验或Fisher 确切概率法，等级资料指标两组间比较采用Wilcoxon 秩和检验，HER-2 和Ki-67 的相关性检验采用Spearman 相关性分析。

P

＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 癌胚抗原、CA125、CA19-9与HER-2表达的相关性

HER-2蛋白在胃癌中表达于细胞膜，Ki-67蛋白表达于细胞核。132 例胃癌病人中，癌胚抗原阳性率为34.8%（46/132）；CA125 阳性率为15.2%（20/132）；CA19-9 阳性率为10.6%（14/132）；HER-2（0）阳性率为37.2%（49/132），（+）为34.8%（46/132），（2+）为15.9%（21/132），（3+）为12.1%（16/132）；Ki-67 阴性为1.5%（2/132），弱阳性为0.8%（1/132），中度阳性为47.7%（63/132），强阳性为50%（66/132）。癌胚抗原与HER-2 表达无相关性（

P

＞0.05）；CA125、CA19-9与HER-2表达有相关性（

P

＜0.05）。见表1。

表1 胃癌132例癌胚抗原、CA125、CA19-9与HER-2表达的相关性/例

2.2 癌胚抗原、CA125、CA19-9 与临床病理特征的相关性

癌胚抗原表达与年龄（

P

=0.016）、肿瘤大小（

P

=0.046）以及肿瘤分期（

P

=0.03）有关，CA125 表达与脉管侵犯有关（

P

=0.026）。见表2。

表2 胃癌132例癌胚抗原、CA125、CA19-9与临床病理特征的相关性/例

2.3 HER-2 和Ki-67 表达的相关性

132 例胃癌标本中发现，HER-2 与Ki-67 蛋白表达呈负相关（

r

=-0.274，

P

=0.007），详情见表3。

表3 胃癌132例HER-2和Ki-67表达的相关性

3 讨论

胃癌属于消化道肿瘤，其发生主要受环境和基因改变影响。在我国胃癌是仅次于肺癌和肝癌的三大恶性肿瘤之一，男性发病多见于女性。胃癌早期，常见的肿瘤标志物未发生明显的表达异常，所以目前还没有用于胃癌特异性诊断的肿瘤标志物。但是早日发现胃癌特异性肿瘤标志物对于其诊断以及后期治疗具有重要意义。

本研究首先主要探讨癌胚抗原、CA125、CA19-9三种肿瘤标志物在胃癌病人手术前血清中的表达情况，以及与临床病理特征的相关性。癌胚抗原在正常情况下产生于胚胎时期，出生后水平逐渐降低。成人癌胚抗原体内水平稳定且微量。但是大多数肿瘤病人癌胚抗原表达增高，其被认可为广谱性肿瘤标志物，浓度异常增高多见于消化系统肿瘤和肺癌。本研究数据结果显示，132 例胃癌病例中，术前血清癌胚抗原表达阳性率为34.8%。有研究发现，在消化道肿瘤中癌胚抗原水平升高时，肝脏转移、腹膜转移的机会明显升高，其表达与肿瘤分化类型（尤其是差分化）明显相关。而本研究结果发现癌胚抗原表达阳性病人中，年龄高于65岁者明显多于年龄低于65岁者，肿瘤最大径大于5 cm者多于小于5 cm 者，且进展期病人多于早期病人，这表明越是晚期的胃癌病人癌胚抗原表达阳性率越高。CA19-9是一种新的肿瘤标志物，且是胰腺癌敏感性最高的标志物，消化道炎症时轻度升高，但是明显升高时多见于消化道肿瘤。有文献研究报道，对胃癌病人分别进行术前和术后癌胚抗原和CA19-9 抽血检测，发现手术前后其表达差异有统计学意义，且癌胚抗原和CA19-9表达水平升高与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和pTNM分期等临床病理特征有关。本研究结果显示CA19-9 的阳性表达率为10.6%，与临床病理特征无相关性，可能是样本数量的局限性。CA125表达异常也是与多种恶性肿瘤有关，其是一种与肿瘤相关的糖蛋白抗原。对于进展期和根治术后胃癌病人，血液检测发现CA125 水平升高，常提示发生腹膜转移和胃癌预后不良。本研究结果表明，CA125 阳性胃癌病人的脉管侵犯率要高于阴性者。 大量文献表明，癌胚抗原、CA125、CA19-9 肿瘤标志物联测检测对于胃癌临床诊断、病理特征以及肿瘤复发与预后有着重要的影响意义。 本研究结果也证实了癌胚抗原和CA125 的血清学检测与胃癌临床病理特征密切相关，这对于胃癌病人的预后和复发有重要指导意义。

胃癌是起源于正常胃黏膜上皮，经过逐步发展不断演变的一个慢性过程。在胃癌的早期，由于临床症状不明显以及没有高效率的检测方法，导致很多病人在确诊时已经进入了进展期，不再适合手术治疗。近年来随着生物医疗技术的不断发展，越来越多的胃癌病人获益于铂类和曲妥珠单抗药物。但是研究发现在对胃癌病人使用曲妥珠单抗药物之前，对病人肿瘤组织中HER2 表达进行检测对于后期临床治疗效果至关重要，对于接受曲妥珠单抗治疗的HER2 阳性病人与阴性病人相比，生存期更长。Ki-67 检测用来评估肿瘤细胞的增殖情况。因此，在国际指南中均建议对胃癌病人进行HER2检测。而胃癌病人的血清学肿瘤标志物检测与HER-2 蛋白相关性分析仍不明确。本研究发现，胃癌病人血清标志物CA125、CA19-9 表达与HER-2 蛋白表达有关，这也为胃癌病人在使用铂类和曲妥珠单抗之前提供了参考因素。同时HER-2 与Ki-67 的蛋白表达呈负相关，这表明在使用铂类和曲妥珠单抗药物之前，检测HER-2 和Ki-67 的表达是十分有必要的，除了药物的使用效果外，肿瘤细胞的增殖状态对于后期治疗也是至关重要的。

综上所述，胃癌病人的血清学标志物癌胚抗原与年龄、肿瘤大小、肿瘤分期有关，CA125 与脉管侵犯有关，而CA125、CA19-9 表达与HER-2 的蛋白表达有关，HER-2 表达与Ki-67 表达呈负相关。胃癌病人的标志物癌胚抗原、CA125、CA19-9、HER-2、Ki-67 检测对于病人临床用药和病理特征分析具有重要意义。