确保竹笋中2种有机磷农药残留能力验证结果满意的关键点

曾永明，凌经昌，陈松武，栾 洁，何京明，周丽珠

（1.广西壮族自治区林业科学研究院，广西南宁530002；2.广西壮族自治区林产品质量检验检测中心，广西南宁530022；3.凭祥出入境检验检疫局，广西凭祥532600）

0 引言

实验室能力验证是指认可机构为确保实验室维持较高的校准和检测水平而对其能力进行考核、监督和确认的一种活动，对于提升实验室检测能力有着十分重要的意义，是评价实验室检测结果真实水平的有效手段，也是实验室质量管理体系持续改进和不断提高的有效措施。作为第三方认可机构，每年上级组织的能力验证必须参加。针对如何保证农产品农药残留能力验证实验结果满意的关键点进行探讨分析。样品前处理采用NY/T 761[1]的方法，提取液的过滤要用定性滤纸或脱脂棉，提取液过滤后静置时间控制在30～40 min，吸取10 mL乙腈液体时要准确，净化步骤的水浴温度要严格按照方法要求的温度。检测结束后，对结果进行验证，采用盲样的空白基质加标和盲样空白基质配的办法，分析判断结果准确性，得出真值，上报能力验证结果。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器与设备

T18型均浆机，IKA仪器有限公司产品；GC-2010Plus型气相色谱仪，日本岛津公司产品；SHRtx-1701型色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25μm毛细色谱柱）、TD5A-WS型离心机，湘仪离心机仪器有限公司产品；WNV-10G型氮吹仪，博纳艾杰尔科技有限公司产品。

1.1.2 试剂与材料

乙腈（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。

2种农药标准品：甲基对硫磷（Parathionmethyl）、水胺硫磷（Isocarbophos），农业部环境保护科学监测研究所提供，质量浓度均为100μg/mL。

1.2 试验方法

采用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》(NY/T 761—2008)中第1部分：蔬菜和水果中有机磷类农药多残留的测定进行检测[1]。

1.3 试验原理

采用乙腈提取竹笋考核样中的甲基对硫磷和水胺硫磷，提取溶液经过滤、静置分层、氮吹浓缩后，再用丙酮溶解定容，用GC-2010Plus型气相色谱仪的火焰光度检测器（FPD）进行检测。用外标法进行定性和定量[1]。

1.4 混合标准工作溶液的配置

根据甲基对硫磷和水胺硫磷的标准物质证书的定值含量进行配置[2]，首先确定甲基对硫磷和水胺硫磷标准溶液线性范围，它会影响定量结果的准确性和线性系数[3]。选择4个质量浓度点，考核样品的质量浓度最好在曲线的中点，以便定量准确。具体线性范围根据检测考核样品质量浓度来确定。

分别吸取甲基对硫磷和水胺硫磷标准溶液100μL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀释定容，配制成质量浓度为1μg/mL的混合工作标准溶液，保存在4℃冰箱中。检测时通过稀释混合工作溶液得到0.10，0.15，0.20，0.30μg/mL共4个质量浓度点的混合标准工作溶液，随考核样品进行气相色谱分析。

1.5 色谱条件

（1）色谱柱。SH-Rtx-1701（30 m×0.25 mm×0.25μm）。

（2）色谱柱温度。80℃保持2 min，以每分钟15℃速度上升到210℃保持7 min，再以每分钟25℃上升到250℃保持10min，进样量1μL，进样口温度250℃，不分流进样，检测器280℃，氮气流量30 mL/min，柱流量2 mL/min，空气流量62.5 mL/min，氢气流量90 mL/min。

2 结果与分析

2.1 前处理

此次能力验证的样品为已粉碎的干竹笋样品，由能力验证组织机构加入甲基对硫磷和水胺硫磷农药，实验室收到1个竹笋考核样品及1个竹笋空白样品，样品质量各约10 g。

分别称取竹笋考核样品和笋空白样品各2.0 g于高型烧杯中，加入18 mL蒸馏水复原至竹笋鲜样状态，然后加入50.00 mL乙腈，匀浆2 min，用定型滤纸或脱脂棉过滤到装有5～7 g氯化钠的具塞量筒中，塞上塞子，剧烈振荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈和水相分层[4]。吸取10.00 mL乙腈溶液，放入15 mL离心管中，在WNV-10G氮吹仪上调节水浴温度不大于50℃，缓缓通入氮气吹至近干，加入5.0 mL丙酮，盖上盖子涡旋1 min，过0.2μm滤膜，装入样品瓶中，待气相色谱测定[1]。

2.2 上机检测

上机检测气相色谱时，设置色谱柱温采取为程序升温：开始温度设定为80℃，保持2 min后，以10℃/min速率升至200℃，保持0.2 min，然后以2℃/min速率升至250℃；进样口温度250℃；检测器（FPD）温度280℃；载气（高纯氮99.999%）流速60 mL/min，氢气流速85 mL/min，空气流速45 mL/min；采用不分流全注入进样；进样体积1μL。

用甲基对硫磷和水胺硫磷标准品配制成质量浓度为50μg/L的混合标准溶液，进行色谱检测，它们的保留时间分别为：甲基对硫磷（Parathion-methyl）20.087 min、水胺硫磷（Isocarbophos）21.931 min。

2种有机磷农药出峰顺序见图1。

图1 2种有机磷农药出峰顺序图

2.3 2种有机磷农药标准曲线

甲基对硫磷标准曲线见图2，水胺硫磷标准曲线见图3。

2.4 竹笋考核样品分析结果结果

竹笋考核样品分析结果见表1。

2.5 判断结果准确性

图2 甲基对硫磷标准曲线

图3 水胺硫磷标准曲线

根据上述结果，结果的准确性，通常采用加标回收率的办法[5-6]，由于蔬菜中农残多有基质效应，得出的数据可能比实际加标量要大得多，采用2种方法来验证。

2.5.1 用空白基质配标液

空白盲样前处理结束时，以5 mL溶剂来定容，移入2 mL进样瓶中后，将剩余3 mL液体配标液，即为基质配标液[7]。用其作模板，计算样品中的农药含量。

2.5.2 用空白基质做加标标准曲线

竹笋空白基质样约10 g，称取2.0 g样品后，还要剩约8 g，称4个1.0 g竹笋空白基质样品，分别加入上面1.4中的混合工作溶液100，150，200，300μL，严格按照上述前处理方法重做1遍，得出空白基质加标标准曲线，再重新计算检测结果[8]。

2.6 上报结果并通过

根据以上用空白基质配标液和空白基质加标标准曲线计算检测结果，分析判断结果在合格范围内，上报能力验证结果：甲基对硫磷含量0.52 mg/kg，水胺硫磷含量1.10 mg/kg；1个月后有Z值反馈，结果为满意。

3 结论

要想通过竹笋中农残的能力验证，样品前处理采用NY/T 761[1]的方法，必须注意：提取液的过滤要用定性滤纸或脱脂棉，提取液过滤后静置时间控制在30～40 min，吸取10 mL乙腈液体时要准确，净化步骤的水浴温度要严格按照方法要求的温度[9]，氮吹切记不要吹的太干，要在氮吹仪旁边一直盯着，吹到潮乎乎为宜，最后定容5 mL要准确。

表1 竹笋考核样品分析结果

前处理结束后，验证结果很重要，不同的蔬菜不同的农药，基质效应都不一样，回收率也不一样，要先进行粗筛，先得出农药品的大概含量，然后选择与盲样品种一样的蔬菜里加标，这时采用盲样的空白基质配标液和空白基质加标画标准曲线为最佳[10]。

为防止待测液中甲基对硫磷和水胺硫磷衰减，在前处理结束后样品需及时上机检测。上机测定顺序：先测试剂空白和样品空白，再由低浓度到高浓度依次测定标准溶液，然后加测一次试剂空白，最后测定考核样品[11]。每个样品必须上机平行测定2次，以便降低因仪器不稳定造成的误差。结果取平均值，避免人为剔除平行性差的样品结果。

最后，认真分析样品检测全过程及色谱图、计算结果等，细致比较试剂空白和样品空白基质的色谱图，更要判别考核样品中添加浓度含量低的农药，防止出现漏判、误判，确保此次能力验证结果满意。