食管癌CD34 VEGF表达与CT强化幅度的关系

邢媛媛， 赵佳佳， 曹宏伟， 王胜林， 吴薇娜， 李春晖

(承德医学院附属医院， 河北 承德 067000)

食管癌CD34VEGF表达与CT强化幅度的关系

邢媛媛， 赵佳佳， 曹宏伟， 王胜林， 吴薇娜， 李春晖

(承德医学院附属医院， 河北 承德067000)

目的分析食管癌CD34、VEGF表达与CT强化幅度的关系。方法采集我院收治的40例食管癌患者和20例健康人群的食管粘膜组织，应用免疫组化的方法检测粘膜组织中CD34和VEGF的蛋白表达水平，并对MVD值进行计数，测量CT增强扫描癌灶的CT强化值，进一步分析各指标之间的关系及其与肿瘤临床分期的关系。结果与健康对照组相比，患病组组织CD34和VEGF的表达阳性率均较高(P<0.05)，且二者的表达呈正相关(r=0.451，P<0.05)；食管癌组织中VEGF的表达和MDV均与食管癌的浸润深度、淋巴结转移情况、细胞分化程度和TNM分期相关(P<0.05)；食管癌组织中VEGF(r=0.434，P<0.05)和MVD(r=0.463，P<0.05)均与螺旋CT强化幅度呈正相关，差异均具有统计学意义。结论食管癌组织中CD34和VEGF均呈高表达，并且与CT强化幅度呈正相关，联合检测CD34和VEGF的表达可以作为食管癌的侵袭转移和预后评估的重要指标。

食管癌； CD34； VEGF； MVD； CT强化幅度

食管癌是一种发病率与死亡率均较高的恶性肿瘤，在我国较为常见且严重威胁人类生命健康[1]。我国癌症协会统计数据显示，近年来我国食管癌的新发病例数占全球的一大半，且食管癌患者的预后差[2]。食管癌多为鳞状细胞癌，目前尚无具体清晰的发病机制，近年来对于的研究热点问题是食管癌细胞的侵袭转移和血管生成[3]，食管癌的主要转移方式为淋巴道转移。肿瘤的增殖、转移过程中血管新生是必须的，血管内皮生长因子(Endothelial growth factor，VEGF)是与血管生成相关的重要细胞因子[4]，其作用是促进血管生成和内皮细胞分裂；肿瘤内微血管密度(Microvessel density，MVD)目前作为衡量肿瘤血管生成的一个金标准，可以影响肿瘤强化表现[5]，VEGF和MVD均与肿瘤的侵袭转移密切相关。目前，CT检查是食管癌患者淋巴结转移与否的首选判定方案，研究表明由于影像学与分子生物学之间存在着一定的联系，CT灌注成像可以反映肿瘤内微血管情况[6、7]。本研究通过检测CT强化幅度、VEGF以及CD34在食管癌组织中的表达检测，并计算肿瘤微血管密度(MVD)，以探索食管癌组织中VEGF和CD34的表达与肿瘤血管生成的关系，现报道如下：

1 资料与方法

1.1一般资料:根据如下纳入标准和排除标准收集了我院收治的食管癌患者40例，所有患者均依据2011年我国抗癌协会的食管癌规范化诊治指南[8]，基本临床资料齐全，见表1。研究对象满足下列条件：纳入标准：①患者均符合2011年我国抗癌协会的食管癌规范化诊治指南规定的食管癌诊断标准；②患者均未进行任何的放、化疗及其他特殊治疗；③患者的原始资料基本齐全；④患者及家属充分了解研究内容，签署知情同意书。排除标准：①患者存在严重的慢性心脏、肝胆和肾脏疾病；②患者存在免疫缺陷病史，或有器官移植史等；③患者于入院前已进行过化疗、放疗以及其他特殊治疗。

1.2方 法

1.2.1检查方法:全部患者均于术前一周使用64排西门子多层螺旋CT机进行扫描。常规胸部平扫，扫描参数：扫描厚度5.0mm，螺距为1.5mm，管电压140kV，管电流219mA，增强造影时，应经肘静脉高压注射1.5mL/kg的优维显扫描厚度为5.0mm，螺距为1.5mm。患者进行扫面前必须为空腹。进行CT检测后，按照病灶增强的程度患者可分为轻度：增强后CT值≤20Hu为轻度强化；重度20Hu40Hu为重度强化，认为中度强化以上为明显强化。获取患者和正常对照组的食管粘膜组织标本，做4mm连续切片。食管癌组织切片经苏木素-伊红(HE)染色后，需两位资深病理医师在双盲的条件下确诊患者为食管癌。患者的食管粘膜组织切片均进行免疫组化染色，检测CD34和VEGF的表达，实验操作完全依照试剂盒说明书。VEGF抗体和CD34抗体均购自武汉博士德公司，免疫组化试剂盒购自福州迈新公司。

1.2.2观察指标及判定标准:采用免疫组化的方法检测患者食管癌组织中CD34和VEGF的蛋白表达情况。其中，VEGF和CD34的蛋白定位于细胞浆和/或包膜，以细胞内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，按阳性细胞的比例及显色强度综合评分。按照Kitadai[9]标准，其中，阴性：无着色，0分；弱阳性：浅黄色，1分；阳性：棕黄色，2分；强阳性：棕褐色，3分。当阳性细胞所占比例<25%为1分，25%<阳性细胞所占比例<50%为2分，阳性细胞所占比例>50%为3分。综上所述，两者得分乘积的积分>14分，为阳性，即高表达，其余为阴性，即低表达。MVD的计数采用Weidner[10]方法，首先在40倍光镜下寻找3个肿瘤MVD最高的区域，然后在200倍光镜下计数微血管的数目。

2 结 果

2.1不同组织中的CD34和VEGF表达情况比较:根据表2可知，与健康对照组相比，患病组内患者组织CD34和VEGF的表达阳性率均较高，组间进行χ2统计，P<0.05，差异有统计学意义。

表2 两组患者组织CD34和VEGF表达情况比较n(%)

表3 患者组织中的CD34和VEGF表达的相关性

2.2患者组织中的CD34和VEGF表达的相关性:由表3可知，食管癌组织中CD34的表达与VEGF的表达呈正相关(r=0.451，P<0.05)，差异有统计学意义。

2.3食管癌临床病理因素与MVD、VEGF表达的关系:由表4可知，食管癌组织中VEGF的表达和MDV数均与食管癌的细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况和临床TNM分期相关(P<0.05)，差异均有统计学意义。

2.4食管癌螺旋CT与MVD、VEGF表达的相关性:由表5可知，食管癌组织中VEGF的表达与螺旋CT强化幅度呈正相关(r=0.434，P<0.05)；根据表6可知，食管癌组织中的MVD与螺旋CT强化幅度也呈正相关(r=0.463，P<0.05)，差异均具有统计学意义。

表4 食管癌临床病理因素与MVD、VEGF表达的关系

表5 食管癌螺旋CT与VEGF表达的相关性

表6 食管癌螺旋CT与MVD的相关性

3 讨 论

食管癌是一种常见的消化道恶性肿瘤[1]，全世界范围内每年约有30万人死于食管癌。我国是食管癌的高发地区，其死亡率居我国常见恶性肿瘤的第四位[3]。食管癌具有病情发展迅速、转移性高、预后较差的特点[2]，因此对食管癌发病机制的研究，有效预防措施的探索以及治疗的方案开发具有重要意义[11]。食管癌患者的典型临床症状为进行性咽下困难，从干性食物咽下困难逐渐发展为半流质食物，最后是水和唾液的难以下咽[12]。

食管癌患者较低的预后和较高的致死率多与其有无淋巴结转移相关，研究发现，食管癌患者的5年生存率无淋巴结转移患者高达88%，而有淋巴结转移患者则为33%[13]。因此，采用有效的诊断方法来准确判断淋巴结转移对于食管癌患者的治疗及预后至关重要[14]。近年来诊断食管癌淋巴结转移又有了多种新的临床检查技术，如超声内镜(EUS)，胸腔镜检查，PET/CT等，但这些检查方法花费相对高，并且对受试者进行有创检查，难以广泛在临床应用[14]。因此，CT仍是判断淋巴结转移的首选检查方法[6]。

目前发现与肿瘤血管生成有关的因子中，VEGF的作用最强[15]。VEGF通过对血管内皮细胞的特异性作用，诱导血管形成[15]。癌细胞的生长、转移都需要依赖血管新生[15]，VEGF是临床癌症靶向治疗的研究热点[16]。研究表明，VEGF可以调节血管的发展[17]，一方面它直接刺激血管生成；另一方面又可通过促进微血管通透性，为血管内皮细胞的增殖、迁移及新血管的形成提供支架[15]。CD34为标记单个肿瘤血管内皮细胞的良好标记物[18]，重复性好，目前食管癌的肿瘤内微血管密度(MVD)的计数也采用CD34标记。有研究报道，MVD的数量与食管癌的分化程度、淋巴结转移情况及脉管浸润存在一定关联，因而MVD也可以作为食管癌生物学行为的一个检测指标[18]。

本研究结果显示，食管癌患者组织CD34和VEGF的表达阳性率均较高，且二者的表达呈正相关(P<0.05)；食管癌组织中VEGF和MDV均与食管癌的浸润深度、淋巴结转移情况、细胞分化程度和TNM分期相关(P<0.05)；食管癌组织中VEGF和MVD均与螺旋CT强化幅度呈正相关，差异均具有统计学意义。综上所述，食管癌组织中CD34和VEGF均呈高表达，并且与CT强化幅度呈正相关，联合检测CD34和VEGF的表达可以作为食管癌的侵袭转移和预后评估的重要指标。

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TheRelationshipbetweentheExpressionofCD34andVEGFandtheMagnitudeofCTEnhancementinEsophagealCarcinoma

XINGYuanyuan,ZHAOJiajia,CAOHongwei,etal

(TheAffiliatedHospitalofChengdeMedicalCollege,HebeiChengde067000,China)

Objective: To analyze the relationship between the expression of CD34 and VEGF and the enhancement of CT in esophageal carcinoma.MethodsThe organization of esophageal mucosa in 40 cases of esophageal carcinoma and 20 cases of healthy people were collected from our hospital, the expression of CD34 and VEGF protein were detected by immunohistochemistry in tissue, and the MVD was counted, measured CT scan cancer CT enhancement value, will be between the indexes and clinical stages of the tumor and its relation to statistics analysis.ResultCompared with healthy control group, the positive expression rate of CD34 and VEGF in esophageal carcinoma group were higher (P<0.05), and they were positively correlated in esophageal cancer tissues (r=0.451, P<0.05); The expression of VEGF and MDV in esophageal carcinoma were correlated with the degree of cell differentiation, depth of invasion, lymph node metastasis and clinical TNM stage (P<0.05); the expression of VEGF in esophageal cancer tissues (r=0.434, P<0.05) and MVD (r=0.463, P<0.05) with spiral CT enhancement was positively correlated, the differences were statistically significant.ConclusionCD34 and VEGF were highly expressed in esophageal cancer, and CD34, VEGF and CT enhancement in esophageal carcinoma are related, are important indicators of combined detection can be used as the invasion and metastasis of esophageal carcinoma and prognosis judgement.

Esophageal carcinoma; CD34; VEGF; MVD; CT enhancement

1006-6233(2017)11-1779-05

河北省科技指令性课题，(编号:12276104D-20)

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.11.006