孟鲁司特钠片的制备工艺研究

宋巧莉

（江苏九旭药业有限公司，江苏徐州 221200）

孟鲁司特钠片最早是由美国Merk公司开发，并于1998年2月20日在美国申请上市的薄膜衣片，商品名SINGULAIR®，规格为10 mg；原国家药品监督管理局于1999年10月29日批准由默沙东（Merck Sharp& Dohme Ltd.）公司进口注册，商品名为顺尔宁®。

孟鲁司特钠属于生物药剂学分类系统（Biopharmaceutics Classification System，BCS）Ⅱ类药物，为口服固体制剂，体外溶出试验采用比较仿制制剂与参比制剂体外多条溶出曲线相似性的方法，可以降低仿制制剂与参比制剂体内不等效风险。因此，本实验重点对其片剂的体外溶出进行研究，考察其在不同pH介质中的溶出行为，分析了原料粒径、助溶剂十二烷基硫酸钠（Sodium Dodecyl Sulfate，SDS）用量及原料药加入方式对溶出的影响，为今后孟鲁司特钠新剂型的开发提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

YQ100-1型试验级气流磨，上海赛山粉体机械制造有限公司；HLSH4-10A型湿法混合颗粒机，中航工业北京航空制造工程研究所；P100型粉碎整粒机，深圳市信宜特科技有限公司；MD30型万向混合机，深圳市信宜特科技有限公司；XYT-I型流化制粒包衣机，深圳市信宜特科技有限公司；ZP14型旋转式压片机，北京新龙立科技有限公司；BG1-5型高效薄膜包衣机，中航工业北京航空制造工程研究所；708DS型自动溶出仪，安捷伦科技有限公司；LC-20A型高效液相色谱仪，日本岛津公司。

孟鲁司特钠原料，Dr.Reddy's Laboratories Ltd.；孟鲁司特钠片，Merck Sharp & Dohme Ltd.（英国），杭州默沙东制药有限公司分装；孟鲁司特二环己胺盐对照品（Y0001436），含量99.4%，欧洲药典EP标准品；微晶纤维素，FMC Corporation；一水乳糖，DFE Pharma GmbH & Co. KG.；交联羧甲基纤维素钠，FMC Corporation；羟丙纤维素 EXF，Aqualon Company；硬脂酸镁，安徽山河药用辅料有限公司；欧巴代，上海卡乐康包衣技术有限公司；SDS，分析纯，成都艾科达化学试剂有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 溶出曲线方法的建立

（1）溶出介质体积和方法的选择。一般大杯法的溶出介质体积在500～1 000 mL，以900 mL为最常用，本实验溶出介质的体积选用900 mL。本品为薄膜衣片，采用常规的桨法，搅拌速率50 r/min。

（2）溶出介质及取样时间的选择。根据《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》，试验可在不同的溶出介质（pH值1.0～6.8）下进行。选择介质为pH1.0的盐酸溶液、pH4.0的醋酸盐缓冲液、pH4.5的醋酸盐缓冲液、pH6.8的磷酸盐缓冲液及分别加入一定量SDS的4种溶液为考察对象，分析孟鲁司特钠溶解度，测定溶出曲线，选择具有区分力的溶出介质。

1.2.2 溶出曲线测定

在不同时间点取样10 mL，并补液10 mL，滤过，弃去续滤液至少6 mL，再取续滤液作为供试品溶液；另精密称取孟鲁司特二环己胺盐对照品适量，加溶出介质溶解并稀释制成孟鲁司特浓度约为10 μg/mL的溶液备用。

色 谱 条 件： Agilent SB色 谱 柱（4.6 mm*50 mm ，5μm），十八烷基硅烷键合硅胶为填充材料；以0.15%三氟醋酸溶液-0.15%三氟醋酸乙腈溶液（45∶55）为流动相，检测波长为238 nm，柱温25℃，流速1.0 mL/min。理论板数按孟鲁司特峰计算不低于4 000。精密量取供试品溶液与对照品溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，样品溶液应在制备完成后4 h内进样。

按外标法以峰面积计算溶出量，在溶出曲线计算时，采用杂质加和方法进行计算。避光条件下0.2%SDS 水、0.2%SDS pH4.0与 0.2%SDS pH6.8介质24 h稳定，0.2%SDS pH1.0介质2 h内降解大于2%。孟鲁司特钠原料药在不同介质37 ℃中稳定性：避光条件下0.2%SDS 水、0.2%SDS pH4.0与0.2%SDS pH6.8介质90 min稳定，0.2%SDS pH1.0介质10 min内降解大于2%。

1.2.3 处方筛选

参照参比制剂美国上市的说明书[1]，其处方组成为微晶纤维素、一水乳糖、交联羧甲基纤维素钠、羟丙纤维素和硬脂酸镁。包衣成分包括羟丙甲纤维素、羟丙纤维素、二氧化钛、氧化铁红、氧化铁黄和巴西棕榈蜡。参照参比制剂进口注册标准（JX20010356）[2]及现行版药典要求，确定选择含0.2%SDS 的pH6.8磷酸盐作为最有区分力的介质，进行处方筛选。

制备流程：称取处方量的孟鲁司特钠、一水乳糖及微晶纤维素，置于湿法混合制粒机中，搅拌速度150 r/min，混合5 min；配制8%的羟丙纤维素水溶液，搅拌使溶解作为粘合剂；设置搅拌速度150 r/min，剪切速度2 000 r/min，加入处方量的粘合剂，制粒200 s；将湿颗粒置于流化床中，干燥至颗粒水分＜1%，过18目筛整粒；加入处方量的外加交联羧甲基纤维素钠，混合10 min；再加入处方量的硬脂酸镁，混合5 min；采用φ8.0 mm圆形浅凹冲压片，片重约200 mg，硬度70～90 N，包薄膜衣。

（1）原料药粒径筛选。处方1、2、3的原料药粒径D90分别为75 μm、50 μm和20 μm，其余步骤同1.2.3制备流程所示。

（2）增溶剂（SDS）加入量筛选。配制8%的羟丙纤维素水溶液，加入0.1%、0.3%、0.5%和0.8%的SDS，搅拌使溶解作为粘合剂，分别得到处方1至4，其余步骤不变。

（3）原料加入方式筛选。处方1：称取处方量一水乳糖及微晶纤维素，置于湿法混合制粒机中，搅拌速度150 r/min，混合5 min；配制8%的羟丙纤维素水溶液，加入处方量的孟鲁司特钠，搅拌使溶解作为粘合剂。处方2：称取处方量一水乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素，置于湿法混合制粒机中，搅拌速度150 r/min，混合5 min；将孟鲁司特钠溶解于水中作为粘合剂。其余步骤不变。

1.2.4 放大生产

采用单因素法继续筛选不同填充剂比例、不同崩解剂用量处方对溶出曲线的影响。依据确定的处方进行一批样品的实验室放大生产，批量为2万片，参照《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》，采用0.2%SDS水溶液、0.2%SDS pH1.0盐酸溶液、0.2%SDS pH4.0醋酸盐缓冲盐、0.2%SDS pH6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质进行自制制剂与参比制剂的溶出曲线对比。

相似因子计算公式：

式中，f2为相似因子，Ti和Ri分别为各取样时间点自制制剂与参比制剂的平均溶出率，n为取样时间点个数。

2 结果与分析

2.1 溶出介质选择

对孟鲁司特钠在不同溶剂中的溶解度进行测定（见表1），结果显示：在pH1.0、pH4.0与pH6.8溶液中均未达到漏槽条件；在pH6.8溶出介质中加入不同浓度表面活性剂SDS，发现0.2%SDS即可满足漏槽条件；在其他溶出介质中加入0.2%SDS，亦均可达到漏槽条件。

表1 孟鲁司特钠溶解度

采用0.2%SDS水溶液、0.2%SDS pH1.0盐酸溶液、0.2%SDS pH4.0醋酸盐缓冲盐、0.2%SDS pH6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质，对参比制剂进行溶出曲线测定。结果表明：在0.2%SDS水溶液与0.2%SDS pH6.8磷酸盐缓冲液中，15 min溶出大于85%；在0.2%SDS pH1.0盐酸溶液与0.2%SDS pH4.0醋酸盐缓冲液中，溶出较缓慢，具有一定区分力。故将0.2%SDS水溶液、0.2%SDS pH1.0盐酸溶液、0.2%SDS pH4.0醋酸盐缓冲盐、0.2%SDS pH6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质。

2.2 原料药粒径筛选

孟鲁司特钠为低渗高溶类药物，溶出速率是胃肠道吸收的限速因素，而难溶性药物的粒度关系到药物与胃肠液的接触面积，从而影响药物的溶出速率。其次，孟鲁司特钠片规格为10 mg，对于小规格片剂，含量均匀度是制剂生产过程中重点控制的指标之一，原料的粒度能显著影响该产品的吸收利用属性。因此，对于孟鲁司特钠原料药粒径的筛选尤为关键。

溶解度情况满足漏槽条件，为降低风险，促进主药在不同介质中的溶出与参比制剂一致，需对原料药粒度进行筛选，以确定最佳的原料药粒度，因此采用气流磨对原料进行粉碎处理。由图1可知，不同粒径制备的药物在0.2%SDS pH6.8磷酸盐介质中的溶出情况无显著变化，溶出速率及最终溶出量均小于参比制剂。

图1 孟鲁司特钠原料药粒径筛选试验结果

2.3 增溶剂（SDS）加入量筛选

十二烷基硫酸钠（SDS）对药物具有一定的增溶作用，研究处方中增溶剂加入量对溶出曲线的影响。由图2可知，处方中加入SDS能提高前20 min的溶出速率，最终溶出量并无明显改善，溶出速率及最终溶出均小于参比制剂。

图2 孟鲁司特钠增溶剂SDS筛选试验结果

2.4 原料加入方式筛选

自制药品溶出速率小于参比制剂，经XRD晶型对比，参比制剂中原料为结晶态，本研究用原料为无定型态[3]，需进一步对处方工艺进行研究。

湿法制粒工艺中原料常用的加入方式为内加，即原料和内加辅料混合后加入粘合剂剂或润湿剂，湿法制粒干燥后，加入外加辅料，混合压片。因本品原料具有晶型差异，通过原料常规的加入方式不能满足溶出一致性的需求，故考察采用不同的原料加入方式进行对比研究。

从图3可知，将原料溶解于粘合剂中能显著提高孟鲁司特钠的溶解速度，通过溶出曲线的考察，发现自制制剂处方1与参比制剂15 min累积溶出度均大于85%，判定为相似。

图3 孟鲁司特钠原料药加入方式筛选试验结果

2.5 放大生产

原料采用溶解于粘合剂的加入方式能显著提高孟鲁司特钠片的溶解速度，采用单因素法继续筛选不同填充剂比例、不同崩解剂用量处方对溶出曲线的影响，结果表明：填充剂乳糖∶微晶纤维素质量比例在5∶1～1∶2范围内，崩解剂交联羧甲基纤维素钠用量在3%～7%，对药品在含0.2%SDS的pH6.8磷酸盐溶出曲线影响较小，15 min累积溶出度均大于85%，与参比制剂溶出一致，据经验值和生产成本考虑，优选填充剂乳糖∶微晶纤维素比例为3∶1，崩解剂交联羧甲基纤维素钠用量为5%。

依据确定的处方进行一批样品的实验室放大生产，其与参比制剂的溶出结果见图4 ～图7。经计算在0.2%SDS水介质和0.2%SDS 的pH6.8磷酸盐介质中自制制剂和参比制剂在15min的平均溶出量均大于85%，在0.2%SDS pH1.0盐酸介质中f2为70，在0.2%SDS pH4.0醋酸盐介质中f2为72，自制制剂与参比制剂的溶出曲线相似，说明该处方工艺满足要求。

图4 自制制剂与参比制剂在0.2%SDS水介质中溶出曲线

图5 自制制剂与参比制剂在0.2%SDS pH1.0盐酸介质中溶出曲线

图6 自制制剂与参比制剂在0.2%SDS pH4.0醋酸盐介质中溶出曲线

图7 自制制剂与参比制剂在0.2%SDS 的pH6.8磷酸盐介质中溶出曲线

3 结论

本文通过单因素筛选，考察了孟鲁司特钠原料粒径、助溶剂SDS用量及原料药加入方式对溶出曲线的影响，结果显示：原料粒径和SDS添加量对孟鲁司特钠溶出影响均较小，因孟鲁司特钠原料参比制剂为结晶态[3]，国内孟鲁司特钠相关制剂仿制难度较大，通过改变原料的加入方式可达到与参比制剂溶出特征一致的效果。通过优化溶出曲线一致性可以提高人体生物等效性试验（BE）的成功率，但最终自制制剂与参比制剂在疗效上是否一致还需要通过BE试验进一步验证[4]。