CRP水平及基因多态性和急性心肌梗死发病风险的关系＊

杨海涛，何国平△，戚传平，许联红，钱亿超

（江苏大学附属武进医院：1.心血管内科；2.中心实验室，江苏常州213002）

血清C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）不仅是急性炎症反应蛋白，而且与很多疾病的发病有着密切关系［1］。近年来，有报道表明，遗传因素影响血清CRP水平，本文就血清CRP水平与急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）发病风险和CRP基因C＋1444T多态性的相关性进行探讨，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2009～2010年江苏大学附属武进医院心内科住院患者328例，分为AMI组和对照组。AMI组：AMI患者227例，男167例，女60例，年龄31～99岁，平均（63.76±11.65）岁，均符合2002年美国心脏病学会（AHA／ACC）关于AMI的诊断标准；对照组：经冠状动脉造影检查证实冠状动脉无狭窄者161例，男80例，女81例，年龄29～84岁，平均（57.68±10.01）岁。所有入选者均为中国苏南地区汉族人群，均排除严重肝、肾功能不全、肿瘤、风湿类疾病和急性或严重慢性感染者。该研究经本院医学伦理委员会批准，并征得所有入选对象知情同意。

1.2 方法

1.2.1 CRP基因C＋1444T多态性检测 检测方法参照本中心既往研究［1］。

1.2.2 血清CRP水平检测 采集研究对象空腹静脉血5 mL，室温下静置0.5～1h，离心后留取上层血清，-70℃冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附试验测定血清中CRP的含量。

1.3 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行统计分析。正态分布计量资料用±s表示，采用t检验；偏态分布资料用中位数／四分位数间距（M／IQR）表示，采用 Wilcoxon秩和检验；基因型频率与Hardy-Weinberg平衡的符合程度和分类变量比较采用χ2检验；CRP基因C＋1444T多态性和血清CRP水平与AMI发病风险的相关性均采用Logistic回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 临床一般特征比较 与对照组相比，AMI组年龄较大，男性、吸烟者、高血压者和糖尿病者所占比例较高，血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平较高（表1）。

2.2 CRP基因C＋1444T基因型鉴定 PCR扩增产物为460 bp的特异性片段。酶切后，理论上应显示3种基因型：CC纯合型（311bp和149bp）、CT杂合型（460bp、311bp和149bp）和TT纯合型（460bp），但本研究人群未发现TT纯合型（图1）。

表1 两组患者临床一般特征比较

图1 CRP基因C＋1444T多态性PCR产物酶切电泳图

2.3 CRP基因C＋1444T多态性分布及其与AMI发病风险的相关性 本研究人群经χ2检验符合Hardy-Weinberg遗传平衡规律（P＞0.05），具有群体代表性。CRP基因C＋1444T的CC、CT和TT基因型频率在AMI组中分别为82.38%、17.62%和0%，在对照组中分别为86.96%、13.04%和0%；C和T等位基因频率在AMI组中分别为91.19%和8.81%，在对照组中分别为93.48%和6.52%；两组间基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示，CRP基因C＋1444T多态性与AMI的发病风险无显著相关性（表2）。

表2 CRP基因C＋1444T多态性分布及其与AMI发病风险的关系［n（%）］

2.4 血清CRP水平（M／IQR）及其与AMI发病风险的相关性 AMI组的血清CRP水平显著高于对照组（5.974／6.256μg／mL vs.3.271／1.292μg／mL），差异有统计学意义（P＜0.01）。且以年龄、性别、吸烟史、高血压史、糖尿病史、TC、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）和LDL-C为自变量的Logistic回归分析显示，CRP水平升高与AMI的发病密切相关（OR 1.955，95%CI1.169～3.270，P＜0.01）。

2.5 CRP基因C＋1444T多态性与血清CRP水平（M／IQR）的关系 AMI组和对照组的CRP基因C＋1444T位点CC和CT基因型之间血清CRP水平差异均无统计学意义，经Logistic回归分析显示，两组的血清CRP水平与CRP基因C＋1444T多态性均无显著相关性（表3）。

表3 CRP基因C＋1444T位点CC和CT基因型之间血清CRP水平比较（M／IQR，μg／mL）

3 讨 论

炎症被认为有助于增加心血管疾病的风险，而CRP是天然免疫系统中的重要组成部分，在炎症或组织损伤发生后急剧升高，可达到平时的100～1 000倍，它在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用，被视为炎症标志物。

近年来，CRP基因多态性与冠心病的关系越来越多地受到研究人员的重视。Miller等［2］以美国人为研究对象，发现CRP基因C＋1444T多态性与心肌梗死或缺血性事件无相关性。Wang等［3］的结论与上述一致。本研究人群未检出TT纯合子，这与PUBMED SNP数据库公布的北京、日本和非洲健康人群数据以及国内报道［4-5］结果相符合；且未发现CRP基因C＋1444T多态性与AMI的发病风险有显著相关性，与国外研究结论一致。

有研究表明，在急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）尤其是新发病的患者中，血清CRP水平显著增高［6］。本研究进一步验证了上述结论，即AMI患者血清CRP水平显著高于无冠状动脉狭窄的非冠状动脉性心脏病（CAD）者，多因素分析显示CRP水平升高与AMI的发病密切相关。

那么，CRP基因C＋1444T多态性与血清CRP水平是否存在相关性呢？有研究表明，遗传因素对血清CRP水平所起的作用可达35%～40%［7］。＋1444C＞T与-286C＞T＞A存在强的连锁不平衡［2］，而-286C＞T＞A位于启动序列，为功能性多态性位点，通过转录机制可影响血清CRP水平，因此推测，血清CRP水平也可能受＋1444C＞T基因多态性的影响，从而参与AMI的发展。但是，目前国内外相关报道结论不尽一致。国外的研究中，Shakhnovich等［8］通过对俄罗斯232例AMI患者与159例健康人的研究证实CRP基因C＋1444T多态性TT纯合子比C等位基因携带的血清CRP水平高。而对2个前瞻性队列研究的美国女性（护士健康研究）和男性（卫生保健人员健康随访研究）［9］以及欧洲6个城市的1 003例AMI患者［10］的研究结论未发现CRP基因C＋1444T多态性和血清CRP水平有相关性。国内朱名安等［11］对250例健康体检者研究发现，C＋1444T位点TT、CT、CC 3种基因型携带者血清CRP水平存在明显差异，以TT型携带者血清CRP水平最高。而Yan等［12］在中国汉族人群128例冠心病患者和119例健康人中均未检测出C＋1444T位点TT型，且发现CC携带者的血清水平较高。本研究发现，AMI组与对照组的CRP基因C＋1444T位点CC和CT基因型之间血清CRP水平差异均无统计学意义，表明该研究人群AMI患者和无冠脉狭窄的非CAD者血清CRP水平均不受CRP基因C＋1444T多态性的影响。鉴于目前相关研究结论的不同，本中心将继续扩大样本量，结合多地区人群做进一步研究。

［1］何国平，戚猛，高磊，等.CRP基因C＋1444T多态性与中国苏皖地区汉族人群ACS的易感性无关［J］.南京医科大学学报，2011，31（4）：522-525.

［2］Miller DT，Zee RY，Suk Danik J，et al.Association of common CRP gene variants with CRP levels and cardiovascular events［J］.Ann Hum Genet，2005，69（6）：623-638.

［3］Wang Q，Hunt SC，Xu Q，et al.Association study of CRP gene polymorphisms with serum CRP level and cardiovascular risk in the NHLBI family heart study［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2006，291（6）：2752-2757.

［4］赵磊，周新，郑芳，等.冠心病患者C反应蛋白C＋1444T基因多态性的研究［J］.中国老年学杂志，2005，25（6）：637-640.

［5］刘志忠，吕虹，方芳，等.C反应蛋白基因C＋1444T多态性与缺血性脑卒中的相关分析［J］.中国实验诊断学，2009，13（5）：609-612.

［6］Suk DJ，Chasman DI，Cannon CP，et al.Influence of genet-ic variation in the C-reactive protein gene on the inflammatory response during and after acute coronary ischemia［J］.Ann Hum Genet，2006，70（6）：705-716.

［7］Pankow JS，Folsom AR，Cushman M，et al.Familial and genetic determinants of systemic markers of inflammation：the NHLBI family heart study［J］.Atherosclerosis，2001，154（3）：681-689.

［8］Shakhnovich PM，Sukhinina TS，Barsova RM，et al.Polymorphism C＋1444Tof C-reactive protein gene and C-reactive protein concentration in blood serum of healthy people and patients with myocardial infarction［J］.Kardiologiia，2010，50（8）：4-12.

［9］Pai JK，Mukamal KJ，Rexrode KM，et al.C-reactive protein（CRP）gene polymorphisms，CRP levels，and risk of incident coronary heart disease in two nested case-control studies［J］.PLoS One，2008，3（1）：1395.

［10］Kolz M，Koenig W，Müller M，et al.DNA variants，plasma levels and variability of C-reactive protein in myocardial infarction survivors：results from the AIRGENE study［J］.Eur Heart J，2008，29（10）：1250-1258.

［11］朱名安，周有利，吕军，等.C反应蛋白基因多态性1444C＞T与血清CRP水平的相关性分析［J］.郧阳医学院学报，2007，26（1）：13-15.

［12］Yan M，Zhao L，Zheng F，et al.The relationship between gene polymorphism and CRP level in a Chinese Han population［J］.Biochem Genet，2007，45（1／2）：1-9.