860例女性高危型HPV 感染结果分析

郑婷，韩迎莉，陶玉梅，赵佩瑶，邹梦琦，谢田田，王靖

（河南大学第一附属医院，河南 开封）

0 引言

子宫颈癌（Cervical cancer,CC）是危害全球女性健康最常见的生殖系统恶性肿瘤，具有多阶段、多因素、长期性以及全球分布等特点，多基因相互作用及生物学因素是引起宫颈癌的重要原因。研究表明高危型人乳头状瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPV）持续感染在宫颈癌和宫颈癌前病变的发生发展过程中发挥着极为重要的作用[1,2]。人体感染HR-HPV 后，病毒基因整合进人基因组，E6 和E7 癌基因蛋白异常表达可以引发宫颈癌的发生。国际癌症研究署（International Agency for Research onCancer，IARC）调查数据显示，宫颈癌是女性第四大恶性肿瘤，2018年全球子宫颈癌新发病例约57 万，死亡31 万；另有报道发现宫颈癌发病率与国家经济发展水平具有相关性，在经济不发达国家中，其发病率仅次于乳腺癌，居第二位，死亡率位于第一位[3,4]。在我国，近年来由于人们生活方式和环境等的影响，宫颈癌发病率和死亡率均呈上升趋势，发病率由1988年5.04/10 万上升到2015年16.56/10 万，死亡率由1.71/10 万上升到3.29/10万[5,6]。宫颈癌如此高的发病率，为了控制其不断增长的形势，需要加强宣传宫颈癌相关知识和扩大宫颈癌筛查，确保宫颈癌在全球范围内被高度重视。虽然宫颈癌患病情况严峻，但是却是目前唯一病因明确的癌症，因此，可以通过早期快速、准确的筛查女性宫颈HR-HPV 感染情况从而对宫颈癌进行彻底防治[4]。本研究通过对860例女性进行HR-HPV 检测，分析HR-HPV 的感染情况,为宫颈癌的诊断预防提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年3月至2019年11月于河南大学第一附属医院就诊的女性患者宫颈脱落细胞标本，共860例(年龄16岁-95岁，去除重复住院及复诊病例)，分别来自于妇产科门诊（315例）、皮肤科（237例）、健康体检中心（214例）及住院病房（94例），进行15 种高危型人乳头瘤病毒（HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/53/56/58/59/66/68）基 因分型检测。分析HR-HPV 的感染情况、基因亚型分布特征、不同年龄段的阳性感染率及在妇产科门诊、皮肤科、健康体检中心和住院病房女性中的感染情况。本研究已经获得患者及家属同意且已签署知情同意书，并且所有标本获得河南大学第一附属医院医学伦理研究委员会批准通过，批准文号为伦理L2019-539。

1.2 方法

1.2.1 样本采集

采集宫颈脱落细胞前，要求受检者处于非月经期，48小时内不应有性行为，检查3 天内禁止进行阴道冲洗或使用避孕药膏等阴道内用药。使用一次性宫颈细胞采集器(潮州凯普生物化学有限公司生产)进行样本采集，对于妇女宫颈可疑感染患者，采集宫颈口脱落细胞。采集前先清理干净宫颈口的分泌物，用宫颈刷轻轻搓动使其顺时针旋转3-4 圈，然后慢慢取出将其放入装有细胞保存液的无菌样本管中，密闭立即送检。

1.2.2 高危型HPV分型检测试剂和仪器

采用湖南圣湘生物科技有限公司提供的15 种HRHPV 核酸检测试剂盒及ABI 7500 荧光定量PCR 检测仪，严格按照试剂说明书进行试剂准备、加样、扩增及结果判读，用于体外定性检测女性宫颈脱落上皮细胞样本中的15种HR-HPV 的核酸DNA，最低检测限为1000 copies/mL。

1.3 统计学处理

采用SPSS 24.0 软件对数据进行统计分析，计数资料以例数（n）或百分率(%)表示, 组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄段HR-HPV 阳性感染率

在860例 筛 查 样 本 中，HR-HPV 阳 性 感 染 率19.88%（171/860）。按年龄将受检者分为7 组，在HR-HPV感染的各年龄组中，呈现两个年龄高峰期，分别为≤20岁阳性率34.09%（15/44）和41～50岁阳性率29.72%（85/286），51～60岁年 龄 段 阳 性 率 最 低11.76%（14/119），其 余 各年 龄 段 的 感 染 情 况：21～30岁14.18%(19/134）、31～40岁13.82%(30/217）、61～70岁12.5%(6/48） 及 ≥71岁16.66%(2/12），不同年龄段女性HR-HPV 感染率比较差异有统计学意义(χ2=35.733，P＜0.05)，检测结果详见表1。

表1 高危型HPV 感染在不同年龄组的分布

2.2 HR-HPV 各基因亚型感染情况

本研究中，HR-HPV 基因亚型感染前5 位为HPV52(6.05%)、HPV16 (5.0%)、HPV53 (3.84%)、HPV58 (2.33%)、HPV51 (1.98%)，HPV18 型感染率较低（0.81%）； HPV16型单一感染率为2.44%(21/860)；HPV18 型单一感染率为0.23%(2/860)， HPV16 及HPV18 型双重感染率为0.35%(3/860)，不同HR-HPV 基因亚型感染率比较差异有统计学意义(χ2=178.121，P＜0.05)，检测结果详见表2。

表2 高危型HPV 各基因亚型感染情况

2.3 HR-HPV 感染类型的阳性率及构成比

根据感染HR-HPV 亚型的数量将860例受检女性分为四组，分别是单一型别感染率13.14% (113/860)，双重型别感染率5.17% (44/860)，三重型别感染率0.93%(8/860)，四重及以上型别感染率0.70% (6/860)，其中单一型别感染率最高，且感染HR-HPV 不同亚型数量阳性率比较差异有统计学意义(χ2=184.846，P＜0.05)，检测结果详见表3。

表3 感染不同数量高危型HPV 亚型的阳性率及构成比

2.4 不同科室HR-HPV 感染情况分析

通过不同科室HR-HPV 感染情况分析，发现妇产科门诊感染率25.40%（80/315），皮肤科感染率28.27%（67/237），健康体检中心感染率为8.41%（18/214），住院病房感染率为6.38%（6/94），妇产科门诊和皮肤科感染率较高，不同科室比较差异有统计学意义（χ2=44.910，P＜0.05），检测结果详见表4。

表4 不同科室高危型HPV 感染分布情况

3 讨论

流行病学调查发现宫颈癌患者中高达99.7%的人合并有HPV 感染,绝大多数为高危型，少部分为低危型，也有两种型别混合感染，其中HR-HPV 持续感染（尤其是HPV16/18 型）与宫颈癌的发生发展密切相关。HPV 主要通过性行为传播，绝大多数女性感染人乳头瘤病毒为一过性，无明显的临床症状体征，且能被自身免疫系统清除，只有少部分人HPV 呈持续感染，若感染时间超过10-20年，可发展为癌前病变或癌[7,8]。研究表明我国女性HR-HPV感染率为16.8%，＜25岁和41～45岁感染率最高，常见的HR-HPV 型别（感染率）为HPV52（2.8%）/16（2.7%）/58（1.7%）/33（1.1%）/18（1.1%），其感染率高低主要取决于初次性行为年龄和性行为习惯，若女性性生活过早、存在多个性伴侣、多孕多产或者长期口服避孕药等，其HR-HPV 感染率较普通人群高[9]。

HPV 属于乳头瘤病毒科，是一种嗜上皮组织的小DNA 病毒,呈双链环状并且无包膜，主要侵袭生殖器官。根据HPV 病毒L1 基因片段不同，目前发现约有200 多种型别，其中30 多种HPV 亚型与宫颈癌的发生密切相关；根据其致癌潜力，可分为高危型（HR-HPV）和低危型(LR-HPV)两种：HR-HPV 感染主要引起宫颈癌等恶性病变，包括HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/53/56/58/59/66/68 等基因型别；LR-HPV 感染主要导致生殖器疣等良性病变，包括HPV6/11 等基因型别[10,11]。子宫颈癌依据累及宫颈上皮程度不同分为子宫颈低级别鳞状上皮内病变（Low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL），即轻度子宫颈癌上皮内瘤变（CIN1），和高级别鳞状上皮内病变（High～grade squamous intraepithelial lesion，HSIL），即部分中度CIN（CIN2）和重度CIN（CIN3）。研究表明，在HSIL 和宫颈癌的发展进程中，不同亚型的HR-HPV 多重感染与单一感染比较,其致病风险更高，且相互之间可能发挥协同作用。HPV16、HPV18、HPV52 和HPV58 多重感染在宫颈癌的发生发展中意义重大，其中HPV16 和HPV18 混合感染最高，HPV16 和HPV18 的感染率随着宫颈癌病变程度的增加而显著升高，且HSIL 中HPV16 和HPV18 的感染率44.1%高于LSIL 中的22.3[12,13]。

本研究结果表明，860例女性患者共检出HR-HPV 阳性171例,总感染率为19.88%。HPV 感染存在两个年龄高峰期，分别为≤20岁阳性率33.33% 和41～50岁阳性率23.49%，不同年龄段比较差异有统计学意义(P＜0.05)，这与我国HR-HPV 感染流行病学大致相符[9]。年轻女性（≤20岁）HPV 感染率偏高，可能是由于初次发生性行为年龄过早，性伴侣数量较多，性教育知识缺乏，自我保护意识薄弱以及宫颈上皮及免疫系统发育不够成熟等因素，当初次或多次发生性生活时，极易感染HPV；中年女性（41～50岁）HPV 感染率偏高，则可能因为随年龄增长而免疫力下降，病毒清除力较弱以及绝经期前后体内雌孕激素水平变化较大，生理和免疫调节功能紊乱，导致HPV易感。健康女性进行HR-HPV 筛查，≤20岁和41～50岁的HR-HPV 感染患者，应该引起临床足够重视，加强HPV健康宣教，提高防护意识，同时加强随访，从而降低宫颈癌的发病率。HR-HPV 感染的优势型别为HPV52 (6.05%)、HPV16 (5.0%)、HPV53 (3.84%)、HPV58 (2.33%)、HPV51(1.98%)，HPV18 型感染率较低（0.81%），这与温江涛等人的研究结果有一定差异[14]，且不同型别感染率比较差异有统计学意义（P＜0.05），表明HR-HPV 基因亚型感染具有明显的地域性，不同地区的经济文化水平及人们生活习惯不同，是造成HPV 感染率存在差异的主要原因，可以根据不同地区HR-HPV 基因亚型感染特点指导当地女性有针对性的接种不同类型HPV 疫苗，从而对宫颈癌进行有效预防。一般认为，HPV16/18 型持续感染与宫颈癌的发生密切相关，本研究发现健康人群筛查HPV52/16 型感染率较高，HPV18 型感染率偏低，健康人群HPV52 型高感染率是否可导致宫颈癌的发生目前尚无定论，有待进一步研究。妇产科门诊及皮肤科HR-HPV 感染率明显高于健康体检中心及住院病房，分别为25.39%、27.66%、8.41%、和8.33%，差异有统计学意义（P＜0.05）。妇产科门诊和皮肤科高感染率可能是由于大多数女性观念上还是倾向专科专治，妇产科和皮肤科就诊人数多，阳性率高，建议加强普通人群HPV 健康宣教。

综上所述，860例女性HR-HPV 感染率为19.88%，HPV52 型感染率最高,其次为16/53/58/51 型，以单一型别感染为主,≤20岁和41～50岁感染率较高, 妇产科门诊和皮肤科感染率较高。应该对于≤20岁和41～50岁筛查出HR-HPV 阳性的女性加强HPV 知识宣教，同时做好随访，大力提倡和普及HPV 基因型的检测,尤其是高危基因亚型,以便指导临床更准确、更及时的对宫颈病变的进展作出预判和有效干预。