一例猪传染性胃肠炎的鉴别诊断

窦中家

（平顶山市动物疫病预防控制中心，河南 平顶山 476000）

冬春季节是猪腹泻疫情的高发季节，有很多产生腹泻的原因，包括寄生虫感染、病毒性及细菌性腹泻等。在日常养殖中最严重一种是病毒性腹泻。不管是在哪个年龄阶段，猪都非常容易感染病毒性腹泻，感染的原因也有很多种，致死率也很高，虽然有的猪因为曾感染过而获得抗体并存活下来，但这种猪在后期生长的过程非常缓慢，进而使得养殖专业户在投入相同的饲料量时，却无法获得同等多的报酬。一旦猪群出现腹泻，会导致生长缓慢，严重甚至引起死亡，使养殖场户经济上遭受损失，使每一个养殖场户都颇为焦虑。

该试验通过对平顶山某猪场送检的死亡仔猪肠管病料，通过采用荧光PCR的检测，结果说明猪传染性胃肠炎病原是阳性的，从而确定该病例为猪传染性胃肠炎感染。再根据这个猪场的实际情况，制订出有效的防控措施，有效减少由于病毒性腹泻病毒而引起猪死亡的经济损失。

1 概述

猪传染性胃肠炎，是一种由猪传染性胃肠炎病毒引起的高度、接触性的肠道传染性疾病。主要症状为呕吐、腹泻、发热，到最后严重脱水，造成仔猪的死亡。1946 年美国第一次发现并报道出猪会感染这种传染性胃肠炎，在这之后经过了解，世界各国很多地方都曾发生过这种现象。我国在20世纪70年代首次发现猪传染性胃肠炎，因为该种疾病有极高的传染性和致死率，导致我国的养猪业受到重创，严重影响到了我国居民的日常生活，更使得我国养猪专业户无法得到应有的报酬。正因为造成的损失太过严重，我国已经明文规定猪传染性胃肠炎是日常养殖活动中必须检疫的传染病。

2 流行病学

各个年龄段的猪都有易感性，刚出生的哺乳仔猪发病率、死亡率可以高达100%。5周龄以上猪的致死率会相对较低，通常会慢慢耐过，进而产生免疫力。成年猪感染基本上不会造成死亡，但猪的产量和质量会受影响，这样生产成本不变，产能下降，猪场的收益就会减少。随着时间的增长，大多数猪免疫力增强，都能自然康复，但是病毒会长期潜伏携带。

该病毒主要有两种。一种是暴发性传播、一种为地方流行性传播。新发病的地方流行性传播，传播速度快，几天内就可蔓延到整个猪场。老疫区会出现流行性或是间歇性，一般情况下，曾经感染过此病毒的母猪会存在抗体，自身存在免疫力，通常不会重复感染。但是无免疫力的断奶及哺乳仔猪容易感染病毒。此病毒发病速度快，每年冬季、初春寒冷季节发生较多。1946 年第一次在美国被发现，现在世界各个国家地区都有覆盖。

3 临床症状及病理变化

该病潜伏期短，一般为15～18 h，有的长达2～3 d。猪群首次被感染后，会迅速在猪群中传染传播。而且母猪也会出现急性腹泻，腹泻一般呈喷射的症状，粪便一般呈现三种颜色，分别为灰、黄、绿色，应及时观察记录粪便中有无未消化的乳凝块状形态，闻一闻粪便中有无浓重的腥臭。病猪发病呕吐物颜色为绿色和黄色两种。发病后的病猪会出现一直找水喝，若此情况发生说明病猪可能出现脱水症状，体重会减少。病猪的日龄越小，从得病到死亡的过程就会越短。仔猪感染此病的比率极高，14 日龄以内的仔猪大多会因严重脱水致死；其他的成年猪群在感染后有的严重会出现腹泻，感染后不严重的会导致食欲不振，一般1 w 后，根据每个猪的体质强弱，病情逐渐好转，康复后的病猪会产生抗体，在之后的哺乳过程中也能一定程度上保护仔猪。

4 实验室诊断

4.1 病料的处理及核酸的提取

取适量送检的组织病料于EP管中，剪碎，加入合适比例的灭菌蒸馏水，并搅拌，使其混合均匀。然后放到冰箱，反复冻融至少3 次，再用离心机2 000 转，离心10 min，将其上清液取出，然后再用核酸提取试剂盒，进行提取核酸。

4.2 病原核酸检测

将引物探针、RT-PCR 酶反应液快速离心，然后用移液器把RT-PCR酶反应液转移到引物探针中，再上下颠倒混匀6次，使其充分混匀，配制成RT-PCR反应液。

根据待检样品的数量，在每个PCR反应管中，分别加入20 μL RT-PCR 反应液；在待检的PCR 反应管中，分别加入5 μL阴性对照、5 μL待检RNA、5 μL阳性对照，加样完成后将PCR 反应管盖紧，最终每个PCR 反应管内的液体体积全部为25 μL。

将加样完成的PCR反应管，进行快速离心，然后放到荧光PCR仪中，进行下面的反应：

①50 ℃反转录15 min；②95 ℃预变性30 s；③95 ℃变性15 s，60 ℃延伸20 s，共40 个循环；设置60 ℃收集FAM荧光信号。

4.3 结果与分析

结果表明TGEV核酸的荧光RT-PCR检测，阳性对照成立，检测样品Ct值为31.35，判定为阳性。因此送检样品存在猪传染性胃肠炎病毒感染。

5 讨论与结论

猪腹泻病原的背景复杂且种类繁多，其中包含细菌、寄生虫、病毒等，而病毒是危害最大最严重的一种。猪腹泻病毒传播速度快，范围广，危害严重。

鉴于该猪场的猪经常发生脱水、腹泻、呕吐此类症状，且刚出生的仔猪拉稀严重、发病率也比较高、死亡率在50%以上，很难控制，抗生素的效果也不明显，疑似病毒性腹泻，造成仔猪成活率降低，对猪场的经营造成严重的影响。有很多病原种类都可以引起猪的腹泻，产生的症状、病理变化也很相似，在临床和组织病理学上很难区别。

所以，借助荧光RT-PCR 检测方法的优势，可以直接从病料中检测出微量病毒，特异性强，敏感度高，该方法具有较突出的优势，适用于临床快速诊断。通过荧光RT-PCR 实验室检测方法，可基本确定此场猪群发病与TGEV的感染密切相关。

此病一般当年12月至次年4月出现比较多，但是7到9 月也会有极少数感染发病。新发病地区暴发性流行。成年母猪发病率较低，但哺乳猪仔、断奶猪仔、育肥猪感染这个病的发病率很高，其中哺乳仔猪受害病死率将近占一半。老发病地区地方性流行，并且抗生素等常规药物没有治疗作用，给养猪业带来很大的经济损失。

因此根据此病的流行特点，对实际生产中TGE 的防控提出一些建议。首先要从思想上重视起来，加强饲养管理，增强疫病防控工作，要经常对场内管理人员及技术人员的培训指导，禁止从疫区或病死猪场引种、引种前进行TGEV检测，之后要隔离观察半个月至1个月再合并，当猪场出现此病感染发病时，应立即隔离治疗，治疗失败应及时按程序无害化处理，并做好对发病猪曾圈养环境的消毒，以及病死猪运输的车辆、路线和人员做好消毒。此病毒在高温环境下不宜生存，但可以在低温中潜伏很久，所以养殖场一定要严格、科学的制定防疫防控规定，扎实、有效地实施消毒措施，定期消毒，定期检查，禁止圈内猪出现串圈交叉感染等现象，切断并扼杀传染源及传播途径。