ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测效果分析

张官华

（金湖县中医院，江苏 淮安 211600）

0 引言

ELISA法又称为酶联免疫吸附法，最早于1917年被国外专家用来定量检测IgG抗体，直到1966年，开始用来检测样品抗原以及微量物质。在实验室中，化学发光法属于一种使用较多的发光免疫技术，在临床免疫检验学中应用较广。作为乙类传染病，病毒性肝炎和艾滋病在全世界范围内都有着较高的发病率。艾滋病主要是人体免疫缺陷病毒导致的，当前研究发现此病毒分为两种，分别是HIV-1型与HIV-2型[1]。作为病毒性肝炎的一种，丙型肝炎病毒会导致丙型肝炎的出现，这也是引起慢性肝炎和肝硬化的重要原因。梅毒则是由于梅毒螺旋体感染导致的。近些年来，艾滋病、梅毒以及丙肝疾病发病率不断上升，而艾滋病及梅毒的传染趋势更加明显。由于艾滋病具有较长的潜伏期，如果没有第一时间发现，得不到及时的治疗，会导致更多的人感染，所以前期的诊断对于控制疾病有着重要的作用[2-3]。本文为了探究检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的有效方法，分别对ELISA法和CLIA法进行对比。

1 资料与方法

1.1 一般资料。对我院收治的患者进行检测，共有1188例，所有患者在2018年2月至2019年7月在金湖县中医院接受治疗，共抽取1188例血液样本。所有患者均已自愿签订知情同意书，此次研究也已经通过了金湖县中医院伦理委员会的审查批准。其中有女516例，男672例，平均年龄（37.21±7.21）岁。

1.2 方法。使用仪器：全自动化学发光仪由日本希森美康生产，型号为sysmexHISCL-5000；全自动蛋白印迹仪，由瑞士帝肯生产，型号为Tecan；全自动酶联免疫分析仪，由瑞士哈美顿生产，型号为HamiltonFAME-2420；洗板机与酶标仪由上海新波公司生产；平板混合器、U型微量反应板、吸头以及加样器由北京万泰公司生产。使用试剂：有珠海丽珠生产的人类面议缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒；上海科华生产的丙肝抗体检查试剂盒；由新加坡MP公司生产的HIV-1+2抗体免疫印迹试剂；达安基因公司生产的丙肝病毒核酸定量检测试剂盒；日本富土瑞必欧株式会社生产的TPPA试剂盒，由北京万泰公司生产的梅毒抗体ELISA试剂盒，由美国雅培公司生产的梅毒抗体CLIA法试剂盒。

1.3 检测方法。通过计算机对样本进行随机编号，根据编号对血清样本进行分装，期间注意不要对样本进行重复冷冻。在完成取样后将样本放置在零下20℃的冰箱中进行保存，并在检测之前取出。整个检测过程由专业的技师严格参照试剂盒说明书以及相关检测规范进行操作，并根据实验室检测规范做好初筛、复检以及确证等工作。HIV-1/HIV-2抗体检测以Westernblot检测结果作为金标准；丙肝抗体检测以PCR检测结果作为检测金标准；梅毒抗体检测以TPPA检测结果作为金标准。

1.4 观察指标。对血液样本分别采用ELISA法和CLIA法检测血清中的HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体，对比两种方法检测效果。

2 结果

2.1 ELISA法和CLIA法检测HIV-1/HIV-2抗体效果对比。HIV-1/HIV-2抗体检测以Westernblot检测结果作为金标准，共有6例患者显示HIV阳性，占比为0.51%，ELISA法检测显示阳性患者5例，占比为0.42%，CLIA法检测显示阳性患者6例，占比为0.51%，见表1。

表1 ELISA法和CLIA法检测HIV-1/HIV-2抗体效果对比

2.2 ELISA法和CLIA法检测HCV抗体效果对比。丙肝抗体检测以PCR检测结果作为检测金标准，共有56例患者梅毒抗体检测显示阳性，占比为4.71%，ELISA法检测显示阳性患者47例，占比为3.96%，CLIA法检测显示阳性患者51例，占比为4.29%，见表2。

表2 ELISA法和CLIA法检测HCV抗体效果对比

2.3 ELISA法和CLIA法检测梅毒抗体效果对比。梅毒抗体检测以TPPA检测结果作为金标准，共有34例患者显示阳性，占比为2.86%，ELISA法检测显示阳性患者31例，占比为2.61%，CLIA法检测显示阳性患者33例，占比为2.78%。采用ELISA法对CLIA法检测结果显示阴性的标本进行检测，结果也显示为阴性，但是检测显示阳性的患者，ELISA法只有部分检测出阳性。

3 讨论

信息网络时代的发展进一步促进了社会的发展，但是也在一定程度上改变了人们的价值观，很多人性保护意识薄弱，每年因为不洁性交感染梅毒、艾滋病的患者在不断增加，另外，梅毒诊断难度较大，由于一般实验室很难做到查TP，所以在临床上很少使用，有关研究调查显示，我国近些年艾滋病、梅毒以及丙肝的患者数量呈现逐年上升的趋势，特别是艾滋病患者数量增长更快[4]。艾滋病、梅毒以及丙肝的及早治疗对改善患者预后以及感染人数的控制有着重要的意义，因此疾病的早期临床诊断尤为重要，当前临床主要以Westernblot、PCR以及TPPA检测方法为主，随着医学技术的不断发展，ELISA法以及CLIA法也得到广泛的应用，对提升临床检测准确率起到了重要作用。

虽然Westernblot、PCR以及TPPA在诊断HIV-1/HIV-2、HCV以及梅毒的诊断过程中，其准确性、特异度以及敏感度比较高，作为当前疾病诊断的金标准，但是这几类检测方法成本较高，且操作过程更加复杂，检测周期较长，对临床的诊断治疗造成了较大的限制。ELISA法是通过检测酶标抗原或抗体来进行检测，这一类物质除了能够确保抗体免疫活性外，还能使酶生物活性得到保留，对提高检测精度具有重要的作用[5]。CLIA作为一种发光免疫技术，主要通过结合免疫反应与发光系统，通过检测抗原或抗体，来作为诊断的重要依据，两种方法在临床上均有着广泛的应用。然而在实际应用中，ELISA法手工操作较多，无法实现全自动化操作，且试剂属于定型试剂，无法作为定量试剂来检测使用，检测时间较长，花费精力更多，缺乏良好的重复性。与ELISA法相比，CLIA法拥有更简单的操作，检测时间也更短，重复性更强，且能够实现定量检测。

此次研究中通过对ELISA法与CLIA法检测血清中的HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体，结果显示，对于CLIA法检测出来的阴性标本，采用ELISA法进行检测后也为阴性，但是对于CLIA法检测出来的阳性标本，采用ELISA法进行检测后并不是所有标本都表现阳性，两种检测方法与金标准均具有较高的一致性，但是CLIA法要高于ELISA法。

综上所述，临床在HIV-1/HIV-2、梅毒和丙肝诊断中，应将CLIA法作为首选检测方法，必要情况下可以结合两种方法进行检测，使漏诊率和误诊率得到最大限度的降低。