白细胞介素-4、白细胞介素-8、白细胞介素-9在支气管哮喘患儿血清中的表达及临床意义

苏宝凤, 郦银芳, 张 莉

(南京医科大学附属南京医院 儿科, 江苏 南京, 210006)

支气管哮喘是由肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞等多种细胞参与的慢性气道变态反应性疾病，是儿科常见病，多由呼吸道感染诱发，具有反复、急性发作的特征。近年来研究发现，细胞因子与支气管哮喘发作密切相关。本研究观察白细胞介素(IL)-4、IL-8、IL-9在支气管哮喘患儿血清中的表达，探讨其临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年4月—2013年10月南京医科大学附属南京医院儿科收治的支气管哮喘患儿86例，均符合2008年中华医学会儿科学分会修订的诊断标准[1]。其中急性发作期患儿43例设为发作组，取得控制水平的临床缓解期患儿43例设为缓解组。所有患者2周内未服用糖皮质激素、长效β2受体激动剂和免疫抑制剂。另选取同期体检的健康儿童37例设为对照组。发作组男22例，女21例；年龄5～11岁，平均年龄(7.3±2.1)岁。缓解组男23例，女20例；年龄5～11岁，平均年龄(7.5±2.2)岁。对照组男20例，女17例；年龄5～12岁，平均年龄(7.8±2.5)岁。3组儿童年龄、性别等一般资料无显著差异(P>0.05)。

1.2 方法

所有儿童均于清晨空腹采取静脉血2 mL, 3 000转/min 离心15 min, 取血清置于-40 ℃的冰箱中保存待检。采用双抗体夹心酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)测定血清IL-4、IL-8、IL-9水平，ELISA试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司，操作严格按照说明书的操作步骤进行。

1.3 观察指标

观察3组儿童血清IL-4、IL-8、IL-9水平的差异。

2 结 果

IL-4、IL-8、IL-9在对照组、缓解组、发作组儿童血清中的表达水平均呈递增趋势，组间比较有显著差异(P<0.01)。见表1。

表1 3组儿童血清IL-4、IL-8、IL-9水平比较±s) ng/L

3 讨 论

支气管哮喘是儿童期最常见的一种由多种炎性细胞和细胞组分共同参与的特应性气道慢性炎症疾病，以气道阻塞、炎症和高反应性为主要特征[2], 病程较长且反复发作，给患儿和家庭都带来了不便和负担。目前关于支气管哮喘的发病机制观点多样，尚未完全明确，包括IgE学说、肾上腺阻断学说、呼吸道炎症学说、Th1/Th2类细胞因子失衡学说等[2]。随着分子免疫学发展，目前普遍认为与气道局部的各种细胞因子、炎性介质等密切相关[3-5]。

细胞因子是指由免疫细胞或某些非免疫细胞分泌的具有生物学效应的小分子蛋白物质。具有介导炎症反应、调节白细胞生理功能、参与免疫应答和组织修复等功能[6]。IL-4是主要由Th2 细胞分泌的一种具有多种生物活性的细胞因子，在免疫反应中发挥重要作用。它能够促进B淋巴细胞的活化和增殖，诱导抗原刺激的T淋巴细胞增殖，调节抗体同种型转换效应，促进体液免疫应答，尤其是IgE介导的免疫应答反应[2,7-8]。IL-4促进B细胞活化，高效合成IgE, 并促进IgG向IgE转化，使IgE处于高水平状态，并能促进血管内皮细胞黏附分子的表达，进而促进嗜酸性粒细胞、肥大细胞等细胞增殖和募集，在支气管哮喘炎症的发生和发展过程中起重要作用[2]。此外还有研究[9]发现IL-4水平过高，可能促进纤维母细胞的增生、胶原的合成，进一步促进慢性呼吸系统疾病晚期肺纤维化的发生。本研究中支气管哮喘患儿的血清IL-4水平显著高于健康儿童，且发作期患儿显著高于缓解期患儿(P<0.01), 提示IL-4参与支气管哮喘发生的免疫调节过程，与支气管哮喘气道重构的发生具有内在关联性，在儿童支气管哮喘的发生中起正性促炎作用[9], IL-4的水平可在一定程度上反映气道炎症的严重程度。缓解期患儿的血清IL-4水平高于对照组，提示缓解期症状获得缓解，但仍存在慢性气道炎症，应坚持抗感染治疗。

IL-8是由中性粒细胞、单核-巨噬细胞等多种细胞产生的一种重要的早期炎症趋化细胞因子。IL-8可强烈趋化激活中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞等[10]。促进T淋巴细胞趋化游走，促使中性粒细胞脱颗粒，趋化嗜酸性粒细胞向气道聚集，激活嗜酸性粒细胞阳离子蛋白，释放前列腺素类、白三烯类等大量炎症介质，加强免疫反应，引发气道痉挛，加重哮喘[10-12]。本研究中发作期患儿血清IL-8水平显著高于缓解期患儿，缓解期患儿又显著高于健康儿童(P<0.01)，这与国内多个学者报道的结果相似。如周庆涛[13]等报道，与正常健康人比较, IL-8在重度支气管哮喘患者中显著升高，在轻度和中度组亦有升高趋势。崔丽英[14]等发现哮喘组血清IL-8水平均显著高于正常对照组，且急性发作期患者血清IL-8水平显著高于缓解期。提示IL-8作为细胞趋化因子家族中的主要成分，参与支气管哮喘的气道炎症反应，在支气管哮喘的发生、发展中起重要作用。

近年来研究认为, IL-9参与过敏性炎症反应，在支气管哮喘的发生和维持过程中起重要的调控作用。IL-9是由嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、肥大细胞等炎性反应细胞分泌的细胞因子，具有广泛的生物学活性[15]。对主要的炎性反应细胞、气道上皮组织细胞和平滑肌细胞等细胞的增殖，调节细胞功能和信息传递都有着重要作用[16]。IL-9还参与机体免疫应答中多种免疫调节，如肿瘤发生、寄生虫免疫、慢性阻塞性肺疾病等多个疾病过程。有学者认为, IL-9促进淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞的增殖，提高血清IgE水平，增强肥大细胞对变应原的反应，诱导黏蛋白的表达，促进了气道高反应性的发生，可作为支气管哮喘活动期的重要标志[17]。另有研究发现, IL-9可上调骨髓祖细胞表达IL-5受体α链，促进嗜酸性粒细胞的分化成熟和其在肺部的聚集，同时通过调节一些趋化因子如Eotaxin等的表达，促进嗜酸粒细胞在肺部的聚集，参与支气管哮喘的发病[18-19]。本研究发现血清IL-9水平在健康儿童、缓解期患儿和发作期患儿中呈递增趋势(P<0.01), 提示IL-9水平与支气管哮喘的发生密切相关，可作为支气管哮喘发病的一项重要检测指标。这与多个文献报道结果一致[15, 20]。

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