梅州地区2 型糖尿病患者血清超氧化物歧化酶水平及其影响因素的分析

刘桂荣，黎灵锋，胡世杰，韦慧萍，温应方

中山大学第三附属医院粤东医院检验科，广东梅州 514000

在人体中广泛存在超氧化物歧化酶等抗辐射、抗自身免疫疾病、抗肿瘤、抗衰老、急慢性炎症反应等密切相关。机体代谢过程中产生的大量活性氧自由基（ROS）与多种疾病有关。有研究显示，糖尿病患者体内的ROS 生成增加，且清除受损[1]；而2 型糖尿病（T2DM）及其并发症的发生发展与人体内氧化应激-抗氧化能力失衡有关。超氧化物歧化酶（SOD）是生物体内最重要的抗氧化酶之一，其血清浓度反映了机体的抗氧化能力。然而，T2DM 与氧化应激-抗氧化能力失衡之间的关系目前还不完全清楚。该研究方便选取2019 年3—12月于中山大学第三附属医院粤东医院就诊的梅州地区T2DM 患者212 例，对比梅州地区T2DM 患者和健康人员的血清SOD 水平，探讨其与年龄、性别及其他糖尿病相关指标的相关性，以期对临床上T2DM 的诊断、预后及治疗评估提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取于中山大学第三附属医院粤东医院就诊的梅州地区T2DM 患者212 例，所有患者和家属均对该次研究知情，并对同意书进行签署，且该次研究已经通过医院伦理委员会批准，其中男性101 例（47.6%），女性 111 例 （52.4%）；年龄 22～86 岁，平均 （59.12±12.14）岁。纳入研究的患者均符合《中国2 型糖尿病防治指南 （2017 年版）》，且排除已处于妊娠期或哺乳期者；重度心、肺功能不全者；2 周内使用过抗生素者；就诊前 1 d 饮酒者。另选取 2016 年 9 月—2017 年 10 月于中山大学第三附属医院粤东医院体检中心进行健康体检的健康成人中的体检结论正常者210 名作为对照组，其中男性 100 名（47.62%）、女性 110 名（52.38%）；年龄 18～91 岁，平均年龄（58.32±15.41）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 仪器与试剂

AU5800 全自动生化分析仪，HA8180 全自动糖化血红蛋白分析仪，i2000 全自动免疫分析仪；超氧化物歧化酶测定试剂盒（邻苯三酚底物法），血清葡萄糖测定试剂盒（ 己糖激酶法）。

1.3 方法

所有T2DM 组及对照组受试者均于晨起后，取坐姿在安静状态下采集空腹 12 h 静脉血，2 h 内经2 200×g 离心分离血清并保存在-80℃超低温冰箱中，样本收集完毕后统一复溶后进行各项检测。检验操作严格按照实验室作业指导书要求进行。血清SOD 使用AU5800 全自动生化分析仪及超氧化物歧化酶测定试剂盒 （邻苯三酚底物法） 进行测定；血清葡萄糖使用AU5800 全自动生化分析仪及血清葡萄糖测定试剂盒（己糖激酶法）进行测定；糖化血红蛋白使用HA8180 及配套原装试剂进行测定；胰岛素C 肽及胰岛素使用i2000 全自动免疫分析仪及配套原装试剂进行测定。所有仪器每日均按操作规程进行质控操作并定时校准，保证检测结果的可靠性。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0 统计学软件软件进行数据分析；检测数据的正态性采用 Kolmogorov-Smirnov 检验；两组检测数据间的 SOD 水平比较采用Mann-Whitney U 检验；多组间的数据用kruskal-wallis 检验；SOD 与年龄、糖化血红蛋白的相关性采用 Pearson 相关分析。SOD 与其他多项指标间的相关性采用线性回归分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 T2DM 患者血清 SOD 水平与健康人员的分析

经Kolmogorov-Smirnov 检验，T2DM 组和对照组血清的SOD 水平不服从正态分布，其故该文中数据均以中位值与四分位数范围表示。采用Mann-Whitney U 检验，两组间 SOD 水平差异有统计学意义（P＜0.05）,见表1。说明T2DM 患者的SOD 水平显著低于健康人员。

表1 两组 SOD 水平比较（±s）

表1 两组 SOD 水平比较（±s）

组别SOD(U/mL)T2DM 组对照组U 值P 值208（186～234）213（180～252）44.624＜0.01

2.2 T2DM 患者血清SOD 水平分布

根据文献报道，健康人及血清SOD 水平存在性别差异，通常男性高于女性。亦有文献报道在T2DM 患者中男性的血清SOD 水平高于女性患者。但用Mann-Whitney U 检验比较男性和女性T2DM 患者的SOD 水平，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

有文献报道，T2DM 患者各年龄段的SOD 水平差异有统计学意义（P＜0.05），通过考察梅州地区T2DM 患者血清 SOD 水平在各年龄段的分布，见表3。使用Kruskal-Wallis 检验对各年龄段 T2DM 患者的血清SOD 水平分析，发现其在各年龄段差异有统计学意义（P＜0.001）。

表2 不同性别的T2DM 患者SOD 水平比较（±s）

表2 不同性别的T2DM 患者SOD 水平比较（±s）

项目SOD(U/mL)男女U 值P 值209（184～229）206（186～242）1.529＞0.05

表3 不同年龄段的T2DM 患者SOD 水平分布

2.3 T2DM 患者血清SOD 与年龄及糖化血红蛋白的相关性分析

因T2DM 患者的SOD 水平不符合正态分布，故采用 Pearson 相关分析对 SOD 水平与年龄、HbA1c、Glu、C-P 和Ins 的相关性进行分析。结果显示，T2DM 患者血清SOD 水平与年龄存在相关性（r=-0.270，P＜0.001），见图1,且与HbA1c（r=-0.187，P＜0.010）、C-P（r=-0.196，P＜0.010）和Ins（r=-0.146，P＜0.05）存在较弱的相关性。

2.4 回归分析影响T2DM 患者血清SOD 的相关因素

以血清SOD 水平为因变量，分析影响T2DM 患者血清 SOD 水平的相关因素。以年龄、HbA1c、Glu、C-P 和Ins 为协变量建立回归模型，结果进入此回归模型的3个变量分别为年龄、HbA1c 和Glu，见表4。

表4 线性回归分析影响T2DM 患者血清SOD 水平的相关因素

图1 T2DM 患者血清SOD 水平与年龄的相关性

3 讨论

有文献报道，在糖尿病及其相关并发症的发生发展过程中，由于葡萄糖自身氧化、蛋白质非酶糖化、多元醇通路和蛋白激酶C 活性增强使机体产生的氧自由基增多[1]，而抗氧化酶的糖基化增加又导致抗氧化能力削弱，因此造成机体的氧化应激-抗氧化能力失衡，导致胰岛β 细胞功能受损[2]。另一方面，过多的氧自由基激活一系列的氧化还原敏感性信号通路（如PI3K 信号通路等），导致胰岛素的效应降低[11]。因此，研究糖尿病患者的氧化应激-抗氧化能力水平对于理解糖尿病及其并发症的发生发展原理具有重要意义，并可帮助糖尿病的诊断、预后判断和治疗监测[3]。

该研究发现，T2DM 患者的血清SOD 水平较健康人群更低，提示T2DM 患者的抗氧化能力受损，有研究者认为抗氧化力的减弱是由于T2DM 患者的氧自由基生成过多导致抗氧化物质被大量消耗[6]，但受损的具体机制尚需进一步实验证明。该研究还发现，T2DM 患者血清SOD 水平与年龄负相关，表明年龄是影响血清SOD 水平的独立因素，这一点与其他学者的研究相一致[4]。然而，该研究结果显示在T2DM 患者中，不同性别间的SOD 水平差异无统计学意义（P＞0.05），这可能与该研究纳入的女性患者普遍年龄较大有关。有研究报道，50 岁以上的T2DM 患者的血清SOD 水平无性别差异[6]，因此需要进一步研究探讨SOD 水平与性激素水平之间的相关性。相关性分析及回归分析发现，SOD 水平主要与年龄、HbA1c 和 Glu 水平有关，而与 C-P 和 Ins无密切相关。在血糖控制不理想的情况下，循环中过多的葡萄糖导致葡萄糖自身氧化和蛋白质非酶糖化使得自由基产生增多[5]，而抗氧化酶的糖基化增加又导致抗氧化能力削弱[15]，SOD 水平的下降是这2 个方面的综合作用。因此，患者年龄的增长和血糖控制不良是导致血清SOD 水平降低的主要因素，而其发挥作用的具体机制还需要进一步研究。曾瑞翔等[12]研究中对上海地区T2DM 患者血清超氧化物歧化酶水平进行测定，选择60 名健康体检者和452 例T2DM 患者，从研究结果中显示与 NC 组（156.64±18.77）U/mL 相比，T2DM 组患者血清 SOD 水平（132.25±21.43）U/mL 较低，且女性低于男性，年龄越大SOD 水平越低，其研究结果与该次研究结果 SOD 水平 208U/mL，男性 SOD 水平 209 U/mL，女性SOD 水平206 U/mL 基本一致。

综上所述，该研究对梅州地区T2DM 患者的血清SOD 水平分布进行了初步分析，并初步探讨了影响SOD 水平的主要因素，为理解糖尿病及其并发症的发生发展过程及其诊断预后判断和治疗监测提供一定的参考依据。