血清粘附分子SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1 在肺癌诊断中的应用*

武彩虹 银广悦 钱成荣 田雪梅 徐翠玲 张维

·论著·

血清粘附分子SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1 在肺癌诊断中的应用*

武彩虹 银广悦 钱成荣 田雪梅 徐翠玲 张维

目的 探讨可溶性E-钙黏蛋白（soluble E-cadherin，SE-CAD）、可溶性E选择素（soluble E-selectin，SESEL）、可溶性细胞间粘附分子1（soluble Intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1）在肺癌临床诊断中的价值。方法选取2011年6月～2014年12月在本院确诊的168例患者，均经组织学确诊为肺癌，其中小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）98例、非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）70例，肺部良性疾病患者和健康自愿者各50例。所有患者采集静脉血分离血清，采用抗SE-CAD、抗SE-SEL和抗sICAM-1的单克隆抗体试剂盒ELISA方法测定血清粘附分子。结果 SCLC和NSCLC患者血清SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1水平显著高于健康组和良性疾病组（P﹤0.05），而且肿瘤发生转移（III～IV期）的患者血清SE-CAD水平高于无转移（I～II期）的患者（P﹤0.05），但SE-SEL与sICAM-1与是否发生转移没有相关性。结论 SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1对肺癌临床诊断具有一定价值，而且SE-CAD可作为判断肿瘤是否扩散的一个有用指标，从而进行疗效观察和愈后评估。

小细胞肺癌 非小细胞肺癌 可溶性E-钙黏蛋白 可溶性E选择素 可溶性细胞间粘附分子

肺癌是一种高死亡率的恶性肿瘤，5年生存率＜13%，主要原因就是肺癌一经确诊往往是晚期。血清学肿瘤标志物是一类在肿瘤发生、发展过程中由肿瘤细胞产生并释放到血液的物质，有助于肿瘤的早期诊断、疗效观察及预后评估等。可溶性血清粘附分子是各种蛋白酶对细胞表面粘附蛋白降解的片段，随着肿瘤细胞的侵袭和转移，使得肿瘤原发灶或转移器官黏附分子在结构和功能上发生改变，从而使血清粘附分子也发生变化，国内外文献已经报道胃、头颈部、膀胱、前列腺、结肠及乳腺等部位的肿瘤患者血清粘附分子显著升高[1]，但有关肺癌患者SE-CAD、SESEL及sICAM-1水平变化的报道不多。本研究旨在探讨血清SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1与肺癌的关系，现将结果报告如下。

对象与方法

1 对象 2011年6月～2014年12月来本院就诊的168例肺癌患者，其中70例NSCLC（腺癌34例，鳞状细胞癌26例，大细胞癌10例）和98例SCLC，均经临床确诊（包括胸片、头颅、CT、支气管镜、骨扫描及病理检查）。另选取同期体检健康者和肺部良性疾病组各50例作为健康对照。在选择研究对象时，使年龄、性别和吸烟的分布情况在3个研究组中大致相同。同时将SCLC患者分为局限型（未转移）和扩散型（已转移），将NSCLC分为Ⅰ～Ⅱ期（无转移）和Ⅲ～Ⅳ期（已发生转移）。

2 方法 所有受试对象在未接受治疗时（手术、放化疗）静脉采血3 ml置非抗凝管内静置1 h，离心，分离血清–20℃保存备用。采用抗SE-CAD、抗SE-SEL和抗sICAM-1特异性单克隆抗体试剂盒（购于上海科瑾公司），SE-CAD、SE-SEL检测采用ELISA方法，全自动酶联免疫分析仪（DK1504Tecan公司，瑞士）；采用美国贝克曼库尔特ALLERRAX-15离心机3000 r/min离心30 min，取上清液，置–20℃保存，采用酶联免疫吸附法检测sICAM-1水平。

3 统计学处理 应用SPSS19.0软件，多组间均数的比较采用方差分析，两两比较采用S-N-K-q检验，性别和吸烟与否的构成比采用卡方检验，联合ROC曲线评估3种检测的临床应用价值，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 S C L C、N S C L C组与对照组各指标的比较SCLC、NSCLC组、肺部良性疾病组与健康组在年龄、性别和吸烟状况上的差异无统计学意义（P＞0.05），SCLC、NSCLC组血清粘附分子水平均高于健康组和肺良性疾病组（P＜0.05），NSCLC与SCLC组血清粘附分子水平的差异无统计学意义，健康组与肺良性疾病组血清粘附分子水平的差异亦无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2 血清粘附分子水平的比较 不同肺癌组中三种血清粘附分子的水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）见表2、图1。

表1 SCLC、NSCLC组与对照组各指标的比较（±s）

表1 SCLC、NSCLC组与对照组各指标的比较（±s）

注：a与健康组相比，P＜0.05；a与肺部良性疾病组相比，P＜0.05

指标健康组肺部良性疾病NSCLC 组SCLC 组年龄63.5±964.6±7.962.2±11.6 65.1±11.2吸烟：不吸烟 40∶1036∶1453∶1782∶26男：女 41∶938∶1260∶1078∶20 SE-CAD（ng/ml） 960±125.31335±309.23355.4±655.9a 3085.7±501.1aSE-SEL（ng/ml）501±89 854±103.4 1884.5±354.3a1768.3±299asICAM-1（ng/ml）49.8±19107±28.2 920.8±79.3a 899.2±111.6a

表2 不同肺癌组中三种血清粘附分子水平的比较（χ±SD，ng/ml）

讨 论

恶性肿瘤的特性表现有肿瘤细胞的无限增殖、细胞的无序分化以及随着肿瘤细胞侵袭和转移使得肿瘤原发灶或转移器官粘附分子在结构和功能上发生改变等。有文献报道与肺癌相关的粘附分子主要有E-CAD、ICAM-1和E-SEL，经各种蛋白酶降解释放到血液中成为可溶性血清粘附分子[2]。

E-CAD存在于上皮细胞，参与细胞粘附、表皮组织的生长、形态维护及信号传导。SE-CAD分子量约为80～84 KD，是由组织蛋白酶降解组织表面的E-CAD并释放到血液循环中的游离片段，由于肿瘤细胞向胞外分泌的蛋白酶增多，故使E-CAD被降解脱落的量增加，从而使患者血清SECAD水平明显高于正常人。肿瘤组织表面E-CAD被降解的同时，其表面的结构和功能也被破坏，导致肿瘤细胞间的黏附降低或丧失，促使肿瘤细胞侵袭深度和转移增加。本研究中肺癌患者血清SE-CAD水平高于健康组和肺部良性疾病组，而且在SCLC扩散期高于局限期，在NSCLC中III～IV期高于I～II期，均具有统计学意义，III～IV期与I～II期的区别在于是否发生转移，所以血清SECAD不仅可以有助于肺癌的诊断，而且其显著升高提示肿瘤可能转移，可作为判断临床分期、肿瘤转移的间接指标，因为早期的转移通过常规影像不容易被发现[3-6]。

ICAM-1属于免疫球蛋白超家族，在多种造血和非造血细胞中表达，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、内皮细胞和一些上皮组织，肿瘤细胞表达的ICAM-1参与机体对肿瘤的免疫应答而显著增加。本研究血清sICAM-1在SCLC与NSCLC患者中的表达高于正常对照组，与以往报道一致，与肿瘤的扩散及转移没有相关性。国外有研究发现脐静脉内皮ICAM-1表达增加，促进SCLC细胞与内皮组织的粘附，从而促使肿瘤转移，还有报道ICAM-1可增加恶性肿瘤的转移能力，发现血清sICAM-1与肿瘤的分期及进展相关，关于sICAM-1与肿瘤转移的相关性，需要继续收集病例进一步研究[7-9]。

E-选择素（E-SEL）只表达于细胞因子活化的内皮细胞，参与机体对肿瘤的免疫应答，在肿瘤间质的静脉和毛细血管的上皮细胞中显著表达，本研究中NSCLC与SCLC患者血清SE-SEL水平显著高于对照组，国外Roselli等发现血清SESEL只在发生远处转移的鳞癌中升高[10]，但是本研究未发现其与SCLC或者NSCLC发生转移的相关性。经过研究发现血清粘附分子SE-CAD、SESEL和sICAM-1在SCLC或NSCLC患者的表达水平高于健康对照组，虽然这三种粘附分子对肺癌的诊断没有特异性，而且不能代替组织病理学诊断，但其联合检测有助于提高肺癌诊断的准确度，尤其在肺癌的早期，更重要的是血清SE-CAD的水平与SCLC或NSCLC发生远处转移具有一定的相关性，可以用于病情的判断及预后评估。未来仍需要收集更多的病例，进一步研究这三种粘附分子对于肺癌诊断、预后及疗效的作用。

图1 血清SE-CAD、SE-SEL及sICAM-1诊断价值的ROC曲线

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Serum Adhesion Molecules SE-Cadherin、SE-Selectin and sIntercellular Adhesion Molecule-1 as Lung Cancer Biomarkers

WU Cai-hong，YIN Guang-yue，QIAN Cheng-rong，
et al.Department of Clinical Laboratory，China Petroleum Natural Gas Group Central Hospital，Langfang，Hebei 065000

Objective In the present study，we investigated the role of soluble E-cadherin （SE-CAD），soluble E-selectin （SE-SEL） and soluble intercellular adhesion molecule-1 （sICAM-1） as biomarkers in lung cancer. Methods 168 patients with recently diagnosed lung cancer，98 with small cell lung cancer（SCLC），and 70 with non-small cell lung cancer （NSCLC），50 cases of patients with benign pulmonary diseases as well as 50 healthy volunteers were enrolled. Blood samples were collected at the time of diagnosis and measurement of soluble adhesion molecules in the serum samples was performed by enzyme-linked immunoassay using monoclonal antibodies against E-cadherin，E-selectin，and ICAM-1. Results Serum levels of SE-CAD，SE-SEL，and sICAM-1 in both SCLC and NSCLC were significantly higher than the healthy subjects and the group with benign pulmonary diseases （P＜0.05）. In addition，patients with SCLC or NSCLC with distant metastasis had a marked increase of SE-CAD（P＜0.05），but no such correlation with SESEL and sICAM-1 was found. Conclusions Our findings suggest that SE-CAD，SE-SEL，and sICAM-1 have an adjunctive diagnostic role in lung cancer. Furthermore，SE-CAD may also have a prognostic value and could be a useful biomarker in the prediction of lung cancer outcome.

SCLC NSCLC SE-CAD SE-SEL sICAM-1

R734.2

A

1671-2587（2017）04-0382-04

2017-02-18）

（本文编辑：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.04.021

*本课题受河北省廊坊市科技局项目（No.2014013022）资助

065000 廊坊，中国石油天然气集团公司中心医院

武彩虹（1979–），女，内蒙古人，主管技师，硕士，主要从事肿瘤免疫方面工作，（Tel）13643161582。

银广悦，男，主任技师，主要从事实验室诊断方面工作，（Tel）0316－2075450（E-mail）rainbowhb@sohu. com。