骨髓细胞学与WBC、SF 联合诊断再生障碍性贫血的效果

夏锦 谢豪杰 苏孝楠

（1.开封市人民医院检验科，河南 开封 475000；2.开封市人民医院肾病风湿科，河南 开封 475000；3.开封市人民医院骨科，河南 开封 475000）

再生障碍性贫血（Aplastic Anemia，AA）属于一种骨髓造血功能衰竭性疾病，主要以全血细胞减少、骨髓造血功能障碍为典型特征。据刘文等学者[1]研究表明，低增生骨髓异常综合征、骨髓纤维化、AA 等疾病具有相似的临床表现，且均可导致全血细胞减少等情况发生。但各种疾病的发病机制及治疗目标不同，因此，准确鉴别AA 对患者预后具有重要意义。

目前，骨髓细胞学检查通过观察骨髓细胞的病理学改变，特异性反映患者血液系统功能情况。以往多项实验显示，白细胞水平异常与肿瘤、感染、贫血等疾病的发生、发展息息相关[2]。而铁蛋白（Serum Ferritin，SF）属于铁储存蛋白，对改善人体免疫、造血功能产生积极影响，能直观反映出体内铁贮存情况。近年来，外周血常规和骨髓细胞学检查对于AA 的诊断作用日益受到关注，且有部分学者对其展开研究[3]。而将白细胞计数（White Blood cell Count，WBC）与SF 检测作为AA 的辅助性检查手段，与骨髓细胞学检查进行联合应用仍存在诸多探讨空间。

因此，本研究旨在分析骨髓细胞学与WBC、SF 联合诊断AA 的应用效果。从而为提高临床诊断效率提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究经医院医学伦理委员会审批通过。选取2017 年5 月-2022 年5 月本院收治的202 例AA 患者，纳入观察组。纳入标准：符合美国血液学协会（2018 年）制定的关于AA 的诊断标准[4]；依从性好，配合研究者；病历资料完整；排除标准：研究前接受抗贫血用药物治疗；合并感染性疾病者；存在恶性肿瘤的患者。

另选取同期体检的198 例健康志愿者纳入对照组。观察组男性132 例，女性70 例；年龄：26～55 岁，平均年龄（38.67±4.57）岁；BMI：16.4～21.3 kg•m-2，平均（18.57±1.41）kg•m-2。对照组男性138 例，女性60 例；年龄：24～52 岁，平均年龄（37.57±5.12）岁。

1.2 方法

1.2.1 骨髓细胞学检查

常规消毒处理，局部麻醉生效后，在患者髂前、后骨及胸骨处进行穿刺处理，将取出的骨髓制成骨髓涂片，随后进行骨髓染色操作。染色材料使用20%的酸性亚铁氰化钾，等待30 min，随后将涂片进行反复冲洗，显微镜下观察。通过记录细胞质中呈现出蓝色铁粒的细胞个数，计算该细胞所占百分比，分析细胞内铁情况。细胞外铁评级标准：存在大量蓝色铁粒为“++++”、较多蓝色铁粒为“+++”、部分蓝色铁粒为“++”、少量蓝色铁粒“+”、无蓝色铁粒“-”。

1.2.2 WBC 检查

抽取患者空腹静脉血2 mL，EDTA K2 抗凝血，采用全自动血液分析仪（日本希森美康公司，国械注进20172227279，型号：Sysmex XN2000）测定WBC 水平。

1.2.3 SF 检测

抽取患者空腹静脉血3 mL，进行离心处理（3000 r•min-1，15 min），使用全自动化学发光免疫分析仪（深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，粤械注准20172401486，型号：MAGLUMI 4000）检测SF 水平。

1.2.4 阳性判定标准

根据WBC、SF、细胞内铁的平均值作为临界值，WBC＜5.21×109L-1为阳性，SF 水平＜65.64 μg•L-1为阳性，细胞内铁＜ 28.14% 判定为阳性。

1.3 观察指标

（1）比较两组WBC、SF 及骨髓细胞铁测定结果；（2）比较骨髓细胞学、WBC、SF 单独及联合运用的诊断结果。（3）分析骨髓细胞学、WBC、SF 联合检测的诊断价值。诊断准确率=（真阳性人数+真阴性人数）÷总人数×100%，特异度=（真阴性人数÷金标准阴性人数）×100%，灵敏度=（真阳性人数÷金标准阳性人数）×100%。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 WBC、SF 及骨髓细胞铁测定结果

观察组WBC、SF 水平分别为3.37±1.49（×109L-1）、25.15±6.34（μg•L-1），对照组WBC、SF 水平分别为7.14±1.76（×109L-1）、107.43±28.61（μg•L-1）。观察组WBC、SF 水平及细胞内铁含量明显低于对照组，而细胞外铁明显高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组WBC、SF 水平及骨髓细胞铁测定结果比较[（)，n(%)]

表1 两组WBC、SF 水平及骨髓细胞铁测定结果比较[（)，n(%)]

注：与对照组比较，aP＜0.05。

2.2 骨髓细胞学、WBC、SF 单独及联合运用的诊断结果

202 例AA 患者进行WBC、SF、细胞内铁单独检查后，结果分别为179 例阳性患者、23 例阴性患者；182 阳性患者、20 例阴性患者；181 例阳性患者、21 例阴性患者。198 例健康志愿者进行WBC、SF、细胞内铁单独检查后，结果分别为23例阳性患者、175 例阴性患者；26 例阳性患者、172 例阴性患者；22 例阳性患者、176 例阴性患者。202 例AA 患者均进行WBC、SF、细胞内铁联合检查后，结果显示有193 例阳性患者、9 例阴性患者，198 例健康志愿者进行WBC、SF、细胞内铁联合检查后，结果显示有11 例阳性患者、187 例阴性患者，见表2。

表2 三者单独及联合运用的诊断结果（例）

2.3 诊断价值

WBC 单独检测后诊断准确率为 88.50%（354/400），特异度为88.38%（175/198），灵敏度为88.61%（179/202）。SF 单独检测后诊断准确率为88.50%（354/400），特异度为86.87%（172/198），灵敏度为90.10%（182/202）。细胞内铁单独检测后诊断准确率为89.25%（357/400），特异度为88.89%（176/198），灵敏度为89.60%（181/202）。三者联合检测后诊断准确率为95.00%（380/400），特异度为94.44%（187/198），灵敏度为95.54%（193/202）。三者联合检测的诊断准确率、特异度、灵敏度均高于三者单独检测（P＜0.05）。

3 讨论

研究表明，AA 的发病机制主要包括骨髓微环境紊乱及造血干细胞缺乏等，而立新等[5]研究提出，遗传、免疫功能异常等因素也与AA 的发病息息相关。

目前，免疫抑制、粒细胞输注及促造血治疗作为临床用于治疗AA 的主要手段，其对于早期AA 患者的治疗效果较为理想，但难以满足重型AA 患者的治疗需求[6]。因此，探究AA 发病的最新生物学机制及相关生理生化指标，为AA 的临床诊疗打开新思路。

本研究结果显示，AA 患者的WBC 低于健康人群，表明WBC 的明显降低与AA 的发生存在一定联系。这可能与AA 患者体内WBC、造血干细胞的大量凋亡有关。Chao 等[7]的研究证实，AA患者的骨髓间充质细胞、中性粒细胞的细胞分裂间期停滞为G1 期，易出现WBC 明显下降的情况，与本研究结果一致。同时，Melguizo 等学者[8]发现，骨髓组细胞的端粒长度明显下降，且分化能力存在一定缺陷。而本次研究通过骨髓细胞铁测定发现，观察组SF 水平及细胞内铁含量明显低于对照组，而细胞外铁明显高于对照组，与苏永娟等学者[9]研究结果一致。推测原因在于血清SF作为铁元素的主要贮存方式，而铁元素是氧气运输的主要载体，当血清SF 明显下降时易导致血液系统功能紊乱，造成贫血。同时，细胞内铁多数存在于红细胞中，细胞外铁分布于骨髓小粒中，细胞内、外铁水平异常状态提示贫血的发生，但具体分子机制仍需进一步讨论。

本研究在骨髓细胞学、WBC、SF 联合检测的诊断价值分析中发现，三者联合检测的诊断准确率、特异度、灵敏度均高于三者单独检测，提示将三者联合运用于AA 的诊断中，具有更高的应用价值。而余祖辉等学者[10]的研究表明，骨髓细胞学、WBC、SF 联合诊断的符合率为93.41%、特异度与灵敏度分别为92.31%、93.41%，与本次研究结果基本相符。推测原因在于，单独运用WBC 检测在感染性、过敏性疾病与AA 的鉴别中缺乏特异性诊断。单一使用细胞内铁测定、血清SF 检查，难以区分AA 与其他类型贫血疾病，而三者联合检测在降低误诊率的同时，有效提高诊断的特异度和灵敏度，在一定程度上弥补单独检测的不足。

综上所述，骨髓细胞学、WBC、SF 联合检测在AA 的诊断中具有较高的应用价值，能显著提高诊断准确率，为临床诊疗提供可靠依据。