青藏高原地区牦牛衣原体血清学调查

连漪，张丽鸿，李家奎,，童小乐，高兴，李脂幸，参木友，索朗斯珠

（1.华中农业大学，武汉 430070；2.西藏农牧学院，林芝 860000）

衣原体是一种革兰氏阴性的专性胞内病原体，可以感染人和多种动物。在牛身上能引发多种类型的病症，常见的症状类型有肺炎型、肠炎型、多关节炎型、脑脊髓炎型、结膜炎型、乳房炎型以及流产型[1]，其中衣原体性流产严重影响牛的繁殖育种[2]。牦牛作为青藏高原特色畜种，对当地的畜牧业经济发展具有举足轻重的作用，但长期以来，牦牛繁殖率低下制约了当地牦牛产业发展[3]。为了解青藏高原地区牦牛衣原体的流行状况，进行了2017～2018年牦牛衣原体流行病学调查，以期为青藏高原地区牦牛衣原体的检测及防治提供基本依据。

1 材料与方法

1.1 样本采集与处理

于青藏地区随机采集牦牛血清样本共1 074份，其中甘肃省甘南藏族自治州354份（2017年），西藏藏族自治区那曲县360份（2017年），青海省海北藏族自治州海晏县229份（2017年），青海省海北藏族自治州海晏县131份（2018年）。血清样本-20℃低温保存，检测前于室温解冻。

1.2 诊断试剂

牛衣原体抗体ELISA检测试剂盒，购于上海酶联生物科技有限公司。

1.3 试验方法

操作步骤按照试剂盒配套说明书进行。

1.4 判断标准

试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00，阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

临界值计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15。

阴性判断：样品OD值＜临界值。

阳性判断：样品OD值＞临界值。

1.5 结果分析

运用SPSS V21.0统计学软件对青藏地区牦牛衣原体血清阳性率数据进行卡方检验，P＜0.05表示差异显著。

2 结果

本次采集的1 074份牦牛血清样本中共检测出245份阳性样本，总阳性率为22.8%。其中西藏69份，甘肃71份，青海105份，阳性率分别为19.2%、20.1%和29.2%，并且三个省份的血清阳性率有显著差异（P＜0.05）。青海省2017年样本阳性检出率为28.4%，2018年为30.5%，阳性率有所上升，但差异不显著（P＞0.05）。检测结果如表1所示。

表1 青藏部分地区牦牛衣原体血清学检测结果

3 讨论

检测结果表明，西藏、甘肃和青海地区近年的牦牛衣原体阳性率分别为19.2%、20.1%和29.2%，三个地区之间的血清阳性率存在显著差异（P＜0.05）。说明三个地区牦牛均省衣原体感染，其中西藏地区的阳性率比其他两地偏低，甘肃省的阳性率相较于殷铭阳等[4]在2014年所测的阳性率（25.08%）有所下降。青海地区阳性率最高，并且2018年阳性率（30.5%）比2017年（28.4%）增长了2.1个百分点，但两年间的差异不显著（P＞0.05）。据蔡金山[3]调查显示，2014年青海省海晏县的牦牛衣原体阳性率为27.96%，因此2017～2018年青海省海晏县牦牛衣原体感染率仍有升高的趋势，但增势不明显。据郑杰等[5]的报道，往年青海地区的牦牛衣原体病检测多使用的方法是正向间接血凝试验（IHA），在本次调查中使用的是特异性与敏感性比IHA更高的ELISA检测法检测病原抗体[6,7]，因此血清阳性率较往年高与检测方法也有一定的关系。海晏县作为牦牛流产最严重的地区，衣原体阳性率明显高于全省平均水平（低于10%），其中2015年在海晏县流产牦牛群中检出衣原体抗体的几率高达88.89%[3]，说明青海省海晏地区的牦牛流产情况与牛衣原体密切相关，近两年仍有增长趋势，迫切需要加强防控力度。

衣原体自被发现以来，世界各地都报道了衣原体的存在，这表明衣原体在全球范围都有着不同程度的感染[8]。近年来，我国多个省市陆续报道了牛衣原体病的感染情况，数据显示我国牛衣原体病的流行情况不容乐观，被调查的省市中绝大部分都存在着牛衣原体感染，我国北方养牛业集中地区尤甚，其中青海、甘肃、宁夏等地区的感染率颇高[5]，推测可能与高原地区特殊的地理位置造就的环境有关。牛衣原体病无明显的季节性，四季均有可能发生，但以冬、春两季较频繁，当遇到寒流、降雨等气温骤变的天气时，该病发生率会显著上升[9]。高原地区环境恶劣，氧气稀薄，气温较低，畜牧生产条件落后，且藏民对牦牛衣原体病的防范意识薄弱，放牧方式粗犷，牦牛与藏羊经常混牧，衣原体可在牛羊之间相互传染[10]，这些都是导致青藏高原地区牦牛衣原体感染率高的重要因素。

防治牦牛衣原体病，须加强牛群的饲养管理，严格选择放牧的草场与水源，对发病牛做到及时筛选、隔离治疗以及淘汰，最重要的是要做好牛群的免疫工作[11]。目前我国已针对多种动物研制了多种衣原体疫苗，其中羊衣原体疫苗研究较多且应用广泛[12]。虽然已有牛衣原体的疫苗研制成功，但我国现阶段仍没有出台完整的牛衣原体病预防治疗政策和方案，该病没有引起养牛业足够的重视，也是我国牛衣原体感染普遍的原因之一[13]。2017年青海省动物疫病预防控制中心联合兰州兽医研究所研制了一种牦牛衣原体灭活疫苗，对牦牛衣原体疾病有良好的预防效果[14,15]，可以推广应用于生产实践中。

截至目前，我国尚无关于西藏地区牛衣原体病流行情况的调查，本次调查初次探究了西藏、甘肃、青海 三个地区牦牛衣原体病的感染状况，为进一步制定有效的牦牛衣原体病防治计划提供依据，以期促进我国牦牛衣原体疾病的防治进程。