水蛭冻干粉与微粉的研究进展

王文祎 杨瑶珺▲ 赵卫涛

1.北京中医药大学中药学院，北京 102488；2.华治医药 （云南）有限公司，云南昆明 650199

水蛭为水蛭科动物蚂蟥（Whitmania pigraWhitman.）、水蛭（Hirudo nipponicaWhitman.）或柳叶蚂蟥（Whitmania acranulataWhitman.）的干燥全体。三者分别亦称宽体金线蛭、日本医蛭、尖细金线蛭，是我国常用的动物类中药，具有破血通经、逐瘀消癥的功效，主要用于治疗血瘀经闭、癥瘕痞块、中风偏瘫等[1]。研究表明，蛋白多肽类成分是水蛭的主要活性成分，具有抗肿瘤、抗血栓、抗动脉粥样硬化等功效[2]。而炮制过程中的温度上升会导致蛋白质变性，可能导致水蛭炮制后抗凝活性下降[3]。而饮片（药材）的粒度是影响其有效成分释放的主要因素之一[4]，随着制药技术和设备的不断更新和发展以及人们对药品质量效果要求的日益提高，越来越多新兴技术应用到中药的炮制中，而近年来中药冻干粉和超微粉也成为研究和使用的热点。

冻干技术又称真空冷冻干燥技术。由于在低温真空条件下进行[5]，利用升华使水蒸气逸出[6]，可最大限度地减少化学反应，避免生物和微生物退化降解[7-8]，可有效避免物料所含热敏性成分的破坏，对其长期保存、提升质量、降低成本等方面也有积极作用[9]。中药微粉又称中药超微粉，但是目前《中华人民共和国药典》对于中药超微粉并没有明确定义，也没有明确的粒径范围。有研究认为微粉粒径应为＜45 μm，也有认为其粒径一般在1～75 μm。因其改变了原有物理性质，相较于传统饮片有体外溶出度多，体内有效药物浓度较高等优势[10-11]。

本文对以上两种形式的水蛭粉的研究情况进行综述，为水蛭在冻干和超微炮制品的进一步研究和使用提供参考。

1 水蛭冻干粉

早在2008年，韩志等[12]已对水蛭的真空冷冻干燥展开研究，建立了一套冻干流程，但因其选择的水蛭品种为药典并未收录且不常用的宽水蛭（Hirudo breviformis），也并未对冻干之后炮制品的抗凝活性进行测定比较，因此后续还有待更多的研究来验证这一体系。

随后，水蛭冻干粉更多以粉针剂的形式被学者们研究。钟山等[13]制备了蚂蟥冻干粉针并建立其质量控制方法，可更好地改善蚂蟥多肽这一活性物质的保存和质量提升。徐长根等[14]建立了检测水蛭冻干粉针剂指纹图谱HPLC的方法，为其质量监控提供了依据。张玉娟等[15]证明了实验室自制的水蛭低肽与重组水蛭素的药理活性相似，是作用很强的凝血酶特异性抑制剂，且低肽的分子量与水蛭素存在差异，应是一种新发现的肽类，具有良好应用前景。

鲁增辉等[16]从炮制的角度研究了日本医蛭超低温冻干品、鲜品和晒干品的抗凝活性差异，冻干品抗凝活性可达（2974±160） U/g（U为抗凝血酶活性单位），鲜品达（380±174）U/g，晒干品为（111±10）U/g。虽然这一结果可充分表明冻干品形式的水蛭可很好保留其有效活性成分，但相较于《中华人民共和国药典》16 U/g的判定标准[1]，以及相关研究对于日本医蛭抗凝活性检测结果[17-18]来看，结果差异较大，其操作方法和滴定环节有待进一步验证。丁钊等[18]为日本医蛭冻干粉建立了一套系统的质量评价标准。杨帆等[19]研究了水蛭冻干粉对糖尿病肾病模型大鼠肾组织损伤的保护及其对瘀血阻络证相关指标的干预作用；蒋倩倩[20]评价了水蛭冻干粉的急性毒性，比较水蛭冻干粉及水蛭饮片对急性血瘀证大鼠的作用，均取得较好的实验效果。

专利方面，也有许多企业和科研院所对水蛭冻干粉的实践应用做出新的尝试，关于水蛭素冻干粉用于骨关节疼痛外用膏[21]、功能性勃起功能障碍制剂[22]、预防或治疗神经系统疾病研究[23]等发明专利不断被公开。

除疾病的治疗研究外，水蛭冻干粉还被广泛应用到医美行业的研发中，对于祛皱美白生肌、除痘祛瘢、护发健发等方面也均有涉及[24-25]。

2 水蛭（超）微粉

郑国玲等[26]研究了水蛭微粉对原发性高血压患者和急性脑梗死患者血浆血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）和血小板α-颗粒膜蛋白140（α-granular membrane protein，GMP-140）的影响，认为微粉治疗组有更好的效果。刘瑾等[27]考察了水蛭微粉对实验性动脉粥样硬化模型兔血脂水平影响；王志刚[28-29]等也研究了水蛭超微粉对大耳白兔抗氧化功能和血液流变学的影响，以及血脂代谢的影响；赵耀光等[30]开展了水蛭超微粉调节兔肝脏脂代谢相关酶活性研究；而王留等[31]考察了水蛭超微粉对调节兔肝脏脂代谢的作用研究和影响。以上实验结果均表明超微粉形式的水蛭饮片较对照组有更好的效果。

除药理药效外，还有学者从水蛭超微粉的规格优势和炮制方法展开研究。牛爱军等[32]考察了大鼠超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde， MDA）等指标，认为水蛭微粉较粗粉在改善脑缺血梗死损伤，提高临床疗效有更明显的优势。隋在云等[33]也通过对比水蛭水煎剂、普通粉和微粉的不同剂量考察了其对急性血瘀大鼠vWF、全血黏度等指标影响，认为水蛭微粉能够改善急性血瘀模型大鼠血液流变性，具有显著的活血化瘀作用。林晓珊等[34]对水蛭煎剂、普通散剂和超微粉作用于小鼠抗凝血、抗血栓进行比较，认为超微粉规格药效最强，且气味和口感也得到明显的改善。相似的研究也可参考张中华等[35]探讨炮制与超微粉碎技术对水蛭药效影响的研究。

专利方面，也有机构对高活性直接口服水蛭微粉的制造工艺[36]、祛皱美白的水蛭超微粉化妆品及其制备方法[37]以及治疗心脑血管疾病的水蛭微粉制剂及制备方法[38]等领域进行专利申请的探索。

3 总结与展望

通过以上的成果整理可以看出，关于水蛭冻干粉和超微粉的研究项目主要来源于高校院所的基金项目，以及企业自发的科研立项。从研究方向来看，高校院所侧重的多为实验动物的药理研究以及炮制工艺差别带来的优势对比研究，科研成果以学术论文为主；而企业主导或参与的课题更多倾向于面向扩大水蛭冻干粉和超微粉的应用领域，将其以更多形式应用到更多的场景中去，科研成果以发明或实用新型专利为主。对于水蛭这类活血化瘀中药，冻干粉和超微粉算是一种新的饮片形式和规格。随着中药现代化的不断发展，以及中药新资源的不断发现，将会对水蛭的进一步研究和良性发展奠定良好的基础。