枯草芽孢杆菌对鲤鱼抗氧化功能的影响

高志强

（莘县农业农村局，山东 莘县 252400）

池塘养殖已成为我国水产养殖的重要养殖方式之一[1]。但池塘养殖存在一些弊端，如水体环境、营养、微生物感染等，以上这些不利因素会导致鱼类机体疾病频发，甚至引起大规模死亡，限制了水产养殖业的健康发展。因此，如何提高池塘养殖水产生物机体的抗应激能力、抗病能力至关重要。水产养殖中，经常使用抗生素预防和治疗水产生物疾病，但长期过量使用或滥用导致了一系列问题，如耐药菌株的产生、抗生素残留、环境污染等。研究发现，枯草芽孢杆菌可以抑制动物肠道有害菌的繁殖，也能分泌代谢产物和抗生素，对水产养殖具有很好的效果。大量研究发现，枯草芽孢杆菌可以提高鱼类机体肠道黏膜免疫，增强机体抗应激能力，提高机体免疫力和抗氧化能力，改善饵料转化率，提高血清非特异性酶活力[2]；益生菌可以通过调节炎症因子的分泌和表达调节机体的先天性免疫，增强机体肠道抗氧化应激的能力。鲤鱼是我国主要水产养殖品种之一，因适应能力强、生长快速、肉质鲜美备受研究者的关注和研究。目前，枯草芽孢杆菌在鲤鱼养殖方面的研究甚少，因此，本试验以鲤鱼为受试对象，探究鲤鱼基础饵料中添加不同水平的枯草芽孢杆菌对其机体抗氧化指标的影响，为枯草芽孢杆菌在鲤鱼养殖中的合理应用提供基础数据参考。

1 试验材料与试验方法

1.1 试验材料

本试验所使用的的枯草芽孢杆菌由无锡中水渔业科技有限公司提供，有效活菌数≥1.0×1010CFU/g。

试验鲤鱼购自山东种工渔业发展有限公司。

1.2 试验设计

试验选取体重、体况相近的健康鲤鱼600尾，按照单因素随机试验原则，将其均分为4组，每组5个重复，每个重复30尾鲤鱼。对照组鲤鱼饲喂基础饵料，枯草芽孢杆菌组鲤鱼依次饲喂含有0.5%（试验1组）、1.0%（试验2组）和1.5%（试验3组）枯草芽孢杆菌的基础饵料。试验周期为4周，试验结束后检测鲤鱼机体的抗氧化功能。

1.3 饲养管理

试验前，需要对用于养殖鲤鱼的水族箱清洗、消毒。试验鲤鱼驯化10天后进行正式试验，驯化期间投喂基础饵料。试验鲤鱼的养殖水环境为室内循环淡水，水温控制在21℃～24℃，pH值控制在7.2～7.5，溶氧含量大于5.5 mg/L，氨氮含量低于0.28 mg/L，每日换水量约为总水量的1/3。每日早、中、晚试验鲤鱼饲喂3次，饲喂量约为鱼体质量的3.4%～4.5%。

1.4 检测项目

试验4周结束后，试验鲤鱼禁食12小时，每重复中选择3尾鲤鱼，尾静脉采集血液，在4℃条件下4000 r/min离心6 min，-20℃冰箱保存，用于血清抗氧化指标的检测。采用南京建成生物工程研究所的试剂盒进行抗氧化指标的检测（总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及丙二醛），检测步骤及方法严格按照试剂盒说明书操作。

1.5 数据处理

抗氧化数据指标采用SPSS 24.0进行统计分析，使用LSD法多重比较，P＜0.05表示此指标各组数据差异显著，结果以平均数和标准误呈现。

2 结果与分析

饵料中添加不同水平的枯草芽孢杆菌对鲤鱼血清抗氧化指标的影响见表1。鲤鱼饵料中添加不同水平的枯草芽孢杆菌可以不同程度地增强鲤鱼机体的抗氧化能力。其中，试验2组和试验3组鲤鱼血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性显著高于对照组（P＜0.05），试验1组有提高的趋势（P＞0.05）；试验2组和试验3组鲤鱼血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组和试验1组（P＜0.05），试验1组与对照组差异不显著（P＞0.05）；试验2组鲤鱼血清中过氧化氢酶活性显著高于对照组（P＜0.05），试验1组和试验3组有比对照组提高的趋势（P＞0.05）；试验组鲤鱼血清中丙二醛含量均比对照组显著降低（P＜0.05）。研究表明，鲤鱼饵料中添加1.0%的枯草芽孢杆菌对机体抗氧化功能效果较好。

表1 饵料中添加不同水平的枯草芽孢杆菌对鲤鱼血清抗氧化指标的影响

3 讨论

动物机体产生氧化应激易导致机体衰老，并发生疾病，主要受超氧阴离子和OH·的威胁[2]。动物机体内存在清除自由基及脂质氧化物的抗氧化酶类，主要包括CAT、SOD、GSH-Px等，保护机体免受氧化损伤[3]。本研究中，试验2组和试验3组鲤鱼血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性显著高于对照组；试验2组和试验3组鲤鱼血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组和试验1组；试验2组鲤鱼血清中过氧化氢酶活性显著高于对照组；试验组鲤鱼血清中丙二醛含量均比对照组显著降低。研究表明，鲤鱼饵料中添加1.0%的枯草芽孢杆菌对机体抗氧化功能效果较好。张冬梅等[4]研究发现，在大口黑鲈养殖中，使用适量的枯草芽孢杆菌可以提高肠道组织的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及过氧化氢酶活性，提高了机体的抗氧化能力，且枯草芽孢杆菌的最适添加量为1.0%，于本研究结论类似。表明在水产生物养殖中使用适量的枯草芽孢杆菌可以增强机体的抗氧化功能，可与枯草芽孢杆菌改善了机体肠道健康，增强了机体对抗应激能力。

4 结论

本试验条件下，在鲤鱼饵料中使用适宜水平的枯草芽孢杆菌可以显著增强机体血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性，显著降低丙二醛含量，增强了鲤鱼机体的抗氧化功能，且枯草芽孢杆菌的最适添加量为1.0%。