不同过瘤胃氯化胆碱对围产期荷斯坦牛酮病发病率的影响

张成喜, 王清新，刘艳花，李书勋，郭建华，秦伟，张小东

（1.青岛润博特生物科技有限公司，青岛 266331；2.胶州市畜牧兽医局，青岛 266300；

3.浙江农林大学，临安 311300）

奶牛围产期是一个比较特殊的阶段，该阶段奶牛体质较弱，免疫力低下，易患各种代谢疾病。围产前期如果奶牛采食大量精料，很容易导致肥胖；围产后期由于产犊应激和体内激素水平的变化，干物质采食量较低，但是产奶量上升比较快，机体处于能量负平衡状态，容易导致碳水化合物和挥发性脂肪酸代谢障碍，使血液中的乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮等蓄积，最终导致酮病的发生[1]。胆碱是合成磷脂酰胆碱的重要组成部分，而磷脂酰胆碱又是合成极低密度脂蛋白（VLDL）的重要原料，VLDL可以从肝细胞中向外运输甘油三酯[2]，提高肝脏清除甘油三酯的能力，改善肝脏糖异生的作用，提高肝糖原的浓度，降低非酯化脂肪酸的浓度，进而缓解奶牛机体的能量负平衡，改善奶牛的健康状况。有研究者在围产期奶牛饲粮中添加过瘤胃胆碱，发现能够改善机体脂肪代谢，促进机体糖异生，缓解围产期和泌乳早期奶牛能量负平衡[3,4]。目前，过瘤胃氯化胆碱在奶牛方面的研究主要集中在提高生产性能方面，其对围产期奶牛酮病发病率影响的研究却鲜有报道。本试验拟在围产期奶牛饲粮中添加不同过瘤胃氯化胆碱产品，通过比较不同过瘤胃氯化胆碱产品的吸潮率、溶出度，及其对奶牛酮病发病率的影响，为过瘤胃氯化胆碱在奶牛生产中的广泛应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 过瘤胃氯化胆碱产品

产品A购自美国某公司，产品B购自广东某公司，产品C（诺瑞康，购自青岛润博特生物科技有限公司）。产品A中胆碱含量≥30%，水分≤10%；产品B中胆碱含量≥23%，水分≤5%；诺瑞康中胆碱含量≥25%，水分≤8%。

1.2 试验设计

选取内蒙古某牧场预产期相近的健康荷斯坦牛150头，随机分为3组，每组50头。试验1组、2组、3组分别饲喂50g/（头·d）产品A、B、C。试验期为产前15d～产后30d，其中预试期15d，正试期30d。试验牛采食后可以在运动场自由饮水和运动，按照常规进行管理。饲粮组成及营养水平见表1。

表1 饲粮组成及营养水平（干物质基础）

1.3 试样采集与测定

1.3.1 饲料样

采用四分法收集全混合日粮（TMR）饲料样，并于恒温干燥箱65℃烘干制成风干样。采用GB/T6435-2006测定水分含量，计算TMR干物质含量；采用凯氏定氮法（GB/T6432-1994）测定粗蛋白含量；采用GB/T20806-2006测定中性洗涤纤维含量；采用NY/T1459-2007测定酸性洗涤纤维的含量；采用高锰酸钾滴定法（GB/T6436-2002）测定钙含量；采用分光光度法（GB/T6437-2002）测定磷含量。

1.3.2 吸潮率

将产品A、B、C置于29℃和相对湿度58%条件下，分别在第1、2、4、6天测定3种过瘤胃氯化胆碱的吸潮率。

1.3.3 溶出度

参照饲料添加剂氯化胆碱国家标准（GB34462-2017），测定产品溶出度。

1.3.4 奶牛体况评定

分别在预试期第1 天和正试期第3 0 天， 依据Edmonson等[6]和Wildman等[7]的奶牛体况评分标准，通过视觉评价和触摸（短肋、腰背和尻部等部位）相结合的方式，对试验牛体况进行评分。对大于3.5分的试验牛判定为不合格。

1.3.5 血液中β-羟丁酸含量

分别在预试期第1天和正试期第15天尾静脉采集试验牛血样，晨饲前尾静脉采血10mL/头，2000×g离心15min后取上层血清，-20℃冷冻保存。使用β-羟丁酸试剂盒（艾美捷科技有限公司产品）检测血液中β-羟丁酸的含量。

酮病判定标准参考NY/T 3191-2018，血液中β-羟丁酸含量低于1.2mmol/L为健康牛，在1.2～1.6mmol/L之间为亚临床型酮病；β-羟丁酸含量大于1.6mmol/L、血糖含量在2.8mmol/L以下，为临床型酮病。

1.4 数据处理

使用Excel 2016软件对试验数据进行初步处理，使用SPSS 24.0软件进行卡方检验，分析显著性，以P＜0.05表示差异显著，P＞0.05表示差异不显著。

2 结果与分析

2.1 不同过瘤胃氯化胆碱产品吸潮率比较

由表2可知，来自不同厂家的过瘤胃氯化胆碱在空气中放置6d后，产品A、产品B和诺瑞康的吸潮率分别为4.14%、4.35%和1.47%，其中以诺瑞康的吸潮率最低。

表2 不同过瘤胃氯化胆碱产品吸潮率比较

2.2 不同过瘤胃氯化胆碱产品溶出度比较

由表3可知，产品A、产品B和诺瑞康的平均溶出度分别为10.18%、79.02%和5.51%，以诺瑞康的溶出度最低，包被效果最好。

表3 不同过瘤胃氯化胆碱产品溶出度比较

2.3 不同过瘤胃氯化胆碱产品对奶牛体况的影响

由表4可知，围产后期给奶牛饲喂过瘤胃氯化胆碱，产后30d时三组奶牛体况不合格率为22%、44%、16%，其中试验2组显著高于试验前（P＜0.05），试验1、3组体况不合格率与试验前相比均无显著差异（P＞0.05），但是以试验3组增长幅度最小。

表4 奶牛体况不合格率

2.4 不同过瘤胃氯化胆碱产品对围产后期奶牛酮病发病率的影响

正试期饲喂过瘤胃氯化胆碱2周后，试验1、2、3组临床型酮病发病率由试验前的20%、0、18%变为14%、25%、10%；3个试验组的亚临床型酮病发病率由试验前的12%、16%、16%变为8%、26%、8%。试验2组临床型酮病发病率显著高于试验前（P＜0.05）；亚临床酮病发病率也呈上升趋势，但未达显著水平。试验1、3组的临床、亚临床型酮病发病率与试验前相比均呈下降趋势，但差异均未达显著水平，其中试验3组的降幅较大，详见表5、表6。

表5 围产后期奶牛临床型酮病发病率

表6 围产后期奶牛亚临床型酮病发病率

3 讨论

奶牛在围产前期时胎儿生长发育的速度明显加快，而在围产后期又需要合成大量的乳汁，以至于整个围产期奶牛机体对能量的需要大幅度增加。一般情况下，奶牛在分娩后4～6周达到泌乳高峰，但是干物质采食量（DMI）需要在产后8～10周才能恢复到正常水平。因此，奶牛产后DMI并不能满足机体能量的需要，对于高产奶牛而言更会加重机体能量负平衡状态，最终导致酮病的发生[8]。奶牛为了满足自身能量的需要就会过量地动用体脂，导致血清中游离脂肪酸的浓度增加（可增加5～10倍）[9]。Drackley等[10]研究表明，游离脂肪酸在母牛产犊前后代谢水平达到高峰，在24h内约有525g游离脂肪酸酯化沉淀，增加的脂肪沉积量相当于肝脏重量的6.6%。因此，机体代谢所产生的羟基丁酸、非酯化脂肪酸和丙酮等，如果不能被及时运输而在肝脏中蓄积，容易引起奶牛脂肪肝和酮病的发生，这不仅会造成机体代谢紊乱，还会影响奶牛的生产性能和繁殖性能等。胆碱是合成磷脂酰胆碱的重要组成部分，而磷脂酰胆碱又是合成极低密度脂蛋白（VLDL）的重要原料，VLDL可以从肝细胞中向外运输甘油三酯[2]，提高肝脏清除甘油三酯的能力，改善肝脏糖异生的作用，提高肝糖原的浓度，降低非酯化脂肪酸的浓度，进而缓解奶牛机体的能量负平衡，改善奶牛的健康状况。

反刍动物所需要的胆碱主要来源于两个方面，一方面来自于饲粮植物细胞膜中的磷脂酰胆碱（卵磷脂）和部分游离的胆碱；另一方面，反刍动物可以利用自身的甲基化途径来合成胆碱，但是自身合成的胆碱只能够满足低产奶牛的需要[11]。如果直接在饲粮中添加胆碱，80%以上的胆碱会在1h之内被瘤胃微生物降解掉[12]，因此需要在饲粮中额外添加过瘤胃氯化胆碱，来满足高产奶牛泌乳的需要。过瘤胃氯化胆碱的溶出度和吸潮率，直接关系到产品的包被效果和保存时间，溶出度越低包被效果越好，吸潮率越低越容易保存。在本试验条件下，诺瑞康的吸潮率和溶出度均最低，说明其包被效果最好。β-羟丁酸含量在酮体中所占比例最大，约占酮体总量的70%，其含量高低在很大程度上可以反映机体酮体水平的高低。Whitaker等[13]认为可以用游离脂肪酸和β-羟丁酸来反映奶牛机体的能量平衡状态，游离脂肪酸的浓度可以用来反映机体脂肪的动员状态，β-羟丁酸的含量可用于判断奶牛是否发生酮病。郑家三等[4]研究过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能和能量代谢的影响时指出，在饲粮中添加过瘤胃胆碱后能显著延缓血浆中葡萄糖水平的下降，显著降低试验牛血浆中β-羟丁酸、游离脂肪酸和总胆固醇的含量，有提高血浆中胰岛素和胰高血糖素含量的趋势，这说明奶牛饲粮中添加过瘤胃胆碱后能够改善体内的脂肪代谢，促进奶牛机体糖异生作用，缓解围产期和泌乳早期奶牛能量负平衡状态。Lima等[14]研究发现，从产前25d～产后80d给试验牛饲喂15g/（头·d）过瘤胃胆碱，可以减少临床型酮病和乳房炎的发病率。刘翔等[15]报道，饲粮中添加20和30g/（头·d）过瘤胃胆碱能够显著或极显著降低血浆中β-羟丁酸、非酯化脂肪酸和总胆固醇的浓度。在本试验饲粮中添加产品A和诺瑞康后，均降低了试验牛临床型、亚临床型酮病的发病率，使用效果较好，与上述研究结果一致。

4 结论

在本试验条件下，饲粮中添加过瘤胃氯化胆碱后，可以明显降低围产期奶牛临床型、亚临床型酮病的发病率，综合考虑吸潮率、溶出度和酮病发病率指标，以诺瑞康的使用效果最好。