及己根醇提物抗炎作用的研究※

孙淑萍 李胜利

（1 皖南医学院药学系，芜湖241002；2 安徽省亳州市华佗中医院骨伤科，亳州236800）

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御性反应，是许多疾病发生、发展的基础。对于非感染性炎症，抗生素是无益的。非感染性炎症性疾病的治疗多以水杨酸为代表的非甾体类抗炎药、糖皮质激素为代表的甾体类抗炎药、甲氨蝶呤为代表的免疫抑制药为主，但由于这三类药物均存在明显的不良反应而限制了它们的临床应用。因此，寻找抗炎疗效好，不良反应小的新型抗炎药物成为目前抗炎药研究的重要方向之一。雷公藤具有糖皮质激素样抗炎、免疫抑制作用，却无糖皮质激素的副作用，广泛用于治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病，其见效快、疗效确切，几乎没有可以完全替代的类似中药。但在使用过程中，雷公藤引起的毒副反应事件屡见报道，成为近半个世纪以来发生中毒事件最多的中草药之一，其毒副作用在传统中草药中排第三，其毒副作用限制了其在许多领域的应用。因此进一步寻找抗炎疗效好，毒副作用小的中药很有必要、非常迫切。

及己（Chloranthus serratus Roem.et Schalt.）为金粟兰科金粟兰（Chloranthaeeae）属植物及己的根。鉴于目前国内外尚无及己抗炎作用及其机制的研究报道，本文拟进行及己抗炎作用的研究。

1 材料与仪器

1.1 材料 及己（采于安徽黄山）；角叉菜胶（上海金穗生物科技有限公司）；伊文思蓝（上海速科实业有限公司）；醋酸、生理盐水、二甲苯（天津市百世化工有限公司）；雷公藤多苷片（黄石飞云制药有限公司）等。

1.2 动物 昆明种雄性小鼠，体重18～22g，SD雄性大鼠，体重（220±30）g，均由南京江宁青龙山动物繁殖场提供。

1.3 仪器 紫外分光光度计（上海分析仪器厂）；紫外分光光度计（UV－2550，岛津SHIMADZU）；电子分析天平（上海良平仪器仪表有限公司）；BS系列电子天平（塞多利斯）；TGL－16G型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；高速离心机（TDL－5型，上海利扬仪器有限公司）；旋转蒸发仪（上海爱明仪器有限公司）。

2 实验方法

2.1 及己醇提液的制备 将及己根洗净，晾干后粉碎成粗粉，置于圆底烧瓶中，加10倍量75%乙醇浸泡1h，回流提取1h，用三层纱布过滤。药渣再加10倍量75%乙醇，回流提取1h，用三层纱布过滤，两次滤液合并，用旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩至1g／ml。

2.2 及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响 取昆明种雄性小鼠50只（18～22g），随机分为5组，每组10只，分别为高、中、低剂量组，雷公藤多苷片组（阳性组），生理盐水（NS）组即空白组。于灌胃给药后1h，在大鼠右后足跖皮下注射角叉菜胶0.1ml。致炎后1～5h，每小时用窄带尺分别测量左右踝关节周径，以其差值作为肿胀度。结果（见表1）。说明及己根醇提液对小鼠角叉菜胶性足跖肿胀具有显著的抑制作用。

表1 及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响（±S）

表1 及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响（±S）

注：与生理盐水组相比，＊＊P＜0.01

组别 n 剂量／g·kg－11h 2h 3h 4h 5h生理盐水组 10 － 7.19±0.549.79±0.3811.85±0.2510.58±1.149.14±1.37低剂量组 101.25.98±1.15＊＊ 7.37±0.97＊＊ 9.89±1.27＊＊ 9.43±1.13＊＊ 7.48±1.53＊＊中剂量组 102.43.47±1.75＊＊ 5.20±1.19＊＊ 7.43±0.586.35±1.87＊＊ 5.36±0.64＊＊高剂量组 103.62.15±0.59＊＊ 2.39±1.15＊＊ 2.43±1.51＊＊ 1.50±0.93＊＊ 1.39±1.67＊＊雷公藤多苷片组 100.003632.24±0.1.03＊＊ 2.49±0.84＊＊ 2.51±1.09＊＊ 1.57±0.78＊＊ 1.52±1.33＊＊

2.3 及己根醇提液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响[1]昆明种雄性小鼠，分组同上。根据小鼠体重按每10g灌胃0.2ml，计算给药量。连续灌胃给药4d。末次给药后1h，用移液枪在小鼠左耳涂抹二甲苯正反两面各10μl。30min后，将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳。用6mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，电子天平称重。计算肿胀抑制率。肿胀抑制率（%）＝A（B）／A×100%式中，A代表空白组肿胀度，B代表受试药物组或阳性对照药物组肿胀度。肿胀度（g）＝左耳重量－右耳重量，结果见表2。表2说明及己根醇提液有减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀的效果。

表2 及己根醇提液对小鼠耳肿胀度的影响（±S，%）

表2 及己根醇提液对小鼠耳肿胀度的影响（±S，%）

注：与生理盐水组相比，＊＊P＜0.01

组别 n 剂量／g·kg－1 耳肿胀度／g 抑制率生理盐水组10 － 0.008430±0.0001077 －低剂量组 101.20.006965±0.0001100＊＊ 17.4中剂量组 102.40.006115±0.0002015＊＊ 27.5高剂量组 103.60.004755±0.0001663＊＊ 43.6雷公藤多苷片组 100.003630.004231±0.0001037＊＊50.2

2.4 及己根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[2]

昆明种雄性小鼠，分组同上。根据小鼠体重按每10g灌胃0.2ml，计算给药量。空白组按体重灌服等量生理盐水。连续灌胃给药4d。末次给药后1h，各鼠尾静脉注射1%伊文思蓝生理盐水0.1ml／10g，随即腹腔注射0.6%醋酸0.1ml／10g。20min后将小鼠颈椎脱臼处死，腹腔注射NS6ml。轻揉小鼠腹部后，沿腹中线剪1小口，倾出腹腔溶液约5～6ml，1000r／min离心5min。在紫外分光光度计590nm波长处测定吸收度。并进行t检验，结果见表3。表3说明及己根醇提液高、中、低剂量组、雷公藤多苷片组与生理盐水组相比均有显著性差异，低、中、高三组之间及三组与雷公藤多苷片组之间都没有显著性差异。说明及己根醇提液具有与雷公藤多苷片相当的抑制醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增加的效果。

表3 及己根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（±S）

表3 及己根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（±S）

注：与生理盐水组相比，＊＊P＜0.01

组别 n 腹腔洗出液吸收度值生理盐水组100.452±0.006低剂量组 100.343±0.009＊＊中剂量组 100.316±0.002＊＊高剂量组 100.310±0.012＊＊雷公藤多苷片组 100.304±0.007＊＊

2.5 及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生的影响[3]昆明种雄性大鼠，分组同上。在乙醚麻醉下，无菌操作，在大鼠双侧腋窝各植入一消毒棉球（20mg／只）。灌胃给药qd×7d，第8天处死，剥离肉芽组织，在80℃下烘干1h，精密称重，减去棉球重量，即为肉芽肿干重，结果见表4。表4说明及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生有抑制作用。

表4 及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生的影响（±S，%）

表4 及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生的影响（±S，%）

注：与生理盐水组相比，＊＊P＜0.01

组别 n 剂量／g·kg－1 肉芽肿干重（mg） 抑制率生理盐水组10 － 98.508±0.4440 －低剂量组 101.278.487±0.3619＊＊ 20.3中剂量组 102.452.479±0.2334＊＊ 46.7高剂量组 103.630.659±0.2023＊＊ 68.9雷公藤多苷片组 100.0036328.540±0.2573＊＊71.0

总之，通过及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响、对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响、对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响、对大鼠棉球肉芽肿增生的影响这几个实验可以说明及己确有抗炎作用。

3 讨论

既往研究发现，雷公藤含有萜类（二萜类、三萜类、倍半萜）等成分，具有抗炎、镇痛、抗风湿的作用，被广泛应用于类风湿性关节炎及各种自身免疫性疾病的治疗[4]。昆明山海棠含有萜类等成分，具有良好的抗炎作用，能抑制炎症时毛细血管通透性增高，减少渗出，抑制增生，对免疫功能有影响[5]。千年健含有萜类成分，有抗炎、镇痛、抗风湿作用。因此，可以从含有萜类成分的中药中寻找有效抗炎药物[6]。

及己中含有的化合物结构复杂，其骨架可分为桉叶烷型、环桉烷型、吉马烷型、菖蒲烷型等数种类型，同时它们具有内酯、酮、醇、多聚体等多种形式。在 《中药大辞典》中记载及己含有以下成分：二氢焦莪术呋喃烯酮、焦莪术呋喃烯酮、银线草内酯E、F、新菖蒲酮、金粟兰内酯C、银线草内酯C、环银线草醇A、B、C、D等。这些化合物中，以单萜和倍半萜为主，其中金粟兰内酯等倍半萜类化合物在及己中含量较多，是及己中的主要指标性成分[7]。

《中药大辞典》记载及己功用主治：活血散瘀，祛风止痛，解毒杀虫。主治跌打损伤，骨折，经闭，风湿痹痛等（中医风湿痹证范畴包括西医的风湿性关节炎、类风湿性关节炎等疾病）。 《全国中草药汇编》指出及己“舒筋活络、祛风止痛、消肿解毒，主治跌打损伤、风湿腰腿痛、疔疮肿毒、毒蛇咬伤”[8]。故从及己含萜类成分及临床应用两方面分析均支持其有抗炎作用。

本文通过实验证实及己根醇提液对小鼠角叉菜胶性足跖肿胀具有显著的抑制作用、有减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀的效果、能抑制醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增加、对大鼠棉球肉芽肿增生有抑制作用，也充分说明及己确有抗炎作用。

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[4]吴少辉，刘光明.雷公藤内酯的提取、分析和药理作用研究进展[J].现代药物与临床，2011，26（1）：36－39.

[5]李贤光，何黎.昆明山海棠与雷公藤药理学对照研究[J].昆明医学院学报，2006，27（2）：107－110.

[6]邓沂.土茯苓合千年健、露蜂房可治类风湿性关节炎[J].中医杂志，2002，1（43）：11.

[7]Wu B，He S，Pan Y J.Sesquiterpenoid with new skeleton from Chloranthus henryi[J].Tetra Lett，2007：448－453.

[8]赵国平，戴慎，陈仁寿.中药大辞典[M].上海：上海科学技术出版社，2009：310－311.