2型糖尿病肾病患者血清Chemerin与SOD、MDA的临床分析

卢建文 银孟卓

广州市第一人民医院(广州 510180)

糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy，DN)是糖尿病患者微血管病变的严重并发症之一，也是糖尿病患者死亡原因之一[1]。其发病机理仍不完全明确，近年来一系列研究证明糖尿病患者体内氧化应激水平明显增高，肾脏作为氧化应激的靶器官之一，容易受到氧化应激的损伤，通过多种途径引起肾小球内高灌注、高滤过，肾脏细胞凋亡、破损，ECM代谢紊乱，RAS系统的激活、无菌性炎症反应等，加快了DN的发生发展[2-3]。趋化素(chemerin)是一种具有趋化作用的脂肪因子，被证实参与葡萄糖代谢及炎症反应[1]。本研究通过观察不同程度糖尿病肾病患者血清chemerin、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)浓度水平，探讨DN患者的chemerin、SOD、MDA的相互关系及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2016年8月—2017年12月门诊和住院诊断的患者。根据1999年WHO糖尿病的分型及诊断标准和Mogenson糖尿病肾病诊断分期标准。根据尿白蛋白/肌酐比(albumin to creatinine ratio，ACR)，把100例患者分成3个亚组：ACR<30 mg/g的为正常白蛋白尿组(normal albuminuria,NA)共33例；30 mg/g≤ACR<300 mg/g的为微量白蛋白尿组(micro albuminuria，MA),共34例，ACR≥300 mg/g的为大量蛋白尿组(macroalbuminuria，CA)，共33例。选择同期在我院进行体检的健康对照组(normal control group，NC)，共32例。研究对象均排除1型糖尿病、其他内分泌疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤及其他肾脏疾病；在1个月内未发生急性并发症及酮症酸中毒；近期未使用对肾脏有害的药物。本研究通过医院伦理委员会审核，所有入组者均签署知情同意书。

1.2 研究方法

四组研究对象均通过询问采集病程，测量身高、体质量、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)等基本信息。入选者空腹12小时后次日8点采集空腹静脉血4～5 mL，采用自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、血肌酐(Cr)、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)、谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT)。所有研究对象均留晨尿标本测尿白蛋白肌酐比值(ACR)，留取24小时尿行尿蛋白定量检测。SOD采用黄嘌呤氧化酶法测定， MDA采用硫代巴比妥酸法测定(试剂盒购自南京建成生物工程公司),chemerin采用ELISA法测定(试剂盒购自美国Millpore公司)。以上所有操作均在广州市第一人民医院检验科完成，操作均严格按照说明书执行。

1.3 统计学处理

所有数据均进行正态检验，计数资料以均数±标准差表示，非正态分布的计量资料用中位数及范围表示。多组间比较采用方差分析及q检验，计数资料间采用卡方检验，两因素间的相互关系采用直线相关分析，以r表示。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 四组间临床资料对比

NA组、MA组、CA组及NC组在性别构成、年龄、AST、ALT上无统计学差异(P>0.05)。病程在NA组、MA组、CA组间均有统计学差异(P<0.05)；FPG、HbA1C、CHOL、TG、LDL-C、HDL-C测值在NA组、MA组、CA组均高于NC组，差异有统计学差异(P<0.05)，但在NA组、MA组、CA组差异无统计学差异(P>0.05)。SBP数值在NA组与MA组差异无统计学差异(P>0.05),其余各组间均有统计学差异(P<0.05)。DBP、ACR、24HUA在NA组、MA组、CA组及NC组间两两比较均有统计学差异(P<0.05)。见表1：

表1NA组、MA组、CA组、NC组临床资料比较

与NC组比较，*P<0.05，**P<0.01；与NA组比较,#P<0.05，##P<0.01；与MA比较，△P<0.05，△△P<0.01。

2.2 NA组、MA组、CA组、NC组血清SOD、MDA的比较

NA组、MA组、CA组与NC组各组间血清SOD水平差异有统计学差异(F=41.05，P<0.001)，NA组、MA组 、CA组血清SOD水平低于NC组(P<0.05)，MA组血清SOD水平低于NA组(P<0.05)，CA组血清SOD水平低于MA组(P<0.05)。见表2：

NA组、MA组、CA组与NC组各组间血清MDA水平差异有统计学差异(F=51.78，P<0.001)，NA组血清MDA水平高于NC组(P<0.05)，MA组血清MDA水平高于NA组(P<0.05)，CA组血清MDA水平高于MA组(P<0.05)

表2NC组、NA组、MA组、CA组血清SOD(U/mL)、MDA(nmol/L)水平比较(x±s)

与NC组比较，*P<0.05，**P<0.01；与NA组比较，#P<0.05，##P<0.01；与MA比较，△P<0.05，△△P<0.01.

2.3 ACR及chemerin和SOD、MDA相关性分析

Pearson相关分析显示，ACR与血清SOD呈负相关(r=- 0.287,P=0.001),与MDA、chemerin呈正相关(r=0.199，0.63；P=0.03，0.02)；血清chemerin与SOD呈负相关(r=- 0.379,P=0.02)，与MDA呈正相关(r=0.562,P=0.01)。见表3：

表3ACR与SOD、MDA、chemerin的相关性

2.4 ACR与各项指标的多元性回归分析

以NA组、MA组、CA组的ACR的自然对数作为因变量，引入病程、FBS、HbA1c、肌酐、SOD、MDA、chemerin作自变量，进行多元线性回归分析。结果显示，病程、CHOL、HbA1c、chemerin是影响lnACR的主要因素。

lnACR=0.346×病程+0.179×CHOL+0.156×HbA1c+0.65×chemerin

3 讨 论

糖尿病肾病是糖尿病最严重的微血管并发症之一，在2型糖尿病患者中，约20%～40%最终将合并糖尿病肾病，糖尿病肾病最早期表现为尿白蛋白排泄率升高，最终逐渐发展至大量蛋白尿甚至肾功能衰竭[4]。2015年中国糖尿病肾病临床诊断专家共识认为ACR是筛查糖尿病肾病特异度和敏感度较好的指标[5]。

氧化应激在糖尿病肾病的发生发展扮演着重要角色。SOD是抗击体内活性氧的第一道防线，也是评价体内氧化应激的重要指标。目前研究认为，超氧阴离子自由基可直接损伤肾脏细胞中的膜性结构，造成不饱和脂肪酸的过氧化反应，引起细胞变性、溶解及死亡，SOD能促使超氧阴离子自由基发生歧化反应，阻断其对肾组织的损伤。MDA是前列腺素的代谢产物，具有很强的交联活性，能与蛋白质、核酸的游离氨基形成Schiff键，导致核酸、蛋白质功能降低。在糖尿病肾病的患者中，高血糖和高血脂会导致脂质的过氧化及自由基的增加，导致MDA的生成[6]。Xi Bao等[7]随访研究40名糖尿病及40名糖尿病肾病患者，发现糖尿病肾病患者SOD水平比糖尿病组明显降低，提示体内抗氧化能力的下降，可能在糖尿病肾病发生发展中起扮演重要的角色。国外也有研究表明，使用链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)诱导的糖尿病小鼠的MDA水平明显较健康对照组高[8]，提示氧化应激在糖尿病早期已然存在。

本研究结果显示，DM患者的SOD水平较CA组降低，并随着肾病进展而其下降幅度更加明显，NC组> NA组> MA组>CA组，组间均有统计学差异。而MDA的表达水平随着糖尿病肾病进展呈升高趋势，CA组>MA组>NA组>NC组，组间均有统计学差异。本次研究结果与国内外上述研究结果相符，随着DN的病程进展，MDA和SOD水平之间的呈负相关，体内的氧化和抗氧化能力的动态平衡被打破，这再次证实氧化应激在糖尿病肾病患者的发生起重要作用。

Chemerin是一个具有趋化性的分泌蛋白，近年来发现其为脂肪细胞脂质代谢调控的新型脂肪因子，不仅调节脂肪细胞胰岛素的敏感性，还可能参与糖尿病的发生发展[9]。国外最近研究发现，chemerin具有介导血管生成的功能，在糖尿病的微血管病变特别是糖尿病肾病中发挥重要作用[10]。

本研究结果显示，糖尿病患者的血清chemerin水平较对照组显著升高，并随着糖尿病肾病的进展而其上升趋势更明显。在相关性分析中，chemerin与ACR、MDA呈正相关，与SOD呈负相关。多元回归分析显示，chemerin是影响ACR的因素。结合其他研究指出的chemerin在糖尿病肾组织内高度表达，我们由此推测，chemerin的水平变化与糖尿病肾脏损害有密切的关系[10]。

综上所述，本研究结果显示，氧化应激在糖尿病肾病发生发展持续存在，其中可表现为SOD下降，MDA升高，早期测定SOD、MDA结合血清chemerin水平可以预测DN患者病情的严重程度。