膜联蛋白A2在脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性

郭继东 丁照义 王 策 (北华大学附属医院神经三科，吉林 吉林 300)

发生于脑组织的胶质瘤恶性程度高，临床进展快，预后差，目前尚无有效的根治方法〔1〕。虽然手术治疗目前仍是一种比较有效的治疗手段，但因为不能根治，所以临床治疗的效果并不十分理想。因此找寻脑胶质瘤的靶点治疗方法十分重要。膜联蛋白A2(ANXA2)是一种钙离子介导的具有磷脂结合性质的蛋白质，表达于人体内皮细胞、单核/巨噬细胞、骨髓细胞和某些肿瘤细胞中，定位于细胞核、细胞质及细胞质膜外表面，参与细胞膜形成、膜转运、胞吞、胞吐、细胞增殖、信号转导、分化及凋亡等重要的细胞生命活动。ANXA2的异常表达与肿瘤的发生发展密切相关，本文探讨在脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象 我院2008年1月至2011年12月神经外科手术的脑胶质瘤患者67例，男35例，女32例，年龄32～76〔平均(54.3±4.8)〕岁。根据WHO关于神经系统肿瘤的分类及分级标准，Ⅰ级12例，Ⅱ级15例，Ⅲ级20例，Ⅳ级20例。同时选择我院病理科同期的正常脑组织蜡块40块为对照组。

1.2 免疫组化方法检测脑组织中的ANXA2的表达 应用Sigma公司生产的ANXA2试剂盒，严格按照说明书。ANXA2的阳性表达为细胞内出现棕黄染颗粒。PBS代替一抗作为阴性对照。用光学显微镜在400倍下观察切片，并计数阳性细胞百分比。

1.3 TUNEL法检测脑组织中的凋亡细胞百分比 采用武汉博士德公司生产的TUNEL试剂，严格按照TUNEL试剂盒说明。其中细胞出现棕黄染则表示为凋亡细胞，于400倍光镜下对阳性细胞进行观察计数。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件进行χ2检验。

2 结果

2.1 脑胶质瘤组织中ANXA2的表达 脑胶质瘤组织中ANXA2的阳性表达率为88.6%，明显高于正常脑组织(2.7%，P ＜0.05)。

2.2 不同临床病理特征的脑胶质瘤中ANXA2表达 男性脑胶质瘤组织中ANXA2的阳性率为87.3%，与女性(85.4%，P＞0.05)无明显差异。≥50岁脑胶质瘤患者脑组织中ANXA2的阳性率为84.1%，与＜50岁(89.8%，P＞0.05)无明显差异。Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ级脑胶质瘤组织中 ANXA2的阳性率分别为43.2%，57.3%，66.9%和92.2%，随着病理分级的增加，阳性率明显增加(均P＜0.05)。

2.3 不同脑组织中凋亡细胞百分比 脑胶质瘤组织中细胞凋亡率明显低于正常脑组织(27.6%vs 58.2%，P＜0.05)。

3 讨论

脑胶质瘤是最常见、发病率最高的一种颅内肿瘤，也称为神经胶质细胞瘤，是由神经上皮组织衍化来的肿瘤，一般脑胶质瘤的治疗难度比较大。手术和放射治疗仅是有针对性的局部治疗〔2〕。手术最大的优势就是能将肿瘤完整切除，但只适合早期肿瘤，对中晚期患者来讲，即使能手术效果也不理想，仅仅是“治表”而已，微小的肿瘤细胞仍旧存在其他部位。放射治疗对于肿瘤局部控制不如外科手术，造成这种情况的主要原因是肿瘤的复发和转移。另外，化疗属于全身性药物治疗，它在抑制肿瘤细胞生长的同时，对机体内正常繁殖的细胞也有不同程度的毒性作用，化疗药物的严重毒副反应以及多耐药性等，仍是十分棘手问题〔3〕。以上种种弊端，限制了这些常规治疗方法在肿瘤治疗，尤其是晚期肿瘤治疗中的应用。对于中晚期肿瘤患者来说，肿瘤显然不是仅仅是一种局部疾病，而是一种全身性疾病，对于肿瘤治疗需要多科学、多手段的综合治疗。

ANXA2是Annexin家族的重要成员，是一类被钙离子活化后可与膜磷脂结合的蛋白，参与膜转运及膜表面其他一系列依赖于钙调蛋白的活动，它的表达异常与许多疾病的发生与发展密切相关〔4，5〕。细胞凋亡是细胞对内外信号刺激作出的应答反应，对维持内环境的稳定具有重要的作用。细胞凋亡参与了肿瘤的起始过程，并对肿瘤的发生起负调控作用。细胞凋亡的影响因素很多，如某些生物化学及分子生物学改变既可影响细胞的凋亡，而同样也受到某些基因表达增强或减少的影响。本文结果表明，ANXA2基因表达增强参与了脑胶质瘤的发生与发展，并且脑胶质瘤细胞凋亡也受到了明显抑制，可见ANXA2可能通过调控脑胶质瘤细胞的凋亡而参与其发生与发展。魏丽丽等〔6〕的研究与本文结果一致，他们采用RNAi的方法抑制ANXA2表达，则肝癌细胞的凋亡明显增强。章霭然等〔7〕等也通过实验证实抑制ANXA2表达，人结直肠癌细胞凋亡也明显增加。因此，ANXA2与脑胶质瘤的发生发展密切相关，可能通过抑制肿瘤细胞的凋亡而参与肿瘤的发生与发展。

1 王忠诚.神经外科学〔M〕.武汉:湖北科学技术出版社，2005:541-4.

2 卢 杰，吴朝霞，张桂芳，等.脑胶质瘤三维适形放射治疗与调强放射治疗的剂量学比较〔J〕.中国放射医学与防护杂志，2009;29(5):499-501.

3 王 明，周永庆，徐庆生，等.恶性脑胶质瘤个体化化疗的研究进展〔J〕.2008;35(6):548-52.

4 Singh P.Role of AnnexinⅡin Gl cancers:interaction with Gastrins/Progastrins〔J〕.Cancer Lett，2007;51(1):19-45.

5 Braden AR，Kafka MT，Cunningham L，et al.Polymeric Nanoparticles for sustained down-regulation of Annexin A2 inhibit prostate tumor growth〔J〕.J Nanosci Nanotechnol，2009;9(5):2556-65.

6 魏丽丽，李润册，强荣兵，等.膜联蛋白A2对人肝癌细胞生物学行为的影响〔J〕.中国生物工程杂志，2010;30(6):11-6.

7 章霭然，潘 宁，侯颖春，等.ANXA2基因表达水平对人结直肠癌细胞增殖及运动的影响〔J〕.陕西师范大学学报(自然科学版)，2009;37(6):71-6.