核酸检测技术在献血者血液筛查中的作用

王建林

（内蒙古赤峰市中心血站，内蒙古 赤峰 024000）

核酸检测技术在献血者血液筛查中的作用

王建林

（内蒙古赤峰市中心血站，内蒙古 赤峰 024000）

目的 分析献血者血液筛查中运用核酸检测技术的价值。方法 通过转录介导扩增与实时荧光定量方法对我中心血站300份和4000份献血者的标本实施病毒核酸检测，比较两种检测方法的结果与对比检测的结果。结果 通过这两种方式进行检测，都存在一定的比例的ELASA（+）和NAT（-），运用GFE核酸实施检测之后，试剂HBV和HCV阳性的结构低于ID-TMA的检测试剂，此外，在本次研究中，并没有出现HIV与HCV血清学漏检的情况。结论 通过核酸的检测可以有效降低在输血过程中发生传染病的概率，其中在献血者的血液中实施病毒筛选，采用ID-TMA的检测试剂效果更加。

核酸检测技术；献血者血液筛查；作用

当前，输血所导致的传染病已经成为全社会重点关注的问题，因此，为了能够更好地降低类似情况的发展，需要加强对血液病毒的筛选，从而有效排除血液中所携带的病毒，提升接受血液血液使用者的安全性[1]。在本文中结合我中心的情况而做出如下报道。

1 资料与方法

1.1 检测仪器与试剂

在本文中采用的实时荧光定量的方法，即从autoX的病毒核算中提出试剂盒（此批号为：120304），HCV/HIVI-PCR和HBV的筛查试剂盒（即120304），其中IC的试剂盒批号是120405，都属于某国公司的所生产的产品。TMA的方法为你某国公司所生产的自动血液检测仪器，试剂批号是565034/20130904，鉴别试剂为HIV-I，其批号是：575108/20160312，而HBV的批号是（575112/20140314），而HCD的批号是：565106/20130215。

1.2 检测方法

采用实时荧光定量中的PCR方法进行检测，对其中的300份血液实时FLASA的阳性检测，其中S/CO大于1，而其中的150份属于阳性，而150份属于HCV阳性。通过GFE试剂盒中的磁珠法而提取试剂并进行手工提取核酸然后分别放在HCV、HIV-1PCR和HBV的筛选试剂盒中，然后取出混合液BM与探针混合液分别在之前配置的HCV/HBV/PCR和实施混合反应[2]，然后加入大约96孔的PCR的反应板使其发生扩增反应，大约60秒之后就可以将荧光定量置于PCR中观察。结果判断如下：内标为阳性，而标本为阳性的情况则视为阳性，其他则视为无效。

TMA方法，将4000份标本通过FLISA的检测。第一，运用FDTA-K2（5 mL）抗凝真空实时血管采样血液标本，并将其保存在温度大约为2至8℃的环境中，并通过24小时实施离心分离的方式将血浆分离开来，然后运用ELISA的方法实施检测，通过离心十五分钟之后分离5000 g，吸取剩下的血浆大约1.5 mL的无RNA酶在EP管当中，并保存在零下40℃的环境中，采用单人份的NAT检测；第二，根据相关要求而进行操作[3]，把ULTRO的试剂用在HBV、HIV和HCV进行联检并作出分析，然后样本进行重复分析，例如采用ULTRO两次实施联检都为阳性则可以确定NAT为阳性；第三，对这些阳性样本实施HBV-NDA、HIV-RNA和HCNRNA鉴别并最终确定属于哪一种病毒。

2 结 果

采用荧光定量的方法检测，其中132份属于阳性，而IDNAT检出阳性为32份，所占阳性比例是24.24%，而153份HCV标本中，阳性为21份，阳性比例为13.73%。实施TMA的检测方式中，4000份样本中，阳性541份（13.53%），抗-HCV阳性为328份（8.20%），抗-HIV的阳性为88份（2.20%）。单人份的检测中，NAT阳性和ELISA阴性为32份（0.80%），ELISA阳性/NAT阳性323份（8.01%）。

3 讨 论

对血液筛查中采用核酸检测的技术，主要运用是通过聚合酶链反应的基础之上而扩展，目前，此方法在许多国家都得到广泛运用，而在我国血站中的运用ELISA方法所出现的问题，即存在漏检的情况，这就导致病毒滴度以及病毒变异的因素而导致的HIV和HBV的情况[4]，对输血的安全性带来重要的影响。通过核酸检测的技术检测，极大降低输血中发生病毒感染的情况，同时也有效提升输血的安全性。在本次研究中结合我血站的情况而证实此方法的效果，即荧光定量的方法检测，ID-NAT检出阳性为32份（24.24%），而153份HCV标本中，阳性为21份（13.73%）。TMA的检测方式中，阳性541份（13.53%），抗-HCV阳性为328份（8.20%），抗-HIV的阳性为88份（2.20%）。单人份中NAT阳性和ELISA阴性0.80%，ELISA阳性/NAT阳性8.01%。

[1] 李莉华,王素玲,马印图,等.单人份核酸检测在降低输血感染人类免疫缺陷病毒残余风险中的应用[J].解放军医药杂志,2017,29(02):107-110.

[2] 别立莉.河南省汉族献血者HBV基因突变及抗原检测在输血前血液筛查中的应用临床分析[J].中国实用医刊,2017,44(14):36-39.

[3] 伍晓菲.2011-2014年中国国际输血感染预防和控制(CITIC)项目血液筛查核酸检测室间质评结果分析[J].中国输血杂志,2015,28(11):1410-1413.

[4] 王立林,卢 亮,聂冬梅,等.2种核酸筛查系统对血清学阳性献血者检测结果的分析[J].中国输血杂志,2015,28(09):1090-1093.

R446.6

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ISSN.2095-8242.2017.062.12123.01

王雨辰