抗磷脂抗体检测在系统性红斑狼疮中的临床应用

魏　萍，王艳侠，石书梅，张爱平，马　健



抗磷脂抗体检测在系统性红斑狼疮中的临床应用

魏萍，王艳侠，石书梅，张爱平，马健

[摘要]目的评估抗磷脂抗体包括抗心磷脂抗体（Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗体（anti-β2GPⅠ）在系统性红斑狼疮（SLE）中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）对确诊的120例SLE和100例健康体检者血清Acl（IgG、IgM、IgA）和anti-β2GPⅠ（IgA/G/M）水平表达进行测定，并分析其对SLE的敏感度和特异度，及血清Acl和anti-β2GPⅠ水平间的相关性。统计学分析采用Χ2检验。结果SLE组血清Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM、anti-β2GPⅠ阳性率分别为6.7％、4.2％、1.7％、5％、18.3％，均高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论anti-β2GPⅠ抗体对SLE的敏感度高于Acl，建议两种抗体联合检测，有助于提高检出率。

[关键词]抗磷脂抗体；系统性红斑狼疮；抗心磷脂抗体；抗β2糖蛋白Ⅰ抗体；抗磷脂综合征

抗磷脂抗体（antiphospholipid antibodies，APLs）是一组作用于磷脂和（或）磷脂结合蛋白的异质性抗体。由APLs介导的，以动静脉血栓形成、血小板减少和病态妊娠为特点的一组自身免疫性疾病则称为抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）。2006年悉尼国际分类标准[1]已将IgG型和/ 或IgM型的抗心磷脂抗体（anticardiolipin，Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗体（anti-β2GPⅠ），以及狼疮抗凝物作为实验室指标纳入APS的诊断标准。抗磷脂抗体是抗磷脂综合征患者血清中重要的标志性抗体。继发性抗磷脂综合征常继发于自身免疫性疾病，尤其是系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）[2]。系统性红斑狼疮是一种可表达多种自身抗体的自身免疫性疾病，也一定程度地表达Acl和 anti-β2GPⅠ。

1　资料与方法

1.1一般资料收集2012年3月—2014年12月笔者所在医院肾内科、皮肤科、血液科、血液净化科等门诊及住院患者血清标本220例，其中120例确诊为系统性红斑狼疮。男20例，女100例；年龄15～70岁，平均33岁。其余100例为健康对照组，来自院体检中心进行健康查体的健康人群。

1.2仪器与试剂检测用酶标仪为DNM-9606，选用的Acl试剂盒由德国ORGENTEC提供，antiβ2GPⅠ抗体试剂盒由EUROMMUN提供。

1.3方法用普通真空采血管采集受试者空腹静脉血3 ml，室温静置30min，1200 r/min离心5min收集血清，保存于-20℃冰箱待用。采用酶联免疫吸附法，同时检测SLE组和健康对照组血清中的不同亚型（IgG、IgM、IgA型）抗心磷脂抗体（Acl）和antiβ2GPⅠ抗体水平，其中IgG型Acl＞10 U/ml为阳性，IgM型Acl＞7 U/ml为阳性，IgA型Acl＞10 U/ml为阳性，anti-β2GPⅠ抗体＞20 RU/ml为阳性，操作按说明书。

1.4统计学分析应用SPSS13.0统计学软件。采用Χ2检验（理论频数＜1时采用Fisher精确检验）比较SLE组、健康对照组中抗磷脂抗体的阳性率。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

见表1、2。

表1　两组抗磷脂抗体的检测结果

表2　SLE组不同抗磷脂抗体的敏感度、特异度（％）

3　讨论

随着检测技术的发展，Acl和抗β2GPⅠ抗体逐步被临床广泛应用。抗磷脂抗体可能是导致系统性红斑狼疮患者肾小球微血栓的主要原因，其可导致肾的血管性损害，即肾的非炎症性血栓性血管病，在狼疮性肾炎患者中抗磷脂综合征肾病是另一个损害肾的重要因素，严重者可危及生命。抗磷脂抗体和狼疮性肾炎关系密切，对于狼疮性肾炎患者，应注意检测抗磷脂抗体及抗磷脂综合征肾病，给予合理的治疗。抗磷脂综合征是动静脉及小血管血栓形成的重要原因，也是90％的复发性流产的主要原因。由于抗磷脂综合征的临床表现缺乏特异性，因此其诊断和鉴别诊断非常依赖抗磷脂抗体实验室检测的结果。由于文献报道IgM型APLs与IgG型相比与抗磷脂综合征的相关性较弱，因此国内部分实验室仅开展了IgG型Acl的检测，但是Salobir等[3]和Ota[4]的研究小组均发现部分血栓和复发性流产患者中仅存在IgM型APLs。IgA型APLs的临床价值仍然存在争议，但有文献报道IgA型抗β2GPⅠ抗体常常伴随抗磷脂综合征临床症状出现，并且22％的恶性APS患者中仅IgA型抗β2GPⅠ抗体阳性[5]。第13届抗磷脂抗体国际大会建议在高度怀疑APS，IgG型和IgM型抗体均阴性的患者中应该检测IgA型抗体。

该研究中，Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM和抗β2GPⅠ抗体在SLE中的阳性率分别为6.7％、4.2％、1.7％、5.0％和18.3％，IgG型Acl是阳性率最高的Acl亚型。IgG型Acl、IgG/IgM型ACl和抗β2GPⅠ抗体的阳性率在不同组中的差异有统计学意义，其余指标的阳性率无明显差异。SLE患者组中，Acl阳性的患者中6.7％仅IgG亚型阳性，5％IgG/IgM亚型阳性，该组120例SLE中，临床上仅15例被诊断伴有APS，所以抗体的检出率总体较低。

在SLE患者组中，抗β2GPⅠ抗体的敏感度高于IgG/M/A型Acl，因此IgG/M/A型Acl不适合作为Acl的初筛试剂，建议同时检测IgG、IgM和IgA型抗心磷脂抗体和抗β2GPⅠ抗体，有助于提高检出率，有助于减少漏诊和临床患者的及早诊断和治疗。当然，在有条件的实验室，如果患者血清中antiβ2GPⅠ抗体阳性，可对其anti-β2GPⅠ抗体进一步分型，确定anti-β2GPⅠ的亚型（IgG/IgM/IgA）。据相关文献报道，如果3种抗体亚型均阳性，提示患者发生血栓或病态妊娠的风险更高，并且患者复发的概率也更高[6]。有研究报道，Acl和抗β2GPⅠ抗体在单纯的SLE组中的阳性率及水平显著低于SLE伴APS组，提示此两种抗体的检测对预测SLE继发APS有重要的评估价值，对鉴别SLE是否伴有APS有重要的参考价值[7]。抗β2GPⅠ抗体比Acl检出率高，所以抗β2GPⅠ抗体可作为抗磷脂综合征的筛查。

综上所述，该研究评估了检测这两种抗体的价值，探讨如何选择正确的检测项目，提高检测的敏感度和特异度。临床实验室应当重视IgM、IgA型抗磷脂抗体的临床价值，建议有条件的实验室均应开

展Acl 3种亚型抗体和anti-β2GPⅠ抗体的联合检测，提高APS诊断的敏感性和特异度，并且重视该两种抗体均阳性的高风险预测价值。

参考文献

[1]Miyakis S，Lockshin MD，Atsumi T，et al. International consensus statement on an update of the classification creteria for definite antiphospholipid syndrome（APS）[J]. J Thromb Haemost，2006，4（3）：295-306.

[2]Biggioggero M，Meroni PL. The geoepidemiology of the ntiphospholipid antibody syndrome[J].Autoimmun Rev，2010，9：A299-A304.

[3]Salobir B，Sabovic M，Hojnik M，et al. Anti-beta 2-glycoprotein Ⅰantibodies of IgM class are linked to thrombotic disorders in yong women without autoimmune disease[J]. Immunobiology，2007，212（2）：193-199.

[4]Ota K，Dambaeva S，Lee J，et al. Persistent high levels of IgM antiphospholipid antibodies in a patient with recurrent pregnancy losses and rheumatoid arthritis[J].Am J Reprod Immunol，2014，71（3）：286-292.

[5]Ruiz-García R，Serrano M，Martínez-Flores JA，et al. Isolated IgA anti-β2 glycoproteinⅠantibodies in patients with clinical criteria for antiphospholipid syndrome[J].J Immunol Res，2014：70（4）：395.

[6]Pengo V，Ruffatti A，Legnani C，et al.Clinical course of highrisk patients diagnosed with antiphospholipid syndrome[J].J Thromb Haemost，2010，8（3）：237-242.

[7]韩晓蓓，孙桂荣，刘明军，等.抗磷脂综合征相关自身抗体临床应用价值评估[J].中华检验医学杂志，2014，37（8）：851-854.

[2015-11-12收稿，2015-12-10修回]

[本文编辑：董冰媛]

The clinical application of antiphospholipid antibodies detection in systemic lupus erythematosus

WEI Ping，WANG Yan-xia，ZHANG Ai-ping，et al. Nephrosis Laboratory Center，the General Hospital of Jinan Military Region，Jinan，Shandong 250031，China

[Abstract]Objective To investigate the prevalence and clinical significance of different subtypes（IgG，IgM，IgA）of anticardiolipin antibodies（Acl）and anti-β2-glycoproteinⅠantibodies（anti-β2GPⅠ）in systemic lupus erythematosus（SLE）. MethodsIgG，IgM，IgA Acl and anti -β2GPⅠwere tested by enzyme -linked immunosorbent assay（ELISA）in the 120 patients with SLE and 100 healthy controls. The sensitivity and specificity of Acl and anti-β2GPⅠfor the diagnosis of SLE and the correlation of serum Acl and anti-β2GPⅠlevels were analyzed with Χ2test. Results The positivity rates of Acl-IgG，Acl-IgM，Acl-IgA，Acl-IgG/IgM，antiβ2GPⅠwere 6.7％，4.2％，1.7％，5％，18.3％respectively，which were significantly higher in the SLE group than those in the healthy controls（P＜0.05）. ConclusionThe sensitivity of anti-β2GPⅠfor SLE is higher than that of Acl.The Acl and anti-β2GPⅠare advised to co-test to improve the detection rate.

[Key words]Antiphospholipid antibodies；Systemic lupus erythematosus；Anticardiolipin antibodies；Beta 2-GlycoproteinⅠ；Antiphospholipid syndrome

[中图分类号]R593.24

[文献标志码]A

DOI：10.14172/j.issn1671-4008.2016.05.005

[作者单位]250031山东济南，济南军区总医院肾内科肾病实验中心（魏萍，王艳侠，石书梅，张爱平，马健）