黑锡丹的本草考证、炮制工艺及9种无机元素的含量测定*

★ 姜军华 袁桂平* 袁恒怿（1.江西省药品检验检测研究院/江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心 南昌 33009；.南昌大学附属中学 南昌 330047）

黑锡丹（heixidan，HXD）又名局方黑锡丹或二味黑锡丹［1-2］，始载于公元1132年许叔微《普济本事方》［3-4］，后收载《江西省中药炮制规范》［5］1991年版和《卫生部药品标准》［6］（中药成方制剂第13册），是江西急救药参茸黑锡丸等主要原料，具有镇纳元气、回阳救厥、止喘降逆、止痛固涩，用于治疗卒中风、真阳暴脱、四肢厥冷、大汗不止、气喘痰鸣、阴寒厥逆、猝然昏倒、头痛眩晕、腹中冷痛、精液滑泄、赤白带下等症。

黑锡丹中药饮片在江西、四川、湖南和两广等地使用历史悠久，属樟帮特色中药饮片和独特炮制工艺，在《江西省中药炮制规范》1991年版和《卫生部药品标准》（中药成方制剂第13册）中已有收载，未进行炮制工艺技术参数和质量规范化研究；同时，黑锡丹中药饮片炮制组分中黑锡为铅还是锡，另组分制硫黄为豆腐制，在实际炮制生产中常混淆，引起较大争议，导致产品安全性和临床疗效难以保证。因此，课题组为确证黑锡丹饮片的炮制组分黑锡为铅还是锡，另组分制硫黄为豆腐制，进行了黑锡丹中药饮片的本草考证和炮制工艺研究，并对其所含51V、55Mn等9种无机元素分布情况进行考察和测定，为研究黑锡丹饮片炮制机理和建立其质量控制标准提供依据。

1 本草考证

1.1 历代本草考证 南《本草经集注》［3］陶弘景曰：“即今化铅所作胡粉也，而谓之粉锡，以与今乖。”

宋《普济本事方》述：“黑铅、硫黄各三两，谓如硫黄与黑铅各用三两，即以黑铅约八两，铫内（熔）化去滓，萓净尽倾净地上，再于铫内（熔），以皮纸五重，撮四角如箱模样，倾黑铅在内，柔取细者于绢上罗过，大抵即损绢，须连纸放地上，令稍温，纸焦易之，下者居上，将粗铅再（熔）再揉再罗，取细者尽为度，称重三两，即以好硫黄三两研细拌铅砂令匀，于铫内用铁匙不住搅，须文武火不紧不漫，俟相乳入，倾在净（砖）上。”

宋《太平惠民和剂局方》［3］：“黑铅（铅水银）：烧十遍与水银结砂子，分为小块，同甘草十两，水煮半日，候冷取出研用。黑铅：凡使，先以铁铫炭火（熔）开，取出泻于新瓦上、滤去渣脚，如此一两番、取净铅秤用。”

宋《校注妇人良方》：“黑锡：去灰。”

明《外科正宗》：“黑铅：铁杓化开，倾入水中取起再化，如此百偏，以铅尽为度，去水澄下者。”

明《景岳全书》：“黑锡：1.（熔）净。2.去滓，炒末。黑铅：水银煎。”

明《证治准绳》：“黒锡：去滓净，称与水银结砂子。”

明《炮炙大法》：“铅丹：即黄丹也，生铅一味火煅研成细末，水飞过用。今货者多以盐消砂石杂之。凡用以水漂去消盐，飞去砂石，澄干，微火炒紫色，地上去火毒入药。”

明《本草纲目》李时珍曰：“铅锡一类也，古人名铅为黑锡，故名粉锡”“铅丹：（1）飞炒。—孙氏集效方；（2）按独孤滔丹房鉴源云，炒铅丹法：用铅一斤，土硫黄十两，消石一两，鎔铅成汁，下醋点之，滚沸时，下硫一块，少顷下消少许，沸定再点醋，依前下少许消黄，待为末，则成丹矣。今人以作铅粉不尽者，用消石、矾石炒成丹，若转丹为铅，只用连须葱白汁拌丹慢煎，煅成金汁，倾出即还铅矣。货者多以盐消砂石杂之，凡用以水漂去消盐，飞去砂石，澄干，微火炒紫色，地上去火毒，入药。会典云：黑铅一斤，烧丹一斤五钱三分也。”

明《秘传证治要诀及类方》：“黒锡：（二两）鎔化，与硫黄（二两）结成子。”

明《医学入门》：“铅丹：炒黄丹法，黑铅一斤，土硫黄、硝石各一两，先溶铅成汁，下醋点之，滚沸时下黄一小块，续下硝少许，沸定再点醋，依前下少许硝黄，已消沸定，黄亦尽，炒为末，成丹矣。入药又炒令色变，细研水飞二遍。”

明《医学纲目》：“锡：同水银炒成砂子。黑铅：同水银炒，结沙。”

明《普济方》：“黑锡：先鎔成汁，一丸，上漉去滓，再鎔再漉，三次取净称。黄丹：炒红色，放下再紫色者为度。铅粉：炒黑，细研。铅丹：炒紫色。”

清《类证治载》：“黑铅二两、硫磺二两，将锡溶化入硫磺，候结成片，倾地上出火毒，研至无声为度（黑铅丹）。”

清《修事指南》：“制铅：李时珍曰：凡使铅，需以铁銚溶化，泻瓦上滤去渣脚，如此数次，然后收用其黑锡灰，则以铅沙取取黑灰，白锡灰不入药。”

清《本草崇原》：“黑锡：去滓。”

清《本草必用》：“黑铅：入丸药用，铁銚内溶化，去滓脚用。”

清《嵩崖尊生全书》：“黑铅：一钱五分，下锅内，再下水银二钱，结成砂子。”

清《本草述》：“黑锡：去滓。黑锡：炒灰埋地中五日。”

清《本草崇原》：“黑锡：去滓。”

清《本草汇》：“黑锡（铅）：溶化，滤去渣脚数次”［3］。

通过考证历代主流本草著作，显示古代临床使用黑锡就是铅，炼制成丹药。黑锡丹中药饮片炮制组分中黑锡也为铅，而非锡。

1.2 现代考证 《矿物药与丹药》［2］记载：“原料：黑铅二两，硫黄二两；制炼：将铅放在锅内，置在生好炭火的炉上，加热至300℃使铅完全熔化，把硫黄徐徐加入，并用铁铲不断搅拌，使其混合。并应用米醋喷泼下去，火焰即熄，再起再泼。这样边烧、边搅、边泼，一直炼至锅内硫黄和铅完全化合，结成沙状、捏之即碎时即可取出，待冷研成极细末，用米糊做基质，制成药丸如梧桐子大。”

《江西省中药炮制规范》（1991年版）［5］：“来源为碱式碳酸铅［2PbCO8·Pb（OH）2］的粉末。药材以色白细腻、无杂质者为佳。炮制方法为取原药，研成细粉。”

《对黑锡丹中“黑锡”的探讨》［1］孙国安：“黑锡一药， 实际上就是铅的别名，《本草纲目》早已明确阐明：‘铅易沿流， 故谓之铅锡为白锡， 故此为黑锡。’ 所以，对黑锡丹中所用的黑锡， 当即是铅毋庸疑议。”

《樟树药帮中药传统炮制法经验集成及饮片图鉴》［7］范崔生：“炒黑锡：取净铅条或块，置于干净的铁锅内，加热使铅熔化成熔融状态；一人持装有豆腐制硫黄细粉的长柄铁勺，往锅内徐徐分3批加入等量的豆腐制硫黄细粉，另一人用长柄铁铲在锅内不停地搅拌与翻动，直到锅内过量的硫黄散失、黄烟逐渐减少、药物呈均匀灰蓝色或砂粒状”。

现代文献考证也显示：黑锡就是铅，黑锡丹中药饮片炮制组分中黑锡也为铅，与制硫黄共同炮制而成。下一步课题组将从黑锡丹中药饮片炮制离子价态和化合物来测定铅和锡中Pb和Sn两者差异，来研究黑锡丹的炮制组分、机理和安全性，为临床急救药提供科学数据。

2 黑锡丹炮制工艺研究

2.1 炮制组分准备 称取一份铅和一份锡，一份制硫黄和半份制硫黄（制硫黄采取樟帮传统的豆腐制法，将硫黄与豆腐同煮至豆腐显黑绿色、浮起、具巢眼，即得）。

2.2 炮制工艺确定 取一份铅和一份锡，分别与一份制硫黄和半份制硫黄在特制的炼制炉具上进行组合逐一对比加热炮制，待黄色烟雾散净，无呛鼻，停止加热，出锅放冷，检查成品外观性状和手感情况，结果：一份铅和一份制硫黄炮制产品经樟帮传统炮制老师傅判定，非常符合传统和临床的质量要求，最后炮制工艺结合本草考证和老师傅实际炮制，确定为称取一份铅和一份制硫黄，在特制的炼制炉具上不断加热炮制，至黄色烟雾散净，无呛鼻，产品呈灵活状态，即得。

2.3 研制样品生产 取锡或铅各1kg，分别与制硫黄1kg，加热炮制，至产品呈灵活状态，符合要求，即得科研产品。6批科研产品：锡1kg与制硫黄1kg炮制样品，批号分别为20160708-1、20160708-2、20160708-3；铅1kg与制硫黄1kg炮制样品，批号分别为20160801-1、20160801-2、20160801-3。样品形态见图1。

图1 样品形态

3 无机元素的含量测定

3.1 测定仪器与材料 电感耦合等离子体质谱仪（Agilent7700，美国Agilent公司），微波消解仪（Mars6 Classic，美国CEM 公司）。超纯水仪（Mill-Q，美国 Millipore公司）Sartorius BT 25S、BSA124S-CW电子天平（德国Sartorius公司）。ICP-MS Internal Std Mix（含 Bi、Ge、In、Rh、Sc、Tb浓度为100μg/mL）（美国安捷伦科技股份有限公司），Initial Caliration Verification Standard（含51V、55Mn、59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se、111Cd等元素，浓度均为10μg/mL Lot2-24MKBY2）（美国安捷伦科技股份有限公司），硝酸：fluka（Lot：BCBQ9345V），超纯水。

3.2 方法与结果 本实验采用微波消解法，ICPMS测定黑锡丹中药饮片样品中51V、55Mn等9种无机元素含量［8-11］。

3.2.1 实验条件 仪器工作条件 射频功率：1600W；S/C温度：2℃；碰撞气：氦气；载气：氩气；载气流量：0.79L/min；积分时间：0.3s；等离子气流量：15L/min；采样锥孔径：1.0mm；截取锥孔径：0.4mm；采样深度：7.8mm；数据采集重复次数3次。

微波消解程序 消解功率为：1400W，25min内由室温升温至190℃，保持25min。

3.2.2 溶液的制备 混合内标工作溶液制备 精密量取1mL混合内标溶液，置100mL量瓶中，用2%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1μg/mL的混合内标工作溶液。

标准曲线的制备 精密量取5mL混合对照溶液，置50mL量瓶中，用2%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1μg/mL的混合对照储备溶液。精密量取混合对照储备溶液0.16，0.32，0.48，0.8，2.4，4.8，10.0mL，分别置100mL量瓶中，用2%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得对照品浓度为1.6、3.2、4.8、8、24、48、100μg/L混合标准工作溶液。

供试品溶液的制备 取HXD样品约0.1g，精密称定，至聚四氟乙烯微波消解罐中，精密加入硝酸7mL，盖好内盖，旋紧外套，浸泡过夜（14h），置于微波消解仪中，按2.3.1”项下微波消解程序进行消解，放冷，120℃赶酸仪中加热至红棕色蒸气挥尽，放冷，用水转移至50mL塑料量瓶并用水稀释至刻度，摇匀，即得。另取相同体积的硝酸，同法制成样品空白溶液。

内标元素的选择 选取各元素合适的同位素质量数，其中51V、55Mn以45Sc作为内标，59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se以72Ge作 为 内 标，111Cd以115In作为内标。

3.2.3 方法学考察 线性关系考察 取“3.2.2”项下的混合对照溶液，按“3.2.1”项下ICP-MS条件进行测定，内标进样管始终插入混合内标溶液中，以混合对照溶液质量浓度为横坐标（X），以待测元素响应值与对应的内标元素响应值的比值为纵坐标（Y），绘制标准回归方程，结果见表1。

检测限考察 取“3.2.2”项下空白对照溶液适量，按“3.2.1”项下ICP-MS条件重复进样测定11次，记录仪器响应值并计算其标准偏差，以3倍标准偏差对应的各待测元素质量浓度作为检测限，结果见表1。

表1 9种待测元素的线性回归方程、检出限

精密度试验 取“3.2.2”项下混合标准溶液（浓度均为 48μg/L），按“3.2.1”项下 ICP-MS条件连续进样测定6次，记录仪器响应值。结果51V、55Mn、59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se、111Cd各元素的 RSD 分别为 0.76，0.90，1.53，2.20，1.95，1.37，1.19，3.37，0.83%（n=6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验 取HXD样品（20160708-1）溶液，室温放置，每隔一定时间（0、2、4、8、12h）进样测定，记录仪器响应值，结果51V、55Mn、59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se、111Cd 各元素的 RSD 分别为 0.82，1.32，1.73，2.41，1.78，1.57，1.65，3.21，0.97%（n=5），表明供试品溶液在12h内稳定性良好。

重复性试验 取HXD样品（20160708-1）约0.1g，精密称定，共6份，按“3.2.2”项下方法平行制备供试品溶液，测定，计算，结果各元素重复性RSD（n=6）分别为 0.69，1.89，2.20，1.73，1.42，1.13，1.23，1.23，1.74%，表明本方法重复性良好。

回收率试验 取HXD样品（20160708-1）约0.05 g，共6份，精密称定，精密加入硝酸7ml，分别精密加入浓度为10μg/mL混合对照溶液0.2mL，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，测定，计算 回 收 率，结 果51V、55Mn、59Co、60Ni、63Cu、66Zn、75As、82Se、111Cd各元素的平均回收率分别为 93.93，84.27，106.64，105.69，106.71，90.72，86.80，83.73，93.99%。

3.2.4 样品中51V、55Mn等9种无机元素的测定 取6批HXD样品，按“3.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“3.2.1”项下ICP-MS条件进行测定样品中9种无机元素，结果见表2。

表2 样品中9种无机元素的测定结果（μg·g-1，n=2）

4 小结与讨论

通过对黑锡丹中药饮片的历代主流本草著作和现代研究考证，厘清了历代本草中黑锡就是铅，铅的别名，而非锡；同时铅可内服，一般用量0.9～1.5g，或外用适量，干撒或调敷患处；而锡有毒，不能内服，仅外用，并避免用酒浸泡。进一步确证了黑锡丹中药饮片炮制组分中黑锡实为铅，与制硫黄加热炮制是符合历史记载，正本清源，纠正了错误。

通过对黑锡丹中药饮片采取原料铅与制硫黄和原料锡与制硫黄两种组分的样品炮制工艺比较研究，结果表明采用原料铅与制硫黄组分生产的成品外观性状和手感，非常符合传统和临床的质量要求，确保产品安全和临床有效。

采用ICP-MS法测定黑锡丹中药饮片6批样品中51V、55Mn等9种无机元素含量研究，9种无机元素在各自范围内线性关系良好（r> 0.9900），平均回收率83.73%～106.71%；不同批次间所含元素种类无明显差异，但含量有一定差异，但无显著性差别。

建立了黑锡丹中药饮片中51V、55Mn等9种无机元素的测定方法，测定的元素包含微量元素和重金属及有害元素，方法简便易操作，灵敏度高，准确性高，为进一步研究规范黑锡丹饮片炮制工艺和控制产品质量提供科学依据。同时，测定的51V、55Mn等9种无机元素含量结果显示：锡原料黑锡丹的51V、63Cu、75As、82Se和111Cd的量明显高于铅原料的黑锡丹，说明黑锡丹中药饮片炮制组分中黑锡用铅与制硫黄加热炮制是可行的，更印证了古籍对黑锡丹原料的记载。

因课题注重传承研究，黑锡丹仍采用传统的炮制方法，以老药工师傅的经验来把控产品质量，其中炮制的加热时间、混合两种原料的时间、次数、加热温度等未进行研究，下一步将与老药工师傅共同对黑锡丹炮制的加热时间、混合两种原料的时间、次数、加热温度等进行深入探讨和摸索，以期达到更好地控制黑锡丹炮制技术、规范炮制工艺、细化各项炮制参数，以使黑锡丹炮制更具有工艺重复性和质量可控性。

黑锡丹属矿物类中药饮片，其含总Pb量较大。为科学客观表征中药传统炮制特色，剖析黑锡丹炮制机理，下一步将从离子价态和化合物来测定铅和锡中Pb和Sn两者差异。