如何检验环境水中的微生物

费航 徐琴

【中图分类号】 R123.1

【文献标识码】A

【文章编号】2095-6851（2020）08-067-01

水是生命之源，是一种非常珍贵的自然资源，特别是在人类居住周围的水之源，水之源的好坏直接关系着每一个人的生命健康。在我国大部分地方都存在生活用水被工厂废水、人类、牲畜粪便污染的情况。这些因数污染造成的水质污染往往存在多种不同种类的微生物，其中主要包含了腐蚀性微生物以及病原性微生物。腐蚀性微生物主要起废物分解作用对人体一般无害，但是病原性微生物就会对人体造成极大的伤害，一般都会引起病毒性感染，如常见的霍乱、伤寒、细菌性痢疾以及传染性肝炎等流行疾病。因此特别是对于人类生活中用水以及水源进行相关的微生物检验是一种必要。要对水中微生物进行检验主要包含了两个项目：细菌总数以及大肠菌群的测定。水中有害细菌的数量可以作为判断水质是否被污染的标准，细菌越多、种类越广，也就能说明水质污染越严重。细菌总数的是指一毫升水样在普通琼脂培养基上降温度保持在37摄氏度，经过24小时后的培养得到的平板细菌的总数。

1 水质微生物及指示菌

水是微生物最适宜生长的坏境，特别是在被污染的水质中，由于存在大量的有机物质，使得微生物群在这种坏境中能够大量繁殖。因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。水环境中的微生物主要来源于周围土壤，以及人类、动物的粪便造成的污染带来。水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。经过研究发现，水中存在的微生物类型主要是以革兰氏阴性杆菌占主导。综合比较多种环境下的水坏境，可以得出河水及溪水中革兰氏阳性菌数量最多，这是由于陆地微生物冲洗污染所造成的。水中能够引起疾病的病原性微生物一般都不是水中固有的，绝大部分都是由于周围环境污染带来的，其中主要以人和其它温血动物的粪便污染。水中经常可检测到的病原性细菌主要包含了：志贺氏菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、小肠结炎耶尔森氏菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等

目前，世界各国一致认为大肠杆菌可以作为水质受粪便污染较好的判断指南。在我国，对水质控制也采用大肠菌群作为指示菌，GB5749-2006《中华人民共和国国家标准 生活饮用水卫生标准》规定，生活用水中大肠杆菌的数量不得超过每升3个。

2 水质微生物检验方法

GB5749-2006《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。

2.1 细菌总数的检测 国家标准中，细菌总数的是指一毫升水樣在普通琼脂培养基上将温度保持在37摄氏度，经过24小时后的培养得到的平板细菌的总数。对于生活饮用水，可以直接在饮水处采样1ml水样品置入平皿中，在加入营养琼脂充分震荡均匀，在37℃条件下培养24小时，进行计数。对水源进行测量，可依据不同的水源情况做10倍梯度稀释，针对性选择1毫升水样，品置入平皿中，在加入营养琼脂充分震荡均匀，在37℃条件下培养24小时，进行计数。按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。

2.2 总大肠菌群的检测 国家标准中，大肠杆菌可以作为水质受粪便污染较好的判断指南。总大肠菌群指的是一群需氧及兼性厌氧的细菌群在37℃环境下经过代谢生长使乳糖发酵，在24h内培养得到革兰氏阴性无芽胞杆菌。样品中总大肠菌群数的含量，就是水质被污染的程度，并且可以间接地预示有肠道致病菌存在的可能。依据国家标准可以得到多管发酵法及滤膜法来检测总大肠菌群的数量。

2.2.1 利用多管发酵法检测总大肠菌群要注意三步 初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。初发酵试验，利用乳糖蛋白胨培养液在37℃条件下培养24小时，记录产酸产气量。对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。

2.2.2 滤膜法检测总大肠菌群，实际上就是使用微孔滤膜，经过过滤一定量的水样品，可以将水样品中存在的细菌拦截在滤膜上，再将拦截有细菌菌群的滤膜放置于选择性培养基上（如品红亚硫酸钠培养基），将温度保持在37摄氏度，经过24小时后的培养以及证实试验后，无需其他在处理可直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

3 说明

3.1 在进行菌落总数测定实验中，要灵活选择适合条件的稀释度进行。对生活饮水进行测量时，可以根据国家标准规定每毫升不得超过100个这个条件，可以不做稀释梯度的处理而是直接吸取1毫升到平板进行培养。

3.2 培养时间 与检测食品中存在微生物的试验不同，检验环境水中的微生物中的总数，培养时间采用24小时。

3.3 总大肠菌群的测定方法，在测定人类饮用水时应该考虑到饮水与水源处的污染可能不同的原因，因此在测量时要采用不同的接种量，检数表也不相同。

3.4 多倍浓度培养液 主要用于，接种量超过1毫升的情况。如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL，加入100mL水后，总体积为150mL，培养液恢复到正常浓度。

3.5 滤膜法检测总大肠菌群 采用这种测量方法必须满足大量低浊度水样，大量水样滤过滤膜后，水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。