可选择性的让甘氨酸和D-丙氨酸从肽N末端游离的曲菌肽酶

楠木宪一

有报告说革兰氏阴性菌Ochrobacterium anthropi的D-氨基酸特异性氨肽酶（D-stereospecific aminopeptidase，DAP），会从基质开始以极为特异的方式让N末端的D-丙氨酸游离。几乎找不到有关真核生物的D-氨基酸的特异性氨肽酶的相关报告，但研究人员还是从曲菌基因中抽取到的氨基酸氨肽酶中，发现了与上述DAP相同的基因。

与O.Anthropi的DAP有相同性的DNA领域在某种丝状菌的基因中找到了，考虑到该基因的特异性，将其命名为甘氨酸-D-丙氨酸氨基肽酶（glycine-D-Alanine aminopeptidase，gdaA）。gdaA与O.Anthropi的DAP在氨基酸排列上的有43%是相同的，即让gdaA基因过量表达并使其积蓄在曲菌细胞内。曾用最少琼脂培养基和全琼脂培养基培养gdaA基因高表达株、该菌破坏株以及对照株，并未发现它们在繁殖以及孢子形成上的差别，由此认为gdaA基因并非曲菌繁殖所必需的基因。另外，用液体全培养基培养基因破坏株和对照株，从回收的菌体中调制无细胞的提取液，检测其氨基肽酶活性，结果显示对照株随着培养时间的延长其比活性增长，而gdaA基因破坏株的分解活性却始终处于低水，据此可认为gdaA是曲菌细胞内使甘氨酸和D-丙氨酸游离，即氨基肽酶活性的主要酶。