CD44v6 与肿瘤关系的研究进展

陈 俊（综述），蔡 军（审校）

（南昌大学第一附属医院普外科，南昌 330006）

细胞黏附分子CD44v6 是一种广泛分布于各种细胞表面的跨膜糖蛋白，是介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质的黏附和相互作用的分子。近年来研究［1-2］表明，CD44v6 在某些肿瘤细胞和部分人体正常组织中高表达，并在肿瘤的发生发展、侵袭和转移等方面发挥关键作用。CD44v6 在肿瘤中的具体作用机制尚不十分明了，笔者就其生物学特性及其与肿瘤关系的研究进展作一综述。

1 CD44 分子的生物学特性

1.1 CD44 的分子结构

CD44 分子是由单一基因编码的具有高度特异性的一种分布极广泛的单链表面糖蛋白［3］，又称Ly-24、细胞表面黏附因子、细胞外基质受体Ⅲ（extracellular matrix receptorⅢ，ECMRⅢ）、淋巴细胞导航受体（lymph0cytehoming receptor）和透明质酸受体（hya-luronatereceptors）。人类CD44 基因定位于11号染色体短臂上（11p13），全长约50 kb，含有20 个高度保守的外显子，每个外显子长度从70 bp 到210 bp 不等，完整基因组在染色体DNA 上大约跨越50 kb，包括10 个组成型外显子和10 个变异型拼接外显子，它们被长短不一的内含子分隔。按照CD44 基因中所含外显子类型不同可分为两种，一种是组成型外显子（constitution exon，C-exon），仅含组成型外显子的CD44 称为标准型CD44（standard CD44）即CD44s；另一种是选择性剪接外显子，又称变异体外显子（variant exon，V-exon）即CD44v。CD44s 基因包含10 个组成型外显子而不含有任何V 区变异型外显子，其转录片段存在于所有CD44转录产物中。它编码361 个氨基酸（Aa）。CD44v 基因含有10 个变异性拼接外显子，总长度仅1 245 bp，这10 个V 区外显子介于第5 和第6 个组成型外显子之间。V 区外显子能以连续方式拼接，又能以跳跃方式拼接，参加拼接的外显子可多可少，从而使转录片段长短不一。前者存在于大多数细胞上，如淋巴细胞、单核细胞、红细胞、上皮细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等，后者主要存在于上皮源性细胞和肿瘤细胞上［4］。目前通过PCR 技术在许多细胞系中发现了10 多 种CD44v。分别称 为CD44v1、CD44v2、CD44v3、……CD44v10 等。CD44v6 是主要的变体之一，是由于编码CD44 基因片段功能区外的外显子6 发生可变拼接后转录而成。其结构与CD44s 的基本结构相似，但在细胞膜外靠近细胞膜区插入了43个由v6 变异拼接型外显子所编码的不同序列的氨基酸。有研究证实CD44v6 基因是一种与转移有关的基因［1-2］。

1.2 CD44 的主要功能

CD44 分子参与细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性黏附过程［5］。促进成纤维细胞和淋巴细胞与ECM 如透明质酸、硫酸软骨素、纤连蛋白、胶原蛋白、纤维素、糖原以及层黏蛋白等的黏附；参与免疫调节，参与淋巴细胞的激活过程，尤其是T 淋巴细胞及NK 细胞等的激活；CD44 分子作为淋巴细胞“归巢”受体可介导淋巴细胞在血液和淋巴液之间的运行，参与淋巴细胞的再循环；与细胞骨架蛋白结合，并参与细胞伪足形成，调节细胞的运动及形态，增强细胞转移能力，从而促使肿瘤的进展［6］；结合并中和透明质酸，更新间质组织成分；可以调节某些药物的吸收以及细胞对药物的敏感性；参与细胞内外的信号传导、细胞增殖分化以及创伤等一系列生理过程；CD44 分子还可在不同水平被调节，参与肿瘤的侵袭与转移［7］。CD44 分子和它相应的配体相互作用可导致肿瘤细胞分泌某些生长因子，这些生长因子可能对肿瘤生长是非常重要的。如CD44v6可介导硫酸肝素结合生长因子，促进肝细胞生长因子（HGF）与蛋氨酸受体结合，从而促进肿瘤的转移。

2 CD44v6 的表达与肿瘤的关系

2.1 CD44v6 在恶性肿瘤中的表达

研究发现，CD44v6 在头颈部鳞癌、肺癌、宫颈癌和大肠癌等多种恶性肿瘤细胞中表达上调或发生构型改变，即在恶性肿瘤组织中呈高表达，而在正常组织中呈低表达或不表达［8-13］。Liu 等［10］应用免疫组化检查了胃腺癌和结肠、直肠腺癌各62 例，研究发现CD44v6 与对照组相比只在癌组织中表达，CD44v6 的高表达与病理分级、浸润程度有关。Yaqin等［11］采用免疫组化链霉菌抗生物素一过氧化物酶方法检测CD44v6 在宫颈鳞癌及癌前病变中的表达，研究结果显示，随着宫颈恶变程度的增加CD44v6 的表达阳性率也逐渐升高，提示CD44v6 与宫颈癌的发生、发展有关。Liu 等［12］检测了82 例食管鳞癌组织标本中CD44v6 的表达，阳性率为64.6%，并且CD44v6 的表达升高与浸润深度及淋巴结转移密切相关。王茜等［13］报道，舌鳞癌组织中CD44v6 阳性细胞百分率显著高于癌旁组织；舌鳞癌伴淋巴结转移与否的组间CD44v6 阳性强度差异有统计学意义。

2.2 CD44v6 与恶性肿瘤的关系

众多文献表明，CD44v6 的过度表达与多种人体恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关，被认为是肿瘤转移促进因子［14-15］。一些肿瘤细胞上的黏附分子表达的降低，使细胞之间的附着减弱，肿瘤细胞从周围细胞的附着处脱离，从而出现浸润或转移。另一些肿瘤细胞表达的黏附分子可使肿瘤细胞与血管内皮上的纤连蛋白、胶原蛋白等结合，黏附在血管内皮细胞上，造成血行转移。CD44v6 是含v6 变异体的CD44 拼接变异体，它通过与透明质酸结合，影响肿瘤细胞之间以及肿瘤细胞与基质的结合能力，改变肿瘤细胞表面黏附分子的构成和功能，增强肿瘤细胞的运动能力，有助于肿瘤细胞获得转移潜能，从而促进肿瘤细胞的浸润和转移。CD44v6 是目前比较公认的肿瘤转移促进基因，其促进转移作用机制可能是表达CD44v6 的肿瘤细胞与远离的淋巴管和血管内相应配体结合，使转移至那里的肿瘤细胞更加稳定地寄宿与生长，有效地形成转移瘤。

Orian Rousseau 等［16］研究发现，CD44v6 通过与肝细胞生成因子HGF 及其酪氨酸激酶受体形成一种具有兴奋作用的复合物来激活Ras 信号通路。当Ras 信号系统激活后，可产生细胞增殖及抗凋亡效应，在肿瘤的发生发展中有重要作用。Zlobec 等［17］运用免疫组化的方法对结肠癌组织芯片进行检测，发现CD44v6 的表达与结肠癌的浸润深度、淋巴结转移、浸润范围及预后相关，表明CD44v6 不只在食管鳞癌组织中高表达，可能与消化道肿瘤的浸润转移均有相关性。Desai 等［18］报道大肠癌组织中CD44v6的表达上调时，MMP9 表达上调，两者的表达呈正相关，认为CD44v6 和MMP9 两者的共同作用促进了肿瘤细胞的侵袭转移，其作用机制可能是CD44v6为MMP9 定位于细胞表面提供了相应的受体，二者的结合形成复合物共同完成了EMC 的降解，从而促进了肿瘤细胞的转移。张真等［19］研究发现CD44v6在乳腺癌组织中高表达，且与腋窝淋巴结转移有密切的关系。这提示CD44v6 作为黏附分子，参与了乳腺癌的发生发展和浸润转移过程，其使癌细胞与间质间有更强的黏附能力，同时使癌细胞逃避机体的免疫监测的能力，从而使癌细胞更容易发生转移。因此，CD44v6 的过度表达是乳腺癌变及浸润转移的一个重要因素，检测淋巴结中CD44v6 的表达可能成为早期诊断乳腺癌的指标之一。Situ 等［8］研究表明CD44v6 的过表达与肺癌的浸润与转移有关。Afify 等［20］认 为：CD44v6 可能通过改变癌细胞的骨架结构和抗原位点的分布，获得淋巴细胞样免疫屏蔽，逃避机体免疫系统的识别，且更易于进入淋巴结形成转移瘤。

很多研究表明CD44v6 与胃肠道肿瘤的发生发展、浸润和转移密切相关，已受到普遍关注［21-23］。Okayama 等［24］发现在胃腺癌组织中的CD44v6 阳性表达率明显高于其在非典型增生胃黏膜及正常胃黏膜中的表达率，随着肿瘤细胞浸润深度的增加、淋巴结转移，CD44v6 阳性表达率显著升高，但与年龄、性别及有无脉管侵犯无关，提示CD44v6 不但与胃癌的发生、发展密切相关，而且在胃癌的临床进展和转移过程中均发挥了重要作用。

另有研究发现，细胞黏附分子CD44v6 可以和Ezrin 蛋白相互作用，进而影响微丝骨架的重排，诱导肿瘤细胞侵袭表型的发生，提高肿瘤细胞的侵袭和转移能力［25］。同时，Ezrin 可以直接与CD44v6 分子的细胞质部分发生作用，使CD44v6 间接连到肌动蛋白细胞骨架，藉此调整细胞迁移和细胞形状，而CD44v6 分子过度表达也可以引起Ezrin 的功能激活，从而导致肿瘤转移的能力加强［26］。Samija 等［27］指出，将肿瘤的特异性标志物CD44v6 基因转入小鼠提取的树突状细胞（DC）细胞，进行肿瘤的免疫治疗和预防，可诱发抗肿瘤作用。

目前，文献中对于肿瘤CD44v6 的表达与患者预后之间的关系报道不一。Peng 等［28］发现，179 例结肠腺癌CD44v6 阳性组比CD44v6 阴性组的总体局部复发率高（17.63%比6.62%，P=0.026）。CD44v6 可作为Ⅱ和Ⅲ级结肠腺癌患者行肠系膜全切除预后的敏感指标。Lee 等［29］对95 例胆管癌中CD44v6 的表达与预后的研究认为，CD44v6 表达阳性不能作为独立预测因子。Porcel 等［30］研究发现，胸膜恶性肿瘤患者较胸膜间皮瘤患者胸膜液中sCD44v6 含量明显升高。可见sCD44v6 在上皮性肿瘤中的表达水平明显升高，但能否预示肿瘤的生物学特征及预后仍有待进一步研究。

3 结语与展望

肿瘤的侵袭和转移是一个比较复杂的、多步骤的连续过程，涉及到肿瘤细胞自身和宿主之间的错综复杂的关系，受到多种相关基因的调控。CD44v6与肿瘤的关系，特别是与肿瘤的浸润转移和预后的关系是近几年来提出的新课题，许多研究还处于初始阶段。有关CD44v6 在恶性肿瘤组织中的表达及在肿瘤侵袭和转移机制的研究尚十分不足。一方面，应该继续加强对CD44v6 基因功能的研究，另一方面，还需要建立CD44v6 在人类各种恶性肿瘤组织的表达谱，以便更加深入的研究CD44v6 在恶性肿瘤侵袭转移中的具体机制。CD44v6 基因在肿瘤的预测、早期诊断、病情进展、转移潜能与预后的评估等方面具有很大的潜在价值。随着对CD44v6 基因的进一步研究，不仅有助于病理活检标本的早期预测转移潜能，而且在肿瘤的普查、诊断、治疗和预后等方面发挥重要作用。

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