平胃散及其组方药材挥发油的化学组成与大鼠胃排空促进作用

惠 娜， 魏玉辉， 陈 明， 张建强， 刘 纯， 武新安*

(1.兰州大学第一医院药剂科，甘肃兰州730000;2.兰州大学药学院，甘肃 兰州730000;3.兰州大学第一医院核医学科，甘肃兰州730000)

平胃散源于《太平惠民和剂局方》卷之三，由苍术Atractylodes Iancea(Thunb.)DC.、厚朴 Magnolia officinalis Rehd.et Wils.、陈皮 Citrus reticulate Blanco和甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch四味药材组成，具有燥湿运脾，行气和胃之功效，主要用于慢性胃炎、消化道功能紊乱、胃及十二指肠溃疡等属湿滞脾胃者的治疗［1］。王学清等［2］研究了平胃散水煎液对大鼠胃排空的影响，结果表明:平胃散可促进大鼠胃排空，其作用机理可能是通过兴奋胆碱能系统而发挥作用的。平胃散作为传统中药芳香剂的典范，苍术、厚朴、陈皮均含有相对较高的挥发油，因而推测挥发性成分对平胃散的胃排空作用可能有较大贡献。虽然龚范等［3-4］对平胃散组方中单味药材苍术、厚朴的挥发油成分进行了分析，但到目前为止，关于平胃散挥发油对胃排空有无影响及其化学组成尚未见报道。因此，本实验主要研究平胃散及其单味药挥发油是否影响大鼠胃排空以及它们的化学组成。

单光子发射计算机断层扫描技术(Single photo emission computed tomography，SPECT)是一种核医学影像诊断技术，通过给大鼠灌胃给予核素标记药物，定时检测大鼠胃中核素标记药物的残留量即可实现对受试药物胃排空作用的评价［5-6］。本研究通过大鼠灌胃平胃散组方及其单味药材的挥发油一定时间后，给予核素标记药物锝［99mTc］喷替酸盐注射液(pentetate acid and stannous chloride for injection，99mTc-DTPA)后采用SPECT进行扫描检测，通过软件计算获得各组药物的促进胃排空作用。

1 材料与动物

1.1 仪器与药品 Finnigan Trace GC–MS系统(Finnigan，Boston，MA，USA);DB-5MS毛细管柱(30 m ×0.25 mm ×0.25 μm，CA，USA);SPECT(Infinia VC Hawkeye 4，GE，A-merica，);苍术、陈皮、厚朴及甘草由兰州大学第一医院中药房提供，由兰州大学药学院马志刚教授进行鉴定;吗丁啉(西安杨森制药，批号090916243);锝［99mTc］喷替酸盐注射液(江苏省原子医学研究所江原制药厂);无水硫酸钠(天津凯通化学试剂厂)。

1.2 实验动物 雄性Wistar大鼠(220～250 g)购自甘肃中医学院实验动物中心(合格证号SCXK(甘)2004-0006)，实验期间水、饲料自由饮取。所有动物实验均依照实验动物管理规范进行实施，同时征得兰州大学实验动物伦理委员会的同意。

2 方法

2.1 挥发油的提取 分别称取平胃散处方药材(苍术15 g，厚朴 9 g，陈皮9 g，甘草6 g)156 g、苍术100 g，厚朴100 g，陈皮100 g，甘草100 g切成碎片后装入1000 mL圆底烧瓶，加700 mL水采用水蒸气蒸馏法进行挥发油提取，所得挥发油分别采用无水硫酸钠干燥处理后采用GC-MS进行分析。

2.2 挥发油 GC-MS分析及化合物鉴别 采用Finnigan Trace GC– MS(Finnigan，Boston，MA，USA)系统进行分析，DB-5MS毛细管柱用于化合物的分离(30 m×0.25 mm×0.25 μm，CA，USA)。样品解吸附后柱温于40℃保持2 min后以15℃/min升温速度加热至250℃，然后样品于250℃保持9 min。载气为氦气，体积流量为1.2 mL/min，分流比1∶30。质谱仪采用EI电离源，激发电流200 μA、电离能70 eV，传输线温度250℃，接口温度220℃，扫描范围33～650(m/z)。

2.3 大鼠胃排空实验 雄性Wistar大鼠在实验条件下饲养3 d后随机分为8组，每组5只。阳性对照组灌胃给予吗丁啉2 mg/(kg·d);平胃散挥发油给予低中高［2、10、25 mg/(kg·d)］3个剂量;苍术挥发油组给予2 mg/(kg·d);厚朴挥发油组给予2 mg/(kg·d);陈皮挥发油组给予2 mg/(kg·d);阴性对照组给予同等体积的牛奶。以上所有药品首先分散于3%Tween-80后分散于牛奶中。连续灌胃给药6 d(每日1次)，第6天禁食(24 h)不禁水，于第7天在含药物的牛奶中加入0.05 mCi99mTc-DTPA灌胃后立即采用SPECT(Infinia VC Hawkeye 4，GE，America，仪器条件:采用低能高分辨率针孔型探头，放大倍数Zoom:3.0，采集时间20 s/帧)在0、5、10、15、20、30、40、50 min 和 60 min 时刻对大鼠胃内锝残留量进行测定，通过线性拟合得到每只大鼠的全胃半数胃排空时间GE T1/2(gastric emptying)。

2.4 统计分析 采用SPSS12.0软件包进行单向方差分析(ANOVA)和Tukey-Kramer多组对比分析，以P＜0.05有统计学意义，P＜0.01具有显著性差异;P＞0.05无统计学意义。所有数据均以±s表示。

3 结果

3.1 挥发油化学组成分析 采用水蒸气蒸馏法对平胃散及其组成药材的挥发油进行提取，采用GC-MS进行分离鉴定，结果表明:平胃散挥发油中主要含有β-桉叶醇(β-Eudesmol，37.79%)、茅术醇(Hinesol，27.88%)、D-柠檬烯(D-limonene，15.02%)、沉香螺醇(Agarospirol，4.12%);苍术挥发油中主要含有 β-桉叶醇(45.66%)、茅术醇(39.58%);厚朴挥发油中主要含有 β-桉叶醇(46.69%)、Eudesuma-4(-)en-11-ol(13.44%)、氧化石竹烯(Caryophyllene oxide，10.02%)、(-)-Humulene eposideⅡ(3.26%);陈皮挥发油中主要含有D-柠檬烯(77.67%)、β-桉叶醇(3.23%);甘草挥发油量极低，主要含有 β-桉叶醇(20.44%)、茅术醇(12.49%)、2-甲基戊醛(3.08%)。

3.2 挥发油促进大鼠胃排空作用 按2.3项的方法操作，以牛奶为阴性对照、吗丁啉为阳性对照，对平胃散挥发油(高、中、低3个剂量组)，苍术、厚朴及陈皮挥发油进行大鼠胃排空作用实验研究。各受试药物组、阳性、阴性对照组大鼠采用SPECT技术获得的GE T1/2平均值见表1。从表1可见，与阴性对照组相比，平胃散挥发油高中低剂量组、厚朴挥发油组、陈皮挥发油组大鼠半数胃排空时间明显缩短(P＜0.01)，说明平胃散挥发油、厚朴挥发油及陈皮挥发油均对大鼠胃排空具有促进作用;平胃散挥发油高剂量组与阳性对照组比无统计学意义(P＞0.05)，表明高剂量平胃散挥发油促进大鼠胃排空作用与吗丁啉相似;苍术挥发油组与阴性对照组无统计学差异(P＞0.05)，表明苍术挥发油对正常大鼠胃排空无明显影响。

表1 药物促进大鼠胃排空作用实验结果(±s，n=5)

表1 药物促进大鼠胃排空作用实验结果(±s，n=5)

注:与阴性对照组比:＊＊P＜0.01;与阳性对照组比:#P＜0.05;与挥发油高剂量组比:▲P＜0.05。

分组 剂量 GE T1/2/min 25 mg/(kg·d) 23.15 ±2.21＊＊平胃散挥发油组 15 mg/(kg·d) 28.10 ±3.48＊＊#▲2 mg/(kg·d) 37.57 ±4.16＊＊#▲苍术挥发油组 2 mg/(kg·d) 54.89 ±5.22#厚朴挥发油组 2 mg/(kg·d) 35.18 ±4.31＊＊#陈皮挥发油组 2 mg/(kg·d) 32.01 ±1.87＊＊#阳性对照组(吗丁啉组) 2 mg/(kg·d) 22.13 ±2.39＊＊阴性对照组(牛奶组) 10 mL/(kg·d)58.06 ±6.14

4 讨论

通过对挥发油化学组成进行分析，可以发现平胃散挥发油中β-桉叶醇的量(37.79%)最高，且该成分在苍术挥发油(45.66%)、厚朴挥发油(46.69%)及甘草挥发油(20.44%)中量都非常高，而在陈皮挥发油中仅含3.23%，由于甘草中挥发油含量极低，因此，平胃散挥发油中的β-桉叶醇主要来源于苍术、厚朴。平胃散挥发油中另一重要组分茅术醇(27.88%)主要来源于苍术(39.58%)，而厚朴中不含该成分，陈皮中量较低(1.22%)，甘草挥发油中虽然该组分量较高(12.49%)，但由于甘草中挥发油量极低，且其在处方中比例较少，因而其对茅术醇量贡献亦非常小。平胃散挥发油中第3个量较高的组分为D-柠檬烯(15.02%)，该组分主要来源于陈皮(77.67%)。综上所述，β-桉叶醇、茅术醇和D-柠檬烯占平胃散总挥发油的80.69%，代表了平胃散总挥发油的主要化学组成信息，说明平胃散挥发油化学组成主要来源于苍术、厚朴和陈皮。

由于甘草挥发油量很低，实验未对甘草挥发油进行胃排空作用考察。由表1可见:灌胃给予不同剂量平胃散挥发油后，与阴性对照组相比均显著促进大鼠胃排空(P＜0.01)，且呈剂量依赖性。苍术虽为平胃散的君药，但其挥发油对正常大鼠胃排空与阴性对照组无差异(P＞0.05)，这一结果与Zhang等［7］研究结果一致，但 Zhang等［7］的研究也发现苍术挥发油对压力诱导的胃功能低下大鼠的胃排空具有很好的促进作用，由此提示，有必要进一步探讨君药苍术挥发油在病理情况下对胃排空的影响。β-桉叶醇、茅术醇和D-柠檬烯占平胃散总挥发油的80.69%，推测它们对胃排空有较大贡献，但这3种主要成分对胃排空的强度如何以及它们之间是否存在协同或拮抗作用有待于进一步探讨。

SPECT是一种可以对发射单光子的核素标记探针在人体内分布进行成像的技术。本实验通过使用SPECT技术，准确地计算出了半数胃排空时间，表明SPECT是一种非常有效的可辅助用于胃排空测定的技术。

［1］巢因慈，郁觉初.论平胃散的组方特点及其临床运用［J］.南京中医药大学学报，1995，11(2):29-30.

［2］王学清，张卫卫，李 岩.平胃散对大鼠胃排空影响的实验研究［J］.世界华人消化杂志，2002，10(6):719-720.

［3］龚 范，宋又群，彭源贵，等.平胃散中苍术挥发油的GC/MS分析［J］.药学学报，2000，35(5):394-396.

［4］龚 范，梁逸曾，宋又群，等.平胃散挥发性成分的研究(Ⅱ)——厚朴挥发油的 GC/MS分析［J］.高等学校化学学报，2001，22(9):1481-1485.

［5］Fox M，Schwizer W，Fried M.The analysis of gastric volume measurement by SPECT:gastric structure vs.function［J］.Gastroenterology，2005，128:1533-1534.

［6］严 祥，刘 纯，刘永铭，等.胃排空延迟与胃中间横带关系及作用机制研究［J］.兰州大学学报:医学版，2007，33(3):1-4.

［7］Zhang Hong，Han Ting，Sun Lian-Na，et al.Regulative effects of essential oil from Atractylodes lancea on delayed gastric emptying in stress-induced rat［J］.Phytomedicine，2008，15:602-611.