不同厂家的桦褐孔菌保健品中的活性成分含量分析

崔贺铭，高 洋，张玉莹，彭雨鑫，付雯雯，武 毅

（吉林大学药学院，长春 130021）

随着对桦褐孔菌的深入研究，发现其具有多种药理作用，桦褐孔菌可以提高机体免疫力、降血脂和降血糖，同时对心脑血管疾病也有一定治疗作用[1-2]。这使得桦褐孔菌受到了国内外市场的热切关注，其相关的保健产品被大量开发生产。但因不同厂家选用的桦褐孔菌品系、提取方法及提取条件各有不同，导致各个厂家生产的桦褐孔菌保健品的活性成分差别很大、良莠不齐。因此，本实验选取了市面上6个不同厂家的桦褐孔菌保健品，采用紫外分光光度法对样品中多糖、黄酮和多酚三种活性成分含量进行了检测及对比分析，为今后开发桦褐孔菌相关保健品提供参考。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

UV-5800紫外分光光度仪（上海元析仪器有限公司），hh-S4恒温水浴锅（百祥仪器公司），ALC-10.4电子天平（上海精密科学仪器公司），101A-3E电热鼓风干燥箱（上海实验仪器厂有限公司）。

1.2 试剂与材料

桦褐孔菌保健品来自6个厂家（A.桦胺康白桦茸提取粉；B.Vimergy白桦茸胶囊；C.Siberian Forest桦树茸胶囊；D.EQVILLE白桦茸精粉黑金颗粒；E.DR.med.Michalzik白桦茸精华胶囊；F.东鳌桦树茸浓缩液黑金颗粒）；葡萄糖标准品购自国药集团化学试剂有限公司；芦丁和没食子酸标准品均购自Solarbio试剂公司；福林酚试剂购自麦克林试剂有限公司；硝酸铝、无水乙醇、亚硝酸钠、氢氧化钠、苯酚、浓硫酸及无水碳酸钠均购自北京化工厂。

2 实验方法与结果

2.1 桦褐孔菌保健品样品制备

分别称取6个不同厂家的桦褐孔菌产品样品200 mg于100 mL容量瓶中，加入蒸馏水进行定容，混合均匀，获得浓度为2 mg·mL-1待测样本水溶液，备用。

2.2 标准曲线的建立

2.2.1 葡萄糖标准曲线的建立 参照前期实验方法[5]，称量于烘箱中干燥的葡萄糖标准品10 mg，置于100 mL容量瓶中，用蒸馏水进行定容，获得浓度为0.1 mg·mL-1的葡萄糖标准品溶液，备用。移取葡萄糖标准溶液0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，加入蒸馏水使各组溶液体积补至1.0 mL，向各组加入5%苯酚溶液1.0 mL，充分混匀后，迅速加入5.0 mL浓硫酸，振荡混匀，于40 ℃水浴中加热15 min。加热结束后，使用相应试剂重复同样操作获得空白对照组试剂。在490 nm条件下，测定吸光度值，每组平行测定3次，葡萄糖含量为横坐标，吸光度值A为纵坐标，得到标准曲线的回归方程：Y=6.138 3X+0.197 5，R2=0.999 8，葡萄糖标准曲线见图1。

图1 葡萄糖标准曲线

2.2.2 黄酮标准曲线的建立 参照前期实验方法[3]，称量于烘箱中干燥的芦丁标准品11.3 mg，置于100 mL容量瓶中，用70%乙醇溶液进行定容，获得浓度为0.12 mg·mL-1的芦丁标准品溶液，备用。移取芦丁标准溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，加入70%乙醇溶液使各组溶液体积补至5.0 mL，向各组加入5%亚硝酸钠溶液0.5 mL，充分混匀后，静置6 min，再加入10%硝酸铝溶液0.5 mL，振荡混匀，静置6 min，向各组中加入4%氢氧化钠溶液4 mL，静置15 min，使用相应试剂重复同样操作获得空白对照组试剂。在510 nm条件下，测定吸光度值，每组平行测定3次，芦丁含量为横坐标，吸光度值A为纵坐标，得到标准曲线的回归方程：Y=2.298 5X+0.212 0，R2=0.999 2，黄酮标准曲线见图2。

图2 黄酮标准曲线

2.2.3 多酚标准曲线的建立 参照前期实验方法[5]，称量于烘箱中干燥的没食子酸标准品8.3 mg，置于100 mL容量瓶中，用蒸馏水进行定容，获得浓度为0.083 mg·mL-1的没食子酸标准品溶液，备用。移取没食子酸标准溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL、7.0 mL、8.0 mL分别置于25 mL容量瓶中，加入蒸馏水使各组溶液体积补至8.0 mL，向各组加入1 mol·mL-1福林酚溶液3.0 mL，充分混匀后，在避光条件下静置反应8 min，再加入10%碳酸钠溶液6.0 mL，振荡混匀，在避光条件下静置反应60 min，向各组中加入蒸馏水进行定容，定容体积25 mL，充分混匀，使用相应试剂重复同样操作获得空白对照组试剂。在750 nm条件下，测定吸光度值，每组平行测定3次，没食子酸浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得到标准曲线的回归方程：Y=5.276 6X+0.005 6，R2=0.999 1，多酚标准曲线见图3。

2.3 实验结果

将6组不同厂家样品，根据2.2.1、2.2.2、2.2.3所述方法对各样本中的多糖、黄酮和多酚含量进行测定，各活性成分含量结果见表1、表2、表3。

表1 不同厂家样品中多糖含量

表2 不同厂家样品中黄酮含量

表3 不同厂家样品中多酚含量

3 讨论

研究发现，桦褐孔菌多糖具有抗氧化、降血糖、降血脂及保肝护肝等作用[4-6]；桦褐孔菌黄酮具有抗氧化及神经保护作用[7-8]；桦褐孔菌多酚则具有良好的抗氧化及抗肿瘤能力[9]。由于桦褐孔菌药用价值高，具有防治常见慢性疾病的潜力，因此与其相关的保健产品不断被开发生产并被投入市场。为考察市面上不同厂家的桦褐孔菌保健产品中多糖、黄酮和多酚三种活性成分含量，分别建立葡萄糖、芦丁和没食子酸的标准曲线，对6个不同厂家的桦褐孔菌保健品样品进行了测定。研究发现，6个厂家样品的活性成分中多糖成分含量较高。对于各活性成分分析的结果，B样品中的多糖含量最高为34.80%；A样品中黄酮和多酚含量均为最高，分别为11.59%和9.54%。本研究可为今后开发桦褐孔菌相关产品提供活性成分含量参考依据。