胃癌组织中LKB1和ARID1A的表达及其临床意义

白艳红+胡涛

【摘要】 目的 研究胃黏膜组织中LKB1和ARID1A基因表达与胃癌发生和发展的关系。方法 32例手术切除的胃癌组织标本、10例正常胃组织及18例胃炎组织标本利用组织芯片技术， 通过免疫组织化学方法， 检测LKB1和ARID1A的阳性表达率。结果 在胃癌组织中LKB1和ARID1A阳性率（15.63%、34.38%）较胃炎（66.67%、55.56%）和正常胃组织（80.00%、60.00%）明显降低（P<0.05）。胃癌伴淋巴结转移患者LKB1和ARID1A阳性率与胃癌无淋巴结转移患者比较， 差异有统计学意义（P<0.05）；胃癌不同浸润深度LKB1和ARID1A阳性率比较， 差异有统计学意义（P<0.05）；胃癌不同病理组织分型LKB1和ARID1A阳性率比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。结论 LKB1和ARID1A在胃癌组织中的表达缺失， 与胃癌转移和浸润密切相关， 且在胃癌发生发展的不同环节可能为相对独立而又相互作用的调控基因。

【关键词】 抑癌基因；LKB1；ARID1A；胃癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.25.028

独有的分子生物学背景促使了胃癌的发展演变， 而新近发现LKB1和ARID1A两种抑癌基因的突变率在胃癌相关组织中可高达70%～80% [1]。为进一步探讨LKB1和ARID1A两种抑癌基因在胃癌组织中的表达及预后关系， 选取本院60例胃黏膜组织标本， 采用组织芯片技术并通过免疫组织化学方法对LKB1和ARID1A进行检测分析， 现报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料 选取菏泽市荣军医院病理科2009～2013年经石蜡包埋处理的胃癌组织样本蜡块共32例， 其中， 男22例， 女10例， 年龄18～55岁， 平均年龄（39.1±7.3）岁。所有入选患者的病理组织切片均符合国家胃癌协会合作组织复核标准， 另选10例正常胃组织及18例胃炎组织标本作为对照。

1. 2 组织芯片制作方法 ①空心蜡块的制作：向空心模具内注入融化的石蜡， 待石蜡凝固后一次性制作成空心蜡块。②目标组织的定位：先将选取好的样本蜡块用德国Leica病理切片机切片， HE染色， 光镜下， 根据其形态学变化标注目标组织。③目标组织取样：将标记好的目标样本蜡块标注部位入放组织芯片取样机， 利用样本取样机钻取蜡块的目标组织。④制备样本蜡块：将钻取样本组织放入组织芯片制备机中， 将已溶化的石蜡注入样本蜡块制备机中， 冷凝后， 目标芯片蜡块制备完成。

1. 3 判定标准 采用双盲法对实验结果进行阅片， 阳性表达主要以棕黄色颗粒存在于细胞的胞浆或胞膜， 无染色者（+）， 阳性表达率<10%者（++）， >10%部分表达者（+++）， 全部细胞膜染色或>10%胞浆中度以上表达者（++++）。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 LKB1和ARID1A在不同胃黏膜组织中的表达 LKB1阳性表达率最高的是正常胃组织为80.00%， 其次是胃炎组织阳性表达率为66.67%， 均显著高于胃癌组织的15.63%（P<0.05）；ARID1A的阳性表达率在胃癌组织中为34.38%， 显著低于正常胃组织的60.00%和胃炎组织的55.56%（P<0.05）。

2. 2 胃癌有无淋巴转移LKB1和ARID1A阳性率比较 胃癌无淋巴转移者LKB1阳性率为36.36%（4/11）， 高于胃癌伴淋巴转移者的4.76%（1/21）（P<0.05）；胃癌无淋巴转移者ARID1A的阳性率为72.73%（8/11）， 高于胃癌伴淋巴转移者的14.29% （3/21）（P<0.05）。

2. 3 胃癌不同浸润深度LKB1和ARID1A阳性率比较 胃癌不同浸润深度LKB1和ARID1A阳性率比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。其阳性表达与胃癌浸润深度负相关。见表1。

2. 4 胃癌不同病理组织分型LKB1和ARID1A阳性率比较 胃癌不同病理组织分型LKB1和ARID1A阳性率比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

3 讨论

LKB1主要使细胞增殖停滞在细胞周期的G1期， 从而促进细胞的凋亡， 另外LKB1对胚胎血管形成还有细胞诱导等多个方面都是具有生物学意义， 同时其还是一种重要的抑癌基因。本研究中检测到胃癌组织中LKB1基因存在表达下调， LKB1蛋白的缺失表达与胃癌关系紧密联系， 且LKB1抑癌作用机制有可能出现一些负性的调节效果。在本研究中， 通过免疫组织化学方法验证了LKB1在胃癌发生发展中可能起着重要的抑制作用， 并且这种基因的表达可能对患者的预后有着重要的帮助作用， 对胃癌患者在延长其术后总体生存时间方面也具有积极作用。

ARID1A基因对肿瘤的抑制作用需要P53蛋白的参与， 而P53蛋白又通过调节CDKN1A和SMAD3因子使一种染色质重塑因子发生失活性突变导致肿瘤细胞的再生受到抑制， 从而抑制肿瘤细胞发生发展[2]。本研究发现， 在胃癌组织中ARID1A基因蛋白的表达阳性率明显低于正常胃组织及炎症组织， 分析认为其阳性表达与胃癌浸润深度和淋巴转移负相关， 而胃癌不同病理组织分型LKB1和ARID1A阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。

总之， 胃癌形成发展过程可能与胃癌组织中ARID1A基因凋亡调控作用减弱或消失有关。肿瘤的发生是多基因参与的复杂过程， 在胃癌发生发展中， ARID1A和LKB1可能为相对独立而又相互作用的抑癌基因， 目前研究较为零散， 二者的抑癌机制仍需进行系统研究。

参考文献

[1] 夏雷， 莫伏根， 李刚， 等.胃癌中HER-2和HER-3的表达及临床意义.实用老年医学， 2013， 27（11）：903-907.

[2] 闫毓秀， 张淑萍， 滑静. p53基因研究进展.北京农学院学报， 2009， 24（2）：74-77.

[收稿日期：2016-01-29]