不同程度肝纤维化患者IGF－2及IGFBP－2与MMPs家族相关性分析＊

西安交通大学检验科（西安710061） 周凯华 石兴民

肝硬化是最常见的肝脏疾病之一，该疾病的发生是在乙肝病毒等各种致病因素导致肝内结缔组织异常增生，假小叶形成，最终出现肝脏正常结构被破坏及肝功能不断受损，严重者可出现肝细胞坏死并有恶变可能［1］。血清胰岛素样生长因子－2（IGF－2）、胰岛素样生长因子结合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝脏分泌，并激活转化生长因子（TGF）等因子，使静止的肝星状细胞激活［2］，并转化为肌成纤维样细胞。基质金属蛋白酶－2（MMP－2）及其抑制剂TIMP－2是近年来发现的有效反应细胞外基质（ECM）重构及新生血管形成的重要指标［3］，是导致肝硬化进展的重要因素，但目前对两者之间的关系尚未明确。我们自2012年12月至2014年12月对就诊于我院的肝硬化患者进行了IGF－2、IGFBP－2及MMPs家族检测，初步明确该类因子在肝硬化进展中的关系。

资料与方法

1 一般资料 选择自2012年12月至2014年12月期间我院就诊的慢性乙型肝炎214例，其中男性122例，女性92例，年龄42～65岁，平均年龄为53.5±11.6岁，入选患者的均符合《病毒性肝炎防治方案》相关诊断标准，并将患者分为慢性乙型肝炎轻度组（A组）、中度组（B组）、重度组（C组）及肝硬化组（D组），分别有65、61、49、39例。

2 检测指标

2.1 IGF－2、IGFBP－2测定：所有研究对象均于入选后次日晨抽取静脉血3ml，室温静止30min后离心，取血清留存待检。检验由我院检验科完成，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测IGF－2、IGFBP－2。

2.2 血清 MMP2、TIMP－2检测：采用ELISA法检测MMP－2及TIMP－2，检测检测由我院检验科完成，操作严格按照说明进行，并保证在试剂有效期内使用且保证质控符合国家标准。

3 统计学方法 应用SPSS15.0软件进行统计分析，计量资料均采用¯x±s表示，组间比较采用方差分析后进行LSD检验，以P＜0.05为有统计学意义。

结 果

1 各组IGF－2、IGFBP－2结果比较 对各组IGF－2、IGFBP－2水平进行分析，B 组患者IGF－2、IGFBP－2较A组出现显著升高（P＜0.05），C组患者IGF－2、IGFBP－2较A组、B组均出现显著升高（P＜0.05），D组患者IGF－2、IGFBP－2较 A 组、B组、C 组均出现显著升高（P＜0.05）。见附表。

附表 各组IGF－2、IGFBP－2结果比较（¯x±s）

2 各组血清MMP2、TIMP－2水平比较 对各组MMP－2、TIMP－2水平进行分析，B组患者 MMP－2及TIMP－2较 A组均未见显著差异（P＞0.05），MMP－2／TIMP－2较 A 组显著升高 （P＜0.05），C 组患者MMP－2及TIMP－2较A组均出现显著差异（P＜0.05），MMP－2／TIMP－2较 A 组、B组患者均出现显著升高（P＜0.05），D 组患者 MMP－2、TIMP－2、MMP－2／TIMP－2较A组、B组、C组均出现显著差异（P＜0.05）。

3 血清IGF－2、IGFBP－2与 MMP－2、TIMP－2相关性分析 分析IGF－2、IGFBP－2与 MMP－2、TIMP－2相关性，IGF－2与 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈显著相关 （P＜0.05），与 MMP－2未见显著相关性 （P＞0.05）；IGFBP－2与 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈显著相关 （P＜0.05），与 MMP－2未见显著相关性 （P＞0.05）。

讨 论

随着慢性乙型肝炎等患者的持续增多，乙肝相关性肝硬化目前已成为消化科常见的肝脏疾病之一，在HBV等各种损伤因子反复刺激下，肝细胞出现变性坏死，肝星状细胞激活导致大量细胞外基质产生［4］，并转化为肌成纤维样细胞。IGF－2是重要的多功能调节因子之一，具有促进DNA复制以及蛋白质合成，加速细胞有丝分裂等作用［5］。分泌的IGF－2与IGFBP－2结合，并控制IGF－2生成后转运至病变组织的释放过程，是参与病情进展的重要因素。

细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）是肝脏细胞外的一个重要组成部分。MMPs是一类被具有重要的细胞调节的锌依赖性酶，可对细胞微环境的多种效应，被认为在各种炎症、神经变性和恶性疾病发展过程中起着显著作用。在慢性乙肝相关性肝纤维化的形成过程中，肝细胞坏死后加速炎细胞的募集［6］，Kupffer细胞等激活后刺激转化生长因子产生，并通过旁分泌途径刺激肝星状细胞活化增生，并向肌成纤维细胞样细胞转化。基质金属蛋白酶－2（MMP－2）是参与细胞外基质降解的主要蛋白酶，主要针对Ⅳ型胶原TIMP－2是MMPs的特异性抑制因子，其水平降低可加重细胞外基质降解，其水平下降可以增强 MMP－2等的活性。血清IGFBP－2水平是反映前列腺癌恶性程度及侵袭性的重要指标，表明IGFBP－2等是ECM重构及刺激新生血管形成的重要因素。血清胰岛素样生长因子－2（IGF－2）、胰岛素样生长因子结合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝脏分泌，并激活转化生长因子（TGF）等因子，使静止的肝星状细胞激活，并转化为肌成纤 维 样 细 胞。 分 析 IGF－2、IGFBP－2 与 MMP－2、TIMP－2相关性，IGF－2与 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈显著相关，IGFBP－2与TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈显著相关，因而MMPs家族所致细胞外基质平衡紊乱所导致肝纤维化进展过程与IGF－2及IGFBP－2存在密切关系，该过程可能以IGF－2／IGFBP－2水平失调导致肌成纤维细胞激活，加剧细胞外基质重构，成为肝纤维化病情进展的重要机制。

综上所述，随着肝纤维化的进展，IGF－2及IGFBP－2水平与细胞外基质重构密切相关，是反映肝纤维化进展的重要因子，对两类因子进行监测对于探索该系列指标在肝纤维化病情诊断、治疗过程中病情变化具有重要临床意义。

［1］ Anguela X M，Tafuro S，Roca C，etal.Nonviral－mediated hepatic expression of IGF－I increases Treg levels and suppresses autoimmune diabetes in mice［J］.Diabetes，2013，62（2）：551－560.

［2］ Smith T，Sloboda DM，Saffery R，et al.Maternal nutritional history modulates the hepatic IGF－IGFBP axis in adult male rat offspring［J］.Endocrine，2014，46（1）：70－82.

［3］ Slifierz MJ，Friendship R，De－Lange C F，et al.Immunomodulatory factors and infectious agents associated with the hepatic gene expression of the IGF system in nursery pigs［J］.Animal，2014，8（5）：844－851.

［4］ 谭文彬，周广起，王 霄，等.IRE－BP 1蛋白与肝癌细胞耐药性发生机制的研究［J］.国外医学（医学地理分册），2013，34（1）：54－56.

［5］ Levi J，Huynh FK，Denroche HC，et al.Hepatic leptin signalling and subdiaphragmatic vagal efferents are not required for leptin－induced increases of plasma IGF binding protein－2 （IGFBP－2）in ob／ob mice［J］.Diabetologia，2012，55（3）：752－762.

［6］ Rehem R N，El－Shikh W M.Serum IGF－1，IGF－2and IGFBP－3as parameters in the assessment of liver dysfunction in patients with hepatic cirrhosis and in the diagnosis of hepatocellular carcinoma［J］.Hepatogastroenterology，2011，58（107）：949－954.