DHX32 mRNA 在肺癌组织中的表达情况及其临床意义

王友祥，尹向飞，梁小亮

（厦门医学院附属第二医院医学检验科，福建 厦门 361021）

肺癌是发病率及死亡率最高的恶性肿瘤，按照病理类型分为小细胞癌及非小细胞癌 （NSCLC），其中超过85%的肺癌为NSCLC［1］。多数肺癌患者的早期症状不典型，在确诊时已处于晚期，延误最佳治疗时机。近年来随着治疗手段的发展，肺癌患者的生存时间得以延长，然而部分患者预后仍较差，5年生存率较低［2］。随着人们健康意识的提高，目前癌症筛查较为普遍，但临床常用的标志物如癌胚抗原 （CEA）、 糖类抗原 （CA）19-9 等诊断肺癌的敏感度及特异性较差，临床亟需灵敏、 准确的标志物用于肺癌的早期诊断，以期改善疾病转归［3］。DHX32是一种解螺旋酶，已有研究［4］表明其在多种癌症患者中异常表达，并参与肿瘤的病理进展过程。本研究探讨DHX32 mRNA在肺癌组织中的表达情况及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年8月至2022年5月我院收治的285例肺癌患者为对象。纳入标准： ①病理检查诊断为肺癌； ②ECOG 活动状况评分表评分＜2 分； ③年龄≥18 岁； ④未接受放疗、 化疗、 免疫治疗等。排除标准： ①合并其他部位恶性肿瘤； ②严重心、 肝、 肾功能障碍； ③合并哮喘、 慢阻肺、 急性呼吸窘迫综合征等； ④妊娠期及哺乳期妇女； ⑤KPS 评分＜30分。285 例患者男性150 例，女性135 例；年龄38 ～75 岁，平均年龄 （63.78 ± 5.91） 岁。

1.2 方法 ①收集患者的基线资料如性别、年龄、 体质量指数、吸烟情况等，记录肿瘤位置、 病灶数目、 组织学类型、 病理分期及分化程度等。②RT-PCR 法检测肺癌患者的DHX32 mRNA相对表达量，用液氮研磨肺癌及癌旁组织，提取组织中总RNA，采用紫外分光光度计检测RNA 的纯度及浓度。取总RNA 4 μL，82 ℃水浴5 min 后加入反转录反应液，45 ℃孵育60 min，留取产物。扩增条件为： 95 ℃预变性5 min，95 ℃变性30 s，65 ℃退火15 s，70 ℃延伸30 s，42 个循环。DHX32 mRNA 正向： 5'-CTCTCACAGTTGAATGTCCTTG-3'； 反向： 5'-CTCCTTGTCAGCAGAATGAAG-3'。以GAPDH 为内参，正向：5' -TGACTTCAACAGCGACACCCA -3'； 反向： 5' -CACCCTGTTGCTGTAGCCAAA-3'。以GAPDH 为内参，用2-ΔΔCt表示DHX32 mRNA 相对表达量。

1.3 统计学分析 采用SPSS 23.0 统计软件处理数据。计数资料以n （%） 表示，采用χ2检验； 计量资料以±s 表示，采用t检验； 采用受试者工作特征 （ROC） 曲线分析DHX32 mRNA诊断肺癌的价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺癌组织及癌旁组织的DHX32 mRNA 相对表达量 肺癌组织中DHX32 mRNA 相对表达量为1.54 ± 0.26，高于癌旁组织的1.05 ± 0.20，差异有统计学意义 （t ＝25.218，P＜0.001）。

2.2 肺癌组织DHX32 mRNA 诊断肺癌的价值 DHX32 mRNA诊断肺癌的AUC 为0.837 （95%CI： 0.771 ～0.890），敏感度为76.67%，特异性为76.55%，最佳截断点为1.55。见图1。

图1 肺癌组织DHX32 mRNA 诊断肺癌的ROC 曲线

2.3 肺癌组织DHX32 mRNA 与临床病理特征的关系 DHX32 mRNA 与肺癌患者吸烟情况、 病灶数目、 组织学类型、 病理分期、 分化程度存在联系 （P＜0.05）。见表1。

表1 肺癌组织DHX32 mRNA 与临床病理特征的关系 （±s）

3 讨论

肺癌作为全世界发病率最高的癌症，早期明确诊断及预后评估仍缺乏准确、 灵敏的指标［5］。多数肺癌患者在临床中确诊时已处于中晚期阶段，丧失最佳治疗时机。随着人们获得疾病信息的渠道增多及健康教育的普及，人们对于癌症的早期筛查重视程度不断提高。CEA 及CA19－9 等指标作为常用的早期筛查指标，对肺癌的特异性较差，易出现漏诊或误诊等。因此，临床需探索新型、 有效的标志物用于肺癌的诊断。

DHX32 mRNA 是一类短的非编码RNA，主要发挥基因调控作用，参与多种癌症疾病的发生及发展过程。DHX32 mRNA在肿瘤组织中表达异常，而在正常组织中表达较少或不表达，且在个体间的差异较小，在诊断疾病方面具有较高的价值［6］。DHX32 mRNA 具有促进直肠癌细胞增殖、 侵袭的作用，并且过表达的DHX32 mRNA 可降低癌细胞对化疗药物的敏感性，增加癌细胞的抗药性［7］。此外，有研究［8］表明DHX32 mRNA可通过Wnt 信号通路调控下游血管内皮生长因子受体的表达，促进新生血管的形成，为肿瘤细胞的血行播散及转移奠定基础。目前关于DHX32 mRNA 在肺癌患者中的表达情况未有报道，因此本研究对其进行探究。本研究结果显示，肺癌患者癌组织的DHX32 mRNA 相对表达量高于癌旁组织，提示DHX32 mRNA 在肺癌组织中表达异常，或许可用于肺癌的早期诊断。为明确DHX32 mRNA 在肺癌诊断中的价值，本研究构建DHX32 mRNA 诊断肺癌的ROC 曲线，结果显示，DHX32 mRNA 诊断肺癌的AUC 为0.837，敏感度为76.67%，特异性为76.55%，提示DHX32 mRNA 在肺癌患者的诊断中价值较高。观察DHX32 mRNA 与肺癌患者病理特征的关系发现，DHX32 mRNA 与肺癌患者吸烟情况、 病灶数目、 组织学类型、 病理分期及分化程度等存在联系，表明随着肺癌患者的病情进展，DHX32 mRNA 表达增多，可为临床明确肺癌的严重程度提供参考。

综上所述，DHX32 mRNA 在肺癌患者中表达升高，检测其表达情况可用于肺癌的诊断及病情的评估。