四君子汤对脾虚犬体重及部分血清生化指标的影响*

石达友,李盛强,朱华君,邹导夫,龙耀镓,郭世宁

(华南农业大学兽医学院,广东广州 510642)

四君子汤对脾虚犬体重及部分血清生化指标的影响*

石达友,李盛强,朱华君,邹导夫,龙耀镓,郭世宁

(华南农业大学兽医学院,广东广州 510642)

通过皮下注射利血平复制犬脾虚证动物模型,观察犬临床体征、体重及部分血清生化指标变化情况,研究四君子汤对脾虚犬体重及血清生化水平的影响。结果显示,在犬出现脾虚证候后,体重与血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)水平均显著低于空白对照组(P＜0.05);用四君子汤治疗7 d后,脾虚犬体重与血清TP、ALB、GLO均恢复到与空白对照组水平接近,而未经治疗的脾虚试验组犬各项指标未恢复到与空白对照组接近,与空白对照组和四君子汤治疗组比较呈显著性差异(P＜0.05)。试验结果表明,通过皮下注射利血平可以复制犬脾虚证动物模型,用四君子汤治疗犬脾虚证具有明显的疗效。

脾虚;血清;生化指标;四君子汤

脾虚证模型是中医动物模型中最重要的一种,众多文献研究报道显示,脾虚证具有许多中医证候所共有的模糊的、全身的、慢性的、虚性的、与正常体质呈渐变关系的病理特点。因此,研究中医脾虚证动物模型,将有助于对中医最重要的两类脏腑虚证之一的脾虚证有更加深入的认识。从中国研究脾虚动物30多年时间以来,围绕中医脾虚证动物模型研究的文献报道非常多,所涉及的研究领域和研究内容也非常广泛,主要包括从动物临床体征[1]、免疫功能[2-3]、神经内分泌功能[2,4]、胃肠组织学[5-6]、细胞线粒体功能[7]和机体自由基代谢方面研究[8-9]。在中医脾虚证动物模型建立中采用小鼠、大鼠、兔等实验动物比较常见,而采用犬作为实验动物的文献目前未见公开报道。由于犬的生理结构比小鼠、大鼠、家兔等医学常用实验动物更接近人类自身,因此本试验中采用犬来复制中医脾虚证动物模型,以求进一步为中医脾虚证动物模型的研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 广州增城本地犬,3月龄大小,体重在2.5 kg～3 kg之间,购回之后进行常规免疫与驱虫等,自由采食与饮水,隔离饲养观察7 d,确定为健康犬只后方用于试验。

1.1.2 主要仪器与器材 SYSMEX-1800i型全自动生化分析仪为日本希森美康公司产品,TDL-40B型水平转子离心机为上海安亭科学仪器厂产品。

1.1.3 试剂 总蛋白(T P)、白蛋白(ALB)试剂盒,购于南京建成生物工程研究所;利血平注射液:规格为1 mL和1 mg,购自广东邦民制药厂有限公司。

1.2 方法

1.2.1 中药制备 四君子汤口服液制备,根据文献报道[10],用人参(用西洋参代替)、茯苓、白术、甘草按2∶2∶2∶1组方,先用水浸泡 2 h后,一起在水中煎沸2次,每次40 min,合并滤液,80℃常压浓缩为0.5 g/mL的药液,4℃保存备用;

1.2.2 试验分组及处理 15只犬,随机分为3组,分别为第1组、2组和3组,5只/组。第1组为空白对照组,第2组为脾虚自然恢复组,第3组为脾虚中药治疗组。用利血平进行脾虚造模成功后,用含生药1 g/mL的四君子汤煎液按5 mL/kg体重给第3组犬灌胃,灌药持续7 d,待第3组试验犬临床体征恢复正常后停止试验;第1组、2组采用等量生理盐水灌胃。

1.2.3 脾虚模型造模方法 根据文献报道[11],用犬进行预试验后,确定每日按0.15 mg/kg剂量给2组、3组试验犬皮下注射利血平,脾虚动物的主要临床症状和体征,主要包括精神倦怠,嗜卧,懒动,拱背,扎堆 ,眼眯 ;毛枯 ,甚至稀少 ;耳 、尾色白 ;严重者在受惊动时无神,抓取时挣扎无力,腹面被毛憔悴;软便,便溏或泄泻,受激排便率增高;体重增长减慢或体重下降;体温不变或略有降低;食量减少等临床症状[12]。

1.2.4 试验犬体重变化与血液生化分析 分别在实验动物脾虚造模前、造模成功后和治疗结束后,对试验犬空腹称重并记录结果。从犬前肢静脉采血2 mL于离心管,静置后以2 500 r/min离心5 min,析出血清,分装于1.5 mL塑料离心管中,用SYSMEX-1800i型全自动生化分析仪测定血清生化总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)水平。

1.2.5 数据分析 应用SPSS13.0统计分析软件对数据进行单因子方差分析和相关性分析,再进行多重比较。

2 结果

2.1 犬临床体征变化情况

用利血平给犬注射约10 d,临床上表现出食欲不振、消瘦、粪便溏泄、倦怠乏力、毛发不荣、萎靡嗜睡、眯眼等症状,判定试验犬出现中医脾虚证候[12-13]。经四君子汤治疗7 d后,第3组的临床症状基本上消失,而第2组犬的脾虚症状部分消失,表明四君子汤对中医脾虚证有较好的治疗效果。

2.2 犬体重变化情况

由表1可见试验犬3次体重测量结果显示,在脾虚造模试验前,3个组试验犬体重差异不显著(P＞0.05),而在脾虚造模成功后,第2组和第3组犬体重均显著低于1组(P＜0.05);在经过四君子汤治疗结束后,第2组犬体重均显著低于第1组和第3组,同时第3组组犬也显著低于第1组(P＜0.05)。在各试验组内的3次体重结果显示,第1组犬体重试验期间一直呈显著性增长(P＜0.05);四君子汤治疗组犬体重在第1、2次测定结果比较无显著差异(P＞0.05),但四君子汤治疗结束后,其体重显著高于前两次(P＜0.05);而第1组犬体重在3次称重结果之间无显著差异(P＞0.05)。

2.3 犬血清总蛋白、白蛋白、球蛋白变化情况

由表2～表4结果显示,第2组、3组犬在脾虚造模成功后,其血清总蛋白、白蛋白、球蛋白均显著低于第1组(P＜0.05);在四君子汤治疗结束后,第2组犬血清三项蛋白含量均显著低于第1组、3组(P＜0.05)。组内结果比较显示,第3组试验犬经治疗后,其血清三项蛋白含量基本上恢复到造模前正常水平,而第2组犬血清三项蛋白含量未完全恢复到正常水平,与造模前比较差异不显著(P＞0.05)。

表1 各组犬体重变化Table 1 Weight changes in each g roup of caninekg

表2 各组犬血清总蛋白变化Table 2 Changes of seral total protein in each g roup of canineg/L

表3 各组犬血清白蛋白变化Table 3 Changes of seral abumin in each g roup of canine g/L

表4 各组犬血清球蛋白变化Table 4 Changes of seral globulin in each group of canine g/L

3 讨论

中医理论认为,脾主运化,为气血生化之源,脾虚化源不足,不能充达肢体、肌肉,故肢体倦怠,神疲少力,形体消瘦;脾虚水谷精气化生不足,宗气亦虚,故少气懒言。近30多年的研究文献报道显示,在研究中医脾虚实质的工作中使用适量利血平可以在大鼠、家兔、豚鼠等多种动物中制成中医脾虚证动物模型,其表现症状与人类常见的的消化机能紊乱为主,或伴有某些植物神经功能障碍的脾虚证很相似,可靠性和重现性强,简单易行。

在现代中医学研究试验中,不少学者从动物脾虚临床体征与血清生化等指标方面进行研究,并用四君子汤进行佐证,均取得了较好的效果。四君子汤由人参、白术、茯苓、甘草组成,有益气健脾之功。方中以人参为君,甘温大补元气,健脾养胃;以白术为臣,苦温健脾燥湿;佐以茯苓,甘淡渗湿健脾;苓术合用,健脾除湿之功更强,促其运化;使以炙甘草,甘温调中。研究报道显示[14],四君子汤多糖具有显著的免疫调节作用,是中药治疗脾虚证的有效方剂。

在本试验中脾虚组犬临床体征表现看,比较符合中医关于脾虚肢体倦怠、神疲少力的理论;而且从外观看,动物倦怠少动,形体消瘦,便溏,皮毛无光泽,说明脾虚模型建立成功[13]。同时,两脾虚实验组犬体重与空白对照组比较显著下降,脾虚犬血清总蛋白、白蛋白、球蛋白水平显著降低。究其原因,一是由于慢性腹泻可使较多的营养素随粪便排出,二是由于脾虚证犬的小肠对营养素的吸收功能减退,从而导致肝脏合成蛋白的功能障碍。在本试验中,脾虚组犬在经四君子汤治疗后,其体重与血清生化水平恢复到接近空白对照组水平,而未经四君子汤治疗的脾虚犬的体重与血清生化水平均均显著低于空白对照组水平(P＜0.05)。结果表明,四君子汤对犬脾虚证有较好的疗效。

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[4]任晓玲,赵慧英,逄国梁,等.家兔脾俞穴和肝俞穴的神经支配[J].动物医学进展,2003,24(2):76277.

[5]赵 宁,张皖东,贾红伟,等.四君子汤对利血平所致脾虚大鼠肠道黏膜TG F-β和 TNF-α表达的影响[J].中国中医基础医学杂志,2007,13(1):44-46.

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Effects of Decoction of Four Mild Drugs on the Body Weight and the Part of
Seral Biochemical Indicators in Dogs with Syndrome of Splenic Asthenia

SHI Da-you,LI Sheng-qiang,ZHU Hua-jun,ZHOU Dao-fu,LONG Yao-jia,GUO Shi-ning

(College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong,510642,China)

A splenic asthenia model was made by subcutaneous injection of reserpine in dogs.The effects of Decoction of Four Mild Drugs on clinical symptom,body weight and seral biochemical indicators were observed.The results showed that the body weight,the level of seral total protein(TP),seral albumin(ALB)and seral globulin(GLO)obviously decreased(P＜0.05)after the dog appeared syndrome of splenic asthenia.After treating the dog with syndrome of splenic asthenia by Decoction of Four Mild Drugs for 7 days,the observed indexes recovered close to the blank control group level.The other splenic asthenia dogs were not treated,so the observed indexes did not recover to the blank control group level(P＜0.05).The finding showed that animal model of spleen deficiency can be replicated by subcutaneous injection of reserpine in dogs,and Decoction of Four Mild Drugs had obvious effect on treating the dog with syndrome of splenic asthenia.

splenic asthenia;serum;biochemical index;decoction of four mild drugs

S859.3

A

1007-5038(2010)09-0029-04

2010-03-02

广东省自然科学基金项目;国家科技支撑计划子课题(9151008002000003;2008BADB4B01-6)

石达友(1977-),男,四川成都人,讲师,博士研究生,主要从事中兽医医药教学与科研工作。