胃腺癌组织中神经纤毛蛋白1、2的表达及意义

史 璇 张 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(锦州医科大学附属第一医院消化内科三病区，辽宁 锦州 121000)

胃腺癌是由胃黏膜上皮来源的恶性肿瘤，病变形成中可以表现为上皮细胞异型增生，进而形成肿瘤〔1〕。神经纤毛蛋白(NRP)1和2是非酪氨酸依赖性激酶，是Ⅲ型Semaphorin分子与血管内皮生长因子家族分子共享的跨膜信号传导受体，在肿瘤的形成和进展中有重要作用，尤其是肿瘤血管形成过程中的作用更明显〔2,3〕。本实验检测胃腺癌中NRP1和NRP2的表达，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年1月至2016年10月锦州医科大学附属第一医院经病理学确诊为胃腺癌，并行手术治疗的患者共94例为观察组，留取临床资料及术后蜡块组织，年龄46～87岁，平均62.6岁，其中男54例，女40例。均符合WHO中的诊断标准。排除标准：①多原发癌患者；②术前行放、化疗；③有胃手术史。上述患者距肿瘤边缘>3 cm的非肿瘤性胃黏膜组织21例为对照组，年龄47～79岁，平均60.4岁，其中男11例，女10例。两组年龄、性别无明显差异。

1.2NRP1和NRP2检测 均基于术后石蜡包埋的组织，切取4 μm切片置于胶片上，采用免疫组化SP法检测，严格按实验的说明书操作，二氨基联苯胺(DAB)显色，减少误差，做好质控工作。

1.3NRP1和NRP2结果的判定 NRP1和NRP2阳性表达部位是细胞质和细胞膜，以呈现棕黄色-褐色为阳性反应细胞，采用阳性细胞百分率和细胞染色强度之和进行评定。着色强度评分：0分，无显色；1分，棕黄色；2分，棕褐色。阳性细胞百分比：每张切片选择5个热点区(400倍视野)计数阳性率，取其平均值；0分，<10%；1分，10%～50%；2分，>50%。上述两项相加即为最终评分结果，以0～2分定为阴性，以>2分定为阳性。以阳性率进行评定。

1.4统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行χ2检验及线性相关分析。

2 结 果

2.1两组NRP1和NRP2阳性率比较 两组NRP1和NRP2阳性率差异显著(P<0.01)。见表1。

表1 两组NRP1和NRP2阳性率的比较〔n(%)〕

2.2观察组不同临床特征中NRP1和NRP2阳性率的比较 NRP1和NRP2表达的阳性率与肿瘤脉管累犯和淋巴结转移密切相关，NRP1表达的阳性率与肿瘤的浸润深度密切相关。二者均与性别、年龄及分化程度无相关性。见表2。

表2 观察组不同临床特征中NRP1和NRP2阳性率的比较〔n(%)〕

2.3观察组中NRP1和NRP2表达的相关性 NRP1和NRP2表达呈正相关(r=0.49，P=0.036)。

3 讨 论

胃癌病变的形成与癌基因密切相关，主要表现为其高表达时的促癌生长的作用。多种癌基因在作用过程中与血管生成有一定相关性〔4〕。NRP1和NRP2在肿瘤中的表达升高，具有癌基因样的作用，二者在结构上有47%的同源性，在胚胎神经系统及许多成人组织中的表达尽管有重叠，但是在配体、调节特性上均有明显不同〔5,6〕。NRP1的胞外区有3个不同的结构域，分别称为a1/a2、FV/FV Ⅲ(b1/b2)和MAM(c)，其跨膜区及短的胞质区归入d结构域。a1/a2、FV/FV Ⅲ(b1/b2)是NRP1与配体结合的位点，MAM(c)对NRP传导及配体的信号很重要〔7〕。NRP2由17个外显子和16个内含子组成，其序列高度保守，由胞外区、跨膜区及短的胞内区组成，其胞内区很短，一般不作为独立的受体传递信号〔8〕。NRP2有与配体Semaphorin结合的位点〔9〕。NRP1和NRP2均为多功能受体，作为 Semaphorin和血管内皮生长因子(VEGF)的协同受体，有着较为广泛的生物学功能，尤其是在神经系统发育、血管形成、淋巴管生成、上皮间质转化和肿瘤进展中起着至关重要的调节作用〔10,11〕。

本研究结果提示NRP1和NRP2二者表达升高可以促进胃癌的形成，二者在胃癌生成过程中具有癌基因样的作用。NRP1和NRP2二者参与肿瘤的脉管侵犯和肿瘤的转移过程。NRP1高表达预示着肿瘤对周围组织的侵袭能力明显增强。NRP1和NRP2二者具有协同作用。胃腺癌发生后主要形态学表现是细胞异型增生并引发的肌层浸润性生长，这也是NRP1和NRP2高表达促进肿瘤生长的重要蛋白异常因素。NRP1和NRP2主要分布在细胞质中，存在着基因转录、转录后水平翻译、翻译后修复等多种调节过程。不同的调节失控能使NRP1和NRP2的动态平衡发生改变〔12〕。NRP1和NRP2可以促进细胞的增殖和生长，使肿瘤细胞繁殖能力明显增高，使血管生成明显，肿瘤旺炽性增生，肿瘤体积增大，肿瘤细胞生长及侵袭能力明显增强〔13,14〕。NRP1和NRP2能与VEGF结合在脉管的出芽生长上起着重要作用。有研究通过应用NRP1和NRP2的特异性抗体阻断VEGF与NRP2的结合，显示其可以抑制淋巴管的出芽生殖〔15,16〕，而且在对VEGF的应答中，是通过增强 VEGF受体3的作用进而调节淋巴管生成因子的，进而对淋巴管出芽生殖信号进行转导〔17〕。NRP1和NRP2调节肿瘤生长的作用及调节肿瘤脉管生成的作用可能更趋于复杂，需要更多的基础研究明确。

综上，胃腺癌术后组织中NRP1和NRP2表达增高对肿瘤性病变的形成和进展有一定作用。二者具有正向协同作用。

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