HER2、Cyr61、IGFBP3表达情况对老年子宫内膜癌病人预后的价值

李江佩 孔祥波 孙音 李战青

子宫内膜癌作为女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率明显上升，且呈年轻化趋势[1]。子宫内膜癌发病早期往往无明显症状及典型体征，仅部分病人出现压迫症状、阴道排液及出血[2]。晚期的子宫内膜癌病人疗效与预后较差，生存率约为5%～15%[3]。因此，子宫内膜癌的尽早诊断对于治疗与预后均有重要意义。人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER2)是一种原癌基因，属于生长因子受体家族，多种恶性肿瘤的发生发展、恶性程度、治疗的抵抗性以及不良预后均与其异常激活相关[4-5]。高半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61，Cyr61)参与了血管性病变、损伤后组织修复和肿瘤的发生发展，是即刻早期反应基因家族的主要因子[6]。有研究表明，代谢综合征如肥胖、糖尿病等是子宫内膜癌的高危因子，其中胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding proteins，IGFBPs)可调节血清胰岛素水平[7]。因此，本研究旨在检测子宫内膜癌组织中HER2、Cyr61、IGFBP3的表达水平，探讨其在子宫内膜癌病人预后中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2015年1月至2017年1月我院妇产科收治的124例子宫内膜癌病人为子宫内膜癌组，年龄62～78岁，平均(64.1±4.2)岁。入选前均行病理学检查确诊为子宫内膜癌，诊断标准依照WHO乳腺肿瘤组织学分类(2003)，手术方式为经腹次广泛或广泛性全子宫切除术以及盆腔淋巴结切除术。根据2009年国际妇产科协会(FIGO)手术病理分期标准，分为Ⅰ期56例，Ⅱ期43例，Ⅲ～Ⅳ期25例；根据1988年FIGO组织内膜癌分级法，分为高分化(G1)62例，中分化(G2)41例，低分化(G3)21例。选取同期120例常规健康体检妇女为对照组，年龄60～67岁，平均(64.1±3.5)岁；子宫良性病变病人120例为良性病变组，年龄60～68岁，平均(64.2±3.3)岁，其中黏膜下肌瘤62例，子宫内膜息肉58例。所有病人均排除合并急慢性疾病或其他恶性肿瘤者。3组年龄差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 HER2、Cyr61、IGFBP3检测：健康体检妇女为体检时采集标本，其余病人为手术或穿刺检查时采集标本。标本于4%甲醛中固定，石蜡包埋后4μm连续切片，脱蜡、覆水后进行HE染色和HER2(兔抗人HER2购自Abcam公司)、Cyr61(兔抗人Cyr61购自Santa cruze Biotech公司)、IGFBP3(山羊抗人IGFBP3多克隆抗体购自Abcam公司)免疫组织化学染色，以PBS溶液染色为阴性对照。采用EnVision法且严格按照试剂盒说明书进行操作。分别采用相对应已知阳性组织切片为阳性对照。

1.2.2 结果判定：HER2定位于细胞膜：-，<10%的细胞膜染色或完全无染色；+，≥10%的细胞膜微弱染色，间断性的染色分布，环绕细胞膜不完整；++，≥10%的细胞膜弱至中度染色，连续染色且环绕完整细胞膜；+++，≥10%的细胞膜强染色，连续染色且环绕完整细胞膜[8]。

Cyr61定位于细胞质：-，完全无染色；+，<10%的阳性细胞染色；++，10%～50%的阳性细胞染色；+++，≥50%的阳性细胞染色[9]。

IGFBP3定位于细胞质：-，<10%的阳性细胞数或完全无染色；+，10%～30%的阳性细胞数；++，31%～60%的阳性细胞数；+++，>60%的阳性细胞数[10]。

在显微镜下将切片放大200倍，随机选取10个视野，阳性率=[(++)例数+(+++)例数]/组内例数×100%。

1.3 随访 入院后为所有子宫内膜癌病人建立资料，包括临床、病理以及出院后相关随访资料。出院后采用电话、门诊等方式开始随访，术后2年内随访间隔为3个月，术后2～5年的随访间隔为6个月，随访截止日期为2022年1月。若病人在随访时间内死亡，则终止随访。计算病人的5年生存率。

1.4 统计学分析 采用SPSS 21.0软件进行数据统计分析，计数资料用频数和百分比表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组HER2、Cyr61、IGFBP3的阳性表达率 在对照组、良性病变组和子宫内膜癌组中，HER2的阳性表达率分别为7.5%、18.3%、69.4%，3组差异具有统计学意义(P<0.01)；Cyr61的阳性表达率分别为10.0%、12.5%、76.6%，3组差异具有统计学意义(P<0.01)；IGFBP3的阳性表达率分别为59.2%、51.7%、29.0%，3组间差异具有统计学意义(P<0.01)。

2.2 HER2、Cyr61、IGFBP3阳性表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系 在124例子宫内膜癌病人中，HER2阳性表达与年龄、病理分期、组织分化、淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关(P均<0.05)，Cyr61阳性表达与病理分期、淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关(P均<0.05)，IGFBP3阳性表达与淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关(P均<0.05)。见表1。

表1 子宫内膜癌病人HER2、Cyr61、IGFBP3阳性表达与临床病理特征的关系(n，%)

2.3 子宫内膜癌病人HER2、Cyr61、IGFBP3的表达与预后的关系 HER2、Cyr61在子宫内膜癌组织中呈阴性表达者的5年生存率高于阳性表达者，IGFBP3在子宫内膜癌组织中呈阳性表达者的5年生存率高于阴性表达者，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 子宫内膜癌病人HER2、Cyr61、IGFBP3表达与预后的关系

3 讨论

近年来，子宫内膜癌的发病率逐渐上升，约占女性生殖系统恶性肿瘤的20%～30%[11]。由于子宫内膜癌早期无特异性症状或无明显的临床特征，易被病人和临床医生忽视，确诊时往往进展至中晚期，治疗难度大且预后较差[12]。因此，寻找疾病的早期筛查、预后评价方法对指导子宫内膜癌临床治疗、改善病人预后具有重要意义。

HER2位于17号染色体长臂，属于酪氨酸激酶跨膜受体家族，在正常生理状况下为非激活状态，当受到刺激时，HER2的表达水平改变或结构变化可激活HER2相关信号通路，参与肿瘤细胞的增殖、转移、黏附、分化等过程，在多种恶性肿瘤中均存在异常表达，与肿瘤的治疗、转移和预后密切相关[13]。Lei等[14]研究发现，HER2在胃癌病人中的阳性表达可能与肿瘤部位、性别、TNM分期、转移等临床特征显著相关，且HER2的过度表达也与胃癌病人的不良预后有关。程倩[15]的研究显示，52例子宫内膜癌病人中有35例(67.3%)HER2呈阳性表达，而正常对照组仅为3例(10.0%)，且HER2的高表达与子宫内膜癌的恶性程度相关。

Cyr61受激素、生长因子等多种因素的调节，与机体组织修复、创伤等过程相关，具有复杂且广泛的生物学特性与功能。Cyr61可增加天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3的活性，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，还可促进细胞的有丝分裂、迁移与黏附。雷蕾等[16]发现Cyr61诊断子宫内膜癌的灵敏度、特异度较高，表明Cyr61参与了子宫内膜癌的发生与发展过程，并且通过负向调控在子宫内膜细胞的增殖中发挥作用。

IGFBPs是胰岛素功能调节的重要蛋白，目前共有15个家族成员，IGFBP3是人体中6种IGFBP之一，以旁分泌与自分泌的形式进入组织，可以调节胰岛素和胰岛素样生长因子-1的生物利用度。代聪伟等[10]研究发现，IGFBP3在子宫内膜癌组织的阳性表达率较癌旁组织低，且与子宫内膜癌的临床病理特征参数存在相关性。

本研究结果显示，相较于对照组与良性病变组，子宫内膜癌组中HER2、Cyr61的阳性表达率上升，IGFBP3的阳性表达率下降，表明HER2和Cyr61扩增或过表达、IGFBP3表达下降可能参与了正常子宫内膜的恶性病变，这与他人的研究结果一致[15-16]。此外，本研究显示，HER2阳性表达与年龄、病理分期、组织分化、淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关，Cyr61阳性表达与病理分期、淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关，IGFBP3阳性表达与淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型相关，表明HER2与Cyr61的过表达、IGFBP3的低表达预示着肿瘤的恶性程度更高、侵袭性更强。本研究结果还显示，HER2阴性表达者、Cyr61阴性表达者、IGFBP3阳性表达者的5年生存率明显升高，表明可以将HER2过表达、Cyr61过表达与IGFBP3低表达作为子宫内膜癌病人预后不良的危险因素，临床中应予以重视。

综上所述，子宫内膜癌病人存在HER2、Cyr61、IGFBP3异常表达，其与肿瘤的淋巴结转移、肌层浸润深度、病理类型和预后密切相关，但本研究的临床样本量较少，存在地域局限性，有待于扩大样本量和研究区域以便深入研究。