混合提取对颈复康制剂中川芎挥发油提取率的影响

张立国， 张 超， 王春民， 杨宇杰， 倪力军*

(1.华东理工大学 化学与分子工程学院，上海200237;2.承德颈复康药业集团有限公司，河北 承德067000;3.承德医学院，河北承德067000)

很多中药复方中将多种药材混合提取挥发油入药，如颈复康制剂中将川芎、羌活、苍术、乳香、没药按照一定比例混合后采用水蒸气蒸馏工艺提取挥发油入药［1］。川芎是颈复康制剂中的君药，其挥发油是川芎的主要活性成分，其中藁苯内酯含量最高，具有解痉扩血管等作用［2-3］，对于颈复康制剂的主治功效有重要贡献。研究表明，对于挥发油含量偏低(0.3% ～0.5%)的川芎药材，水蒸气蒸馏工艺存在挥发油得率低，提取时间长等缺陷［4］。而川芎与其它药材混合提取，其挥发油成分数目及量均会有所减少［5］。本实验采用提取-共沸精馏耦合工艺［6］，将川芎单独提取，川芎、羌活两味药材混合提取以及川芎、羌活、乳香、没药、苍术五味药材混合提取，并对不同混合方式制备的挥发油中川芎药材的特征物质藁苯内酯量进行了分析，以考察药材混合提取对川芎挥发油提取率的影响。

1 材料与仪器

1.1 材料 川芎、羌活、没药、乳香和苍术五味药材(承德颈复康药业集团有限公司提供)。甲醇，色谱纯，(德国Merck公司)。

1.2 仪器 Agilent 7890A/5975C气-质联用仪;Agilent 7683B自动进样器;软件:MSD化学工作站，带NIST 05 MS谱库。

2 方法

2.1 挥发油提取方法 采用提取-共沸精馏耦合工艺，该装置工艺原理及特点见文献［4］，控制药材总质量为200 g，将药材进行适当粉碎并浸泡12 h后加入圆底烧瓶中，加入5倍于药材总质量的水即1L，连续回流提取9 h。

2.2 挥发油样品的配制 取25 μL的挥发油样品，转移至10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度线，待测。

2.3 GC-MS测试条件 气相色谱条件:HP-5 MS(30 m×0.25 mm ×0.25 μm)毛细管柱;分流进样，分流比为 20 ∶1;程序升温60℃(3 min)，以16℃/min的速率升至300℃，保持6 min;进样口温度:250℃;载气为氦气，体积流量1 mL/min;EI离子源，电子能量为70 eV，离子源温度220℃，质量扫描范围33 ～550 amu;进样量 0.2 μL。

2.4 单位质量川芎药材的藁苯内酯提取率计算 在一定的浓度范围内和相同GC-MS测试条件下，川芎挥发油的特征物质藁苯内酯的色谱峰面积与藁苯内酯的质量成正比。

V工艺为每种工艺对应的挥发油体积，V进样为进样体积，S工艺为V工艺对应的藁苯内酯的峰面积，S进样为V进样对应的藁苯内酯的峰面积，

单位质量川芎药材对应的藁苯内酯峰面积记为A工艺，M药材为川芎药材的质量，单位取g，

单位质量川芎药材的藁苯内酯相对提取率yi

其中A工艺5为五味药材混合提取时单位质量川芎药材所对应的藁苯内酯峰面积，A工艺i为川芎药材单独提取和两味药材混合提取时单位质量川芎药材所对应的藁苯内酯峰面积。

3 结果与讨论

3.1 挥发油提取结果 按照2.1项中所述方法分别提取川芎，川芎-羌活两味药材混合，川芎、羌活、乳香、没药、苍术五味药材混合，苍术、羌活、乳香、没药四味药材混合的挥发油，将收集到的挥发油分别记录为 CHX1，CHX2，CHX5，Blank，所得挥发油的体积见表1。

表1 不同药材组合所提取挥发油的体积

3.2 GC-MS 测试结果

3.2.1 挥发油样品的总离子流图 取配好的CHX1、CHX2、CHX5、Blank甲醇溶液，按照2.3项测试条件进行气质分析，对应的总离子流图见图1。

图1 挥发油样品总离子流图

通过MSD化学工作站检索NIST 05 MS谱库，并结合有关文献［7-8］藁苯内酯质谱图，对图谱进行解析，在3种制备方式所得的川芎挥发油样品中，均检索到藁苯内酯，藁苯内酯质谱图见图2，而在空白样品的挥发油样品中，未检索到藁苯内酯。

为了便于观察，我们截取藁苯内酯出峰时间段的总离子流图，并将不同制备方法和空白样对应的挥发油总离子流图放在一起，从图3上可以看到，羌活、苍术、乳香、没药四味药材混合提取的挥发油在藁苯内酯出峰位置没有响应，对其藁苯内酯出峰时间附近的峰进行了质谱分析，也没有检索到藁苯内酯，因而排除了其它四味药材的干扰，为准确计算藁苯内酯出峰面积奠定了基础。

图2 藁苯内酯质谱图

3.2.2 单位质量川芎药材的藁苯内酯提取率 通过化学工作站，记录下藁苯内酯出峰时间，并对将藁苯内酯的峰面积进行积分，参照2.4项公式，计算单位质量川芎药材的藁苯内酯提取率y，结果见表2。

图3 藁苯内酯出峰时间段挥发油样品的总离子流图

表2 GC-MS测试下不同药材组合单位质量川芎药材的藁苯内酯提取率

由表2中可知单位质量川芎药材的藁苯内酯提取率大小排列顺序为，CHX1＞CHX2＞CHX5，川芎药材单独提取时藁苯内酯提取率是五味药材混合提取的3.2倍，是二味药材混合提取的1.4倍，该结果表明单独提取川芎药材能充分提取出其有效活性成分藁苯内酯，川芎与其它药材混合不利于藁苯内酯的提取，且随着混合药材种类的增加，藁苯内酯提取率下降。

藁苯内酯提取率计算公式(1)-(4)中假设藁苯内酯的色谱峰面积与藁苯内酯的质量成正比，是在一定质量浓度范围内成立的。为此我们根据3种提取方式对应的藁苯内酯峰面积，配制了同一川芎挥发油不同浓度的样品，使其藁苯内酯峰面积变化范围将3种提取方式对应的藁苯内酯峰面积包含在内。按照2.3项测试条件进行气质分析，将藁苯内酯峰面积对样品浓度作图(见图4)，可知藁苯内酯峰面积与川芎挥发油浓度的线性相关系数为0.996，由此表明在3种提取方式对应的藁苯内酯含量范围内，藁苯内酯的色谱峰面积与其质量线性关系良好，本文采用的藁苯内酯提取率公式误差较小，可以良好的体现出混合提取对颈复康制剂中藁苯内酯提取率的影响。

图4 藁苯内酯色谱峰面积与川芎挥发油质量浓度的关系

4 结论

与川芎混合提取的药材种类越多，川芎挥发油中的主要成分藁本内酯的提取率越低。川芎挥发油单独提取更有利于其活性成分的提取。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版一部［S］.北京:化学工业出版社，2005:624.

［2］石力夫，郑晓梅，蔡 溱，等.藁本内醋分解前后川芎挥发油对兔球结膜微循环影响的比较［J］.中国药理学与毒理学杂志，1995，(9):157.

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［5］李晓如，周 涛，梁逸曾，等.药对川芎-羌活与其单味药挥发油共有组分的分析［J］.药学学报，2007，42(10):1082-1086.

［6］倪力军，罗建群，张立国，等.挥发性成分提取装置及其提取方法:中国，CN102174148A.10［P］.2008-10-03.

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