UGRP1与成人隐匿性自身免疫性糖尿病的相关性

王 丹,马珊珊,徐 甜,左春林

成人隐匿性自身免疫性糖尿病(latent autoimmune diabetes in adults,LADA)是一种缓慢进展的1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM),病理上表现为胰岛炎,细胞免疫失调体现在Th1/Th2比例失衡及其分泌的白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等细胞因子或其他介质作用紊乱,最终致以凋亡为主的胰岛β细胞破坏[1-2]。子宫球蛋白相关蛋白1( uteroglobin-related protein 1,UGRP1)是分子量约为10 ku的同源二聚体分泌蛋白,人类UGRP1基因定位于染色体 5q31-q34,一个包含哮喘、自身免疫性甲状腺病易感基因座的区域[3-4]。 LADA与桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)均为器官特异性自身免疫性疾病,二者发病机制相似[1-2,5],病理上均表现为大量淋巴细胞浸润,分泌的细胞因子与凋亡相关,最终致功能减退,同时外周血存在特异性抗体。前期研究表明UGRP1在HT患者外周血[6]及甲状腺细胞[7]中高表达,可能参与HT的发病。该研究通过分析LADA患者与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者外周血UGRP1水平的差异,探讨UGRP1与LADA的发病是否相关。

1 材料与方法

1.1 病例资料选取2021年8月—2022年4月于安徽医科大学第一附属医院就诊的124例受试者,其中45例LADA患者为LADA组,41例T2DM患者为T2DM组, 38例同年龄段无糖尿病的健康人作为对照组。LADA纳入标准符合我国LADA诊疗中国专家共识(2021版)[8]推荐的诊断标准:① 糖尿病起病年龄≥18岁;② 胰岛自身抗体阳性;③ 诊断糖尿病后至少半年不依赖胰岛素治疗。同时具备上述3项可诊断。T2DM纳入标准符合WHO(1999年)[9]T2DM诊断标准。排除标准:① 合并HT、毒性弥漫性甲状腺肿、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征等其他自身免疫性疾病者;② 妊娠期及哺乳期女性;③ 肿瘤患者;④ 合并严重心、脑、肾病变患者;⑤ 其他类型糖尿病患者;⑥ 感染性疾病患者。

1.2 主要试剂受试者空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)及餐后2 h血糖(2 hours postprandial blood glucose,2hPBG)采用氧化电极法检测,空腹C肽(fasting C-peptide,FCP)及餐后2 h C肽(2 hours postprandial C-peptide,2hCP)、糖尿病抗体(GADAb、IA-2、IAA、ICA、ZnT8)采用化学发光法检测。用酶联免疫吸附法检测血清UGRP1水平,UGRP1酶联免疫试剂盒购自太康百睿生物科技有限公司。

1.3 实验室指标收集并记录各组受试者年龄、体质量指数 (body mass index,BMI)、收缩压(systolic pressure,SBP)、舒张压(diastolic pressure,DBP)等临床一般资料。入院后测定血清中FBG及2hPBG、FCP及2hCP、糖基化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、GADAb、IA-2、IAA、ICA、 ZnT8等指标。

2 结果

2.1 3组间临床一般资料、糖尿病相关指标及血清UGRP1比较3组间年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组间BMI、SBP、DBP、FBG、2hPBG、FCP、2hCP、HbA1c、GADAb、IA-2、ZnT8指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3组间血清UGRP1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);LADA组血清UGRP1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);LADA组血清UGRP1水平高于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05);T2DM组血清UGRP1水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组间临床一般资料及糖尿病相关指标比较

2.2 UGRP1与一般指标及糖尿病指标的相关性分析Spearman相关性分析结果显示,糖尿病患者血清UGRP1与GADAb阳性(rs=0.412,P<0.05)、阳性糖尿病抗体数目(rs=0.404,P<0.05)呈正相关,与FCP(rs=-0.274,P<0.05)、2hCP(rs=-0.336,P<0.05)呈负相关,与BMI、SBP、DBP、FBG、2hPBG、HbA1c、IA-2、ZnT8无相关性。见表2。

表2 UGRP1与一般指标及糖尿病指标的相关性分析

2.3 影响LADA发病的二元Logistic回归分析以有无LADA为因变量(0=无,1=有),将单因素Logistic回归分析中有统计学意义的指标UGRP1、BMI、HbA1c、FCP、2hCP、FBG、2hPBG纳入多因素Logistic回归分析,结果显示血清UGRP1及2hCP为LADA发病的独立危险因素。见表3。

表3 影响LADA发病的二元Logistic回归分析

2.4 UGRP1诊断LADA的ROC曲线分析UGRP1在ROC曲线下面积为0.774(95%CI=0.681～0.867,P<0.001),约登指数最大值为0.509, UGRP1截断值为0.66 ng/ml,灵敏度为80.0%,特异度为70.9%。结果提示UGRP1可作为诊断LADA较好的辅助指标。见图1。

图1 UGRP1诊断LADA的ROC曲线分析

3 讨论

UGRP1主要表达在肺中,在甲状腺中也有表达[3]。众所周知,HT作为一种自身免疫性甲状腺疾病,其发病机制虽未完全明了,但已知其甲状腺组织浸润淋巴细胞,Th1细胞产生的细胞因子如IL-1β、INF-γ、TNF-α刺激甲状腺细胞表面自杀相关因子(factor associated suicide,Fas)的表达,最终Fas与Fas配体(factor associated suicide ligand,FasL)结合导致甲状腺细胞凋亡[5]。因此IL-1β通过Fas/FasL通路诱导甲状腺细胞凋亡在其发病过程中起重要作用[10]。前期研究结果表明,IL-1β可诱导甲状腺细胞凋亡以及UGRP1高表达,UGRP1与Fas及人类白细胞抗原-DR在甲状腺细胞中共表达[7],UGRP1和Fas表达受IL-1β调控[11],UGRP1在HT患者外周血[6]及甲状腺细胞[11]中高表达,提示UGRP1可能作为一种抗炎因子介导自身免疫反应,参与上述凋亡途径,致HT发病。UGRP1功能未知但与炎症相关,其是否参与LADA的发病值得进一步研究。

LADA作为免疫介导性T1DM的一个亚型,其自身免疫过程较温和,胰岛β细胞衰竭的进展较慢[12]。由于LADA起病缓慢,最初不需要胰岛素治疗,根据临床表现识别LADA较为困难,这导致其常被误诊为T2DM。由于误诊,不合适的治疗方法可能会加速LADA患者的自身免疫过程并致胰岛β细胞进一步损害[13]。因此,为制定个体化治疗策略,减缓胰岛β细胞损失,早期、正确识别LADA尤为重要。

本研究结果显示,LADA患者BMI、SBP低于T2DM患者,提示LADA患者表现出较少的代谢综合征迹象,这提示对临床中体型偏瘦的年轻患者需警惕LADA的可能。多因素Logistic回归分析表明UGRP1是LADA发病的独立危险因素,ROC曲线分析提示UGRP1可作为诊断LADA的较好指标,当UGRP1≥0.66 ng/ml时,诊断LADA的灵敏度和特异度分别为80.0%、70.9%。众所周知,LADA的病因及发病机制复杂,至今尚未完全阐明,已有研究[14-15]表明,UGRP1表达可受Th1、Th2、IL-5细胞因子的调控,提示UGRP1可能参与LADA发病的自身免疫过程。UGRP1作为一种分泌蛋白,推测LADA患者外周血中显著升高的UGRP1可能来源于免疫受损的胰岛β细胞,最终与胰岛β细胞凋亡相关,参与LADA的发病机制。故UGRP1可能作为识别LADA的一项较好指标。同时,UGRP1与GAD-Ab阳性、阳性糖尿病抗体数目呈正相关,与C肽呈负相关,有研究[16]表明,GADAb滴度越高及阳性糖尿病抗体数目越多,LADA病情越重,C肽水平越低,可更快进展为胰岛素依赖,提示UGRP1水平在一定程度上可用于LADA的病情评估。由于临床中糖尿病抗体阳性率低, LADA误诊率高,提示或可进行外周血UGRP1、糖尿病抗体和C肽联合检测来提高LADA的检出率,对于LADA的早期诊断、病情评估及预后均具有一定的价值。

本研究尚存在不足之处,样本量较少且非多中心研究,未动态观察LADA不同病程的变化,未对LADA患者的胰腺进行UGRP1测定。UGRP1具体如何参与LADA的发病以及UGRP1能否作为LADA的标志物有赖于多中心、大样本、长期随访的更深入的临床研究。