白饭树水提物对小鼠佐剂性关节炎的作用

付 翔， 邓俊刚， 邓立东

(桂林医学院附属医院，广西桂林541001)

白饭树Fluggea virosa为大戟科白饭树属Flueggea植物，为广西壮民族药，以全株入药，苦、微涩，性凉，有小毒，具清热解毒、可治疗湿疹、脓疱疮、过敏性皮炎、疮疖及烧烫伤［1-2］等。近年来，中国大陆及台湾地区的学者对白饭树祛风除湿的生理及药理毒理活性关注程度越来越高，在这方面做了一些有益的研究［3］。本实验选择小鼠佐剂性关节炎模型观察白饭树根皮不同质量浓度水提取物的治疗作用，探索药物的作用机制，为临床合理用药提供实验信息。

1 实验材料

1.1 白饭树提取物 取白饭树500 g，用3000 mL水溶液煎煮3次，合并煎煮液，得浓缩液1800 mL，经浓缩蒸干得到的膏状物即为水提取物，称质量得28.24 g，每克提取物相当于17.70 g/g(生药/提取物)。实验时，用蒸馏水将提取物溶解并配制成相当于生药 0.5 g/mL、0.25 g/mL、0.125 g/mL 的受试液，备用。

1.2 试剂 醋酸地塞米松(山东鲁抗辰欣制药有限公司，批号07123120);0.9%氯化钠注射液(安徽双鹤药业有限责任公司);Freund‘s完全佐剂(sigma公司，批号:098k8729)。

1.3 仪器 调温电热套(巩义市予华仪器有限责任公司产品);旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);DZF-250真空干燥器(郑州长城科工贸有限公司);B2500S-M7超声波清洗器(必能信超声有限公司产品);HANGPING FA2004电子天平(上海精科天平仪器厂)。

1.4 动物 清洁级昆明种小鼠50只，体质量20～25 g，由广西医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证号:SCXK桂2003-0002。

2 实验方法

2.1 模型制备与实验治疗［4］小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别在其左后足趾皮下注射Freund’s完全佐剂0.1 mL，0.5 h 后灌胃给药［5］。A 组:0.9%氯化钠注射液;B组:白饭树10 g/kg;C组:5 kg/kg;D组:白饭树2.5 kg/kg;E组:地塞米松水溶液，每日1次，连续24 d，分别在第2、8、12、16、20、24天测量各组小鼠左后足体积，并计算肿胀体积(ΔMl)。第24天后处死小鼠，摘取脾脏及胸腺，称质量，计算免疫器官系数(脏器重/体质量)。

3 实验结果

3.1 对AA模型小鼠继发性足趾肿胀的影响 实验结果显示，白饭树高、中剂量灌胃均能明显抑制AA模型小鼠继发性足肿胀，与地塞米松治疗效果相当，低浓度效果不明显，结果见表1。

3.2 对AA小鼠胸腺与脾脏作用 白饭树水提取物高、中、低浓度三组胸腺系数(胸腺/体质量)均低于模型组，见表2。

表1 白饭树水提取物对AA小鼠继发性炎症反应的影响(± s，n=10)

表1 白饭树水提取物对AA小鼠继发性炎症反应的影响(± s，n=10)

注:与模型组比较，*P ＜0.05。

组别 给药前10 min/(ΔmL)给药后足趾肿胀体积/(ΔmL)第2天 第8天 第12天 第16天 第20天 第24天A 0.1183 ±0.0214 0.0738 ±0.0414 0.0824 ±0.0357 0.0825 ±0.0437 0.0645 ±0.0308 0.0628 ±0.0263 0.0642 ±0.0273 B 0.0730 ±0.0299 0.0655 ±0.0289 0.0730 ±0.0299 0.0563 ±0.0326 0.0508 ±0.0351 0.0431 ±0.0201* 0.0387 ±0.0372*C 0.1066 ±0.0217 0.0715 ±0.0243 0.0782 ±0.0170 0.0613 ±0.0183 0.0507 ±0.0262 0.0418 ±0.0213* 0.0393 ±0.0254*D 0.0950 ±0.0312 0.0685 ±0.0220 0.0662 ±0.0199 0.0633 ±0.0144 0.0590 ±0.0154 0.0585 ±0.0136 0.0557 ±0.0175 E 0.1005 ±0.0089 0.0585 ±0.0289 0.0622 ±0.0091 0.0553 ±0.0167* 0.0410 ±0.0107* 0.0420 ±0.0173* 0.0323 ±0.0111*

表2 白饭树水提取物对AA小鼠胸腺与脾脏作用(± s，n=10)

表2 白饭树水提取物对AA小鼠胸腺与脾脏作用(± s，n=10)

注:与模型组比较，*P ＜0.05。

地塞米松组胸腺/体质量(×10 －3) 1.99 ±0.09 1.05 ±2.21* 1.12 ±1.97* 1.34 ±2.09* 1.13 ±0.11组别 模型组 高质量浓度组A 中质量浓度组B 低质量浓度组C*脾/体质量(×10 －3) 2.51 ±0.12 1.30 ±0.59* 1.13 ±0.14* 1.24 ±0.40* 1.53 ±0.21*

4 讨论

4.1 用Freund’d完全佐剂诱发的关节炎继发病变是一种迟发型超敏反应(DTH)，其原理为BCG作为抗原进入机体使T细胞致敏(称急性炎症反应)，当再次接触抗原，致敏T细胞分化增殖，释放各种淋巴因子以及直接杀伤靶细胞，引起单核细胞浸润，同时由抗原抗体形成的免疫复合物激活补体，导致白细胞趋化激活［6］。释放一系列致炎因子产生局部和全身性炎症反应(称继发反应)。一般认为微生物感染及其抗原在类风湿性关节炎RA的发病机制中占主导地位，近年来证明细胞免疫更突出。在细胞免疫中T淋巴细胞对机体免疫稳定起着重要的调节作用。从本实验可看出，白饭树对胸腺和脾脏有抑制作用，减轻了AA小鼠的继发性足肿胀，这可能与药物的免疫调节有关，可进一步研究其细胞免疫调节机制。

4.2 从本实验的结果看，白饭树高、中质量浓度组的给药剂量对佐剂性关节炎小鼠的足肿胀有明显的抑制作用，低质量浓度组未显示明显的治疗效果，可以以此给药量来作为临床用药剂量参考依据。

4.3 白饭树是深藏于民间的一味中草药，它开发和利用的道路还有很长要走，在目前已有的研究中，药理研究方面仅以水煎剂、醇提物为报道［3，7］，研究还较粗浅，许多药理作用尚处于探索阶段，毒理研究更是空白。如能进一步加强其药理学研究，将其化学成分与药理作用、毒理作用研究结合起来，阐明其药效成分及其药理作用，一定能提高其应用价值。

［1］中国植物志编辑委员会.中国植物志［M］.北京:科学出版社，1997:68-72.

［2］中华本草编委会.中华本草［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:858-859.

［3］许实波，王正濂，赵金华，等.白饭树水提物对实验性肝损伤的保护作用［J］.中山大学学报论丛，1994，(6):54-57.

［4］周 健，丁长海，徐叔云，等.口服Ⅱ型胶原治疗大鼠佐剂性关节炎的研究［J］.中国药理学通报，1999，15(5):478.

［5］徐淑云，卞如濂，陈 修，等.药理实验方法学［M］.北京:人民卫生出版社，2006:920.

［6］王莘智，范伏元，贺选玲.当归多糖对佐剂性关节炎足趾肿胀值及小鼠醋酸作用扭体反应的实验研究［J］.中国免疫学杂志，2008，24(10):891-895.

［7］Tatematsu H，Mori M，Yang TH，et al.Cytotoxic principles of Securinega virosa:Virosecurinine and viroallosecurinine and related derivatives［J］.J Pharm Sci，1991，80(4):325-327.