凝乳酶
- 简析凝乳酶凝乳机理及羔羊凝乳酶自制方法
1250 引言凝乳酶（Chymosin）对奶酪生产至关重要。早在公元3—4世纪，人类就偶然发现动物胃中某种成分可使乳凝固，这是人们认识凝乳酶的伊始[1]。随着现代科学技术的发展，制作奶酪用的工业化商品凝乳酶已经取得了许多突破，但在国内家庭牧场和羊乳企业小规模生产制作奶酪上，凝乳酶的传统提取方法仍是解决其来源的最为简单易行的核心关键技术。1 凝乳酶种类及作用机理1.1 种类根据凝乳酶来源的不同，可以分为动物凝乳酶、植物凝乳酶、微生物凝乳酶、遗传工程凝乳酶四大
中国乳业 2022年7期2022-08-04
- 乳清在奶酪制作中的工艺优化
乳酸菌发酵剂和凝乳酶通过发酵使奶中的蛋白质凝固、排乳清，再把凝乳块压缩成固定形状而制成的一种营养价值很高的发酵乳制品，又被称为干酪[1]。奶酪制作过程中排除的乳清中富含乳清蛋白、矿物质和少量的凝乳酶，乳清中的乳清蛋白主要含有α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白及免疫球蛋白等，乳清蛋白含有丰富的生物活性物质，因此不仅容易被人体消化吸收而且具有极高的代谢效率，具有很高的生物利用价值[2-3]。乳清中残留的凝乳酶具有再利用的价值，直接排放乳清不仅污染环境而且损失
中国调味品 2021年10期2021-10-15
- 微小毛霉G-3凝乳酶的酶学特性研究
100048）凝乳酶（Chymosin，EC 3.4.23.4）是重要的工业用酶之一，在食品、医药等领域应用广泛。在干酪制作过程中，它主要起着凝固牛乳、改善风味和质构、影响干酪得率等作用[1]。传统凝乳酶最初来源于未断奶的小牛皱胃，而随着世界干酪及干酪素产业的发展，其供应已不能满足现代生产所需[2]。因此，研究学者进行大量研究从动植物或微生物中寻找最具发展潜力的凝乳酶。其中，微生物具有易培养、生长周期短、受地域气候时间限制小等特性，用其生产凝乳酶成本低、经
食品安全导刊 2021年24期2021-10-13
- 多羟基化合物对凝乳酶热稳定性的影响
4)0 引 言凝乳酶是制作乳酪必需的酶制剂[1]，还用于儿童消化不良的临床治疗[2]，其对热敏感，易失活[3]。多羟基化合物作为酶稳定剂操作简便、适用范围广，应用最为广泛[4-6]。荧光光谱常用于研究蛋白质分子构象变化。氨基酸残基所处微环境极性增加则荧光强度降低、发射峰红移，疏水性增加则荧光强度升高、发射峰蓝移[7]。多羟基化合物的种类、浓度等对酶热稳定性影响的研究大多集中于单一成分对酶的保护作用[8]。少量保护剂配方优化的研究中，多羟基化合物是过量添加的
中国乳品工业 2021年5期2021-06-27
- 混料设计优化牦牛“曲拉”凝乳酶干酪素的工艺及产品的性质分析
胃酶是最常用的凝乳酶，用其生产的干酪素出品率较高、品质较好，但我国小牛皱胃酶的生产还没有实现产业化，目前主要依靠国外进口，单纯依靠屠宰小牛提取凝乳酶无法满足市场的需要[6]。目前以曲拉为原料，利用酸法生产干酪素已有大量报道[7-8]，但采用凝乳酶制备食品级干酪素的报道依然相对较少。凝乳酶干酪素制备过程中，由于单一酶的凝乳效果有限，本实验拟采用混合酶进行凝乳试验，但不同酶的混合比例是研究的难点。混料设计是一种特殊的回归设计，是研究混合料中不同组分比例变化对得
食品与发酵工业 2020年6期2020-04-13
- 重组大肠杆菌表达凝乳酶工业化研究
统大肠杆菌表达凝乳酶发酵工艺的不足，在 10 m 3 新型高溶氧发酵罐上，对重组大肠杆菌（ Recombinant E. Coli）连续流加补料发酵生产凝乳酶进行了工业化研究，优化了培养基配方和工艺条件。 结果表明：优化后的培养基以及工艺条件比优化前菌体浓度与酶活均具有较大的提升，对凝乳酶工业化发展提供了重要的技术支持。【关键词】凝乳酶;高密度发酵;培养基;流加培养;优化【中图分类号】R715 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2
中国保健营养 2019年12期2019-12-15
- 甲醇芽孢杆菌凝乳酶的重组表达及其结构特性
）甲醇芽孢杆菌凝乳酶是一种具有凝乳作用的微生物蛋白酶[1]。凝乳酶在干酪生产过程中不仅起凝乳作用，还会影响干酪的质构和风味[2]。小牛皱胃酶因具有高凝乳活性和低非特异性水解活性，所产干酪的质构和风味均符合生产要求[3]，此酶已作为商品凝乳酶用于干酪的生产，但由于生产成本高以及屠宰动物引发的伦理问题[4]，使得寻找小牛皱胃酶代替品显得尤为重要。植物凝乳酶来源广泛，价格低廉，但植物生长周期长，凝乳活性低[5]。微生物凝乳酶易提取，酶活力高，逐渐在干酪生产中占据
食品科学 2019年22期2019-12-04
- 不同进口白霉奶酪中优势霉菌分离鉴定及其凝乳酶酶学特性研究
突出，微生物源凝乳酶酶学特性研究日益广泛[21-24]。基于此，本研究从进口白霉奶酪中筛选优势霉菌进行鉴定，并研究该凝乳酶的酶学性质，以期为白地霉在霉菌奶酪生产中的应用提供基础资料。1 材料与方法1.1 材料与设备1.1.1 实验材料白霉奶酪，生产商Nordex Food；Danish Brie cheese白霉奶酪，生产商Arla Foods amba Troldhede Dairy Y；Danish Camembert cheese白霉奶酪，生产商北京
中国乳品工业 2019年7期2019-09-10
- 微生物凝乳酶研究进展
3)0 引 言凝乳酶（MCE）通常专用于指代能够诱导牛奶凝乳形成的功能性酶制剂，现凝乳酶的来源主要有四种：动物性来源、植物性来源、微生物来源及通过生物工程改造的微生物发酵所得[1]。乳制品行业日益增长的需求使得传统凝乳酶（动物性来源）无法满足市场需要，20世纪60年代初开始，在世界范围内人们就已经开始寻找动物性凝乳酶的替代物；而微生物凝乳酶（MCEs）良好的功能特性及低廉的生产成本使其成为传统凝乳酶的重要替代品之一，有资料显示，到目前为止，微生物凝乳酶已用
中国乳品工业 2019年3期2019-04-26
- 青海牧区产凝乳酶细菌多样性分析
730000)凝乳酶是奶酪生产中的关键酶,奶酪加工工程中凝乳酶具有切断κ-酪蛋白特定肽键的功能,能使牛乳中的酪蛋白凝结[1];奶酪成熟过程中，凝乳酶可将酪蛋白分解为大分子多肽,并进一步降解成氨基酸、胺、含硫化合物等风味物质[2]。根据来源不同，凝乳酶可分为动物凝乳酶、植物凝乳酶和微生物凝乳酶。不同来源的凝乳酶性质不同,动物凝乳酶在干酪生产中应用最早,但由于原料缺乏,导致其价格昂贵[3]。植物凝乳酶由于蛋白水解力强,制成的干酪有一定苦味,限制了其应用[2]。
食品工业科技 2018年16期2018-09-13
- 四氢嘧啶对凝乳酶热稳定性的影响
研究四氢嘧啶对凝乳酶热稳定性的影响，向凝乳酶溶液中加入0.175～5.600 mmol/L的四氢嘧啶，测定不同浓度四氢嘧啶对凝乳酶活力的影响；之后测定了含0.50～2.00 mmol/L四氢嘧啶的凝乳酶溶液在69℃保温不同时间后的凝乳酶活力，将热保温后的酶溶液在4℃复性36 h，并再次测定酶活力的变化。结果显示，不同浓度四氢嘧啶对凝乳酶活力影响不大，各组酶活力均降低8.2%左右；加入四氢嘧啶会显著降低凝乳酶的热稳定性，但会发生明显的复性作用，提示四氢嘧啶可
山东农业科学 2018年1期2018-02-03
- 四氢嘧啶对热变性凝乳酶复性作用的研究
250104)凝乳酶是生产乳酪和干酪素必需的酶制剂，能水解牛奶中κ-酪蛋白的Phe105-Met106肽键使牛奶凝结[1]。凝乳酶与其他酶制剂一样，易受多种物理化学因素的影响而变性失活[2]。以海藻糖为代表的糖类、多元醇、聚合物等化合物作为酶的稳定剂，具有适用范围广、作用效果较好的特点，已经得到了广泛的应用[3]。四氢嘧啶(1，4，5，6-四氢-2-甲基-4-嘧啶羧酸，Ectoine)是一种渗透压补偿性溶质，与其他稳定剂相比，具有性质稳定、用量小、保护作用
安徽农业科学 2018年3期2018-01-19
- 凝乳酶热失活动力学研究
川摘要：为研究凝乳酶在334～343 K熱失活动力学表现，利用Arrhenius方程，分别计算得到了不同温度下，凝乳酶的热失活速率常数k、半衰期t1/2，并最终计算得到了凝乳酶的失活活化能Ea为（539.58±1.55）kJ/mol。335～343 K时，数据线性回归拟合结果较好，凝乳酶的热失活符合一级反应动力学规律。在较低的334 K时，失活速率常数的线性回归分析拟合度较低，凝乳酶在保温前期失活速率常数偏高，而后期偏低，曲线斜率前后差别显著，提示凝乳酶的
山东农业科学 2017年12期2018-01-09
- 酒曲中产凝乳酶微生物菌株的分离筛选及鉴定
贞耐*酒曲中产凝乳酶微生物菌株的分离筛选及鉴定腾军伟，赵 笑，杨亚威，张 健，赵爱梅，姜云芸，李 柳，郑 喆，杨贞耐*（北京食品营养与人类健康高精尖创新中心，北京市食品添加剂工程技术研究中心，北京工商大学，北京 100048）针对酒曲中的微生物进行分离纯化，得到11 株细菌和2 株真菌，并采用酪蛋白平板法和Arima时间法筛选出了1 株产凝乳酶的细菌菌株编号为LB-51。通过形态学观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌，将该
食品科学 2017年16期2017-09-03
- 一株地衣芽孢杆菌产凝乳酶酶学性质研究
地衣芽孢杆菌产凝乳酶酶学性质研究宋 曦1，汪 慧1，尚 菲2，韩 雍1，刘圆媛1(1陇东学院农林科技学院，甘肃庆阳 745000；2陇东学院生命科学技术学院，甘肃庆阳 745000)目的：对地衣芽孢杆菌所产凝乳酶的酶学特性进行研究。方法：在不同的温度、pH值、底物浓度、不同金属离子等条件下测定地衣芽孢杆菌产凝乳酶相对酶活力。结果：地衣芽孢杆菌所产凝乳酶最适凝乳温度为70℃；40℃以上热处理后凝乳活性有不同程度的损失，75℃热处理10min后凝乳酶活性丧失；
中国食物与营养 2017年7期2017-08-22
- 米黑毛霉UV-LiCl-6凝乳酶酶学特性研究
-LiCl-6凝乳酶酶学特性研究朱建宁1，张卫兵2*，张忠明2，杨敏2，文鹏程2，宋雪梅2，张丹妮2（1.甘肃省食品药品监督管理局，甘肃兰州730000；2.甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州730070）以米黑毛霉凝乳酶为研究对象，研究反应温度、pH值、脱脂乳浓度、金属离子对凝乳酶活力的影响。结果表明，米黑毛霉凝乳酶最适反应温度为75℃，在35℃～45℃稳定性较好；米黑毛霉凝乳酶的最适pH值为6.0，在pH值为7.0～10.0时较为稳定；脱脂乳浓度
卫生职业教育 2017年13期2017-07-25
- 原核表达重组牛凝乳酶的纯化
原核表达重组牛凝乳酶的纯化普燕，李轶杰，张富春*(新疆大学 生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐，830046)原核表达获得的重组牛凝乳酶与商品重组牛凝乳酶有相似的酶学特性，具商业潜力，故进一步研究其纯化方法。使用离心与饱和硫酸铵沉淀，成功纯化出有活性的重组牛凝乳酶。蛋白最终回收率为1.82%，总活力比纯化前提高了73.3%，比活力提高了95.3倍。同时，讨论了如何提高包涵体复性率与产物回收率，为今后该酶的工业化生产提供技术参
食品与发酵工业 2017年4期2017-06-19
- 加拿大拟批准乳酸克鲁维酵母提取的凝乳酶B、以及糖精在某些特定食品中使用
鲁维酵母提取的凝乳酶B、以及糖精在某些特定食品中使用2017年4月19日，加拿大卫生部在其官方网站上发布消息称，收到一份食品添加剂的申请，要求批准由乳酸克鲁维酵母CIN（yeast Kluyveromyceslactis CIN）提取的凝乳酶B的使用，乳酸克鲁维酵母CIN来自乳制品如奶酪、夸克（一种新鲜奶酪）和发酵乳制品如酸奶、开菲尔和酸奶油中。其他生物来源的凝乳酶B，包括马克斯克鲁维酵母（Kluyveromycesmarxianusvar），（DS118
食品与生物技术学报 2017年5期2017-04-08
- 枯草芽孢杆菌PNG27生产凝乳酶的发酵工艺优化及分离纯化研究
PNG27生产凝乳酶的发酵工艺优化及分离纯化研究陈蕊，别小妹，吕凤霞，赵海珍，张充，陆兆新*(南京农业大学，江苏 南京，210095)通过单因素试验、Plackett-Burman试验设计、Box-Behnken响应面试验设计对培养基成分及发酵条件进行了优化，使最终发酵液凝乳酶活力达到222.34 ± 4.99 U/mL。采用乙醇分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛等分离手段对枯草芽孢杆菌PNG27凝乳酶进行分离纯化
食品与发酵工业 2017年1期2017-02-15
- 解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶的生产及其酶学性质研究
菌GSBa-1凝乳酶的生产及其酶学性质研究腾军伟，郑喆，梅雪洋，付琦洁，张健，杨贞耐*(北京工商大学,北京食品营养与人类健康高精尖创新中心/食品添加剂与配料北京高校工程研究中心, 北京,100048)采用正交试验设计优化了解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产凝乳酶的工艺条件：发酵温度35 ℃，装液量40%，摇床转速180 r/min，发酵时间84 h。在此优化条件下，获得的凝乳酶凝乳活力为558.14 Su/mL。进一步研究了该酶的酶学性质，凝乳酶最适反应温度
食品与发酵工业 2016年12期2017-01-09
- 骆驼凝乳酶的分子结构与制备干酪的研究现状
046)骆驼凝乳酶的分子结构与制备干酪的研究现状普燕，马晓林，张富春*，李轶杰(新疆大学生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐，830046)骆驼凝乳酶与牛凝乳酶有着相似的一级结构和三级结构，但二者对牛乳的亲和力、催化速率却有着较大的差异，研究其分子水平上的不同，对今后凝乳酶的蛋白质工程改造有着重要意义。同时骆驼凝乳酶制备干酪苦味少，联合骆驼凝乳酶与改良发酵剂制备新型低质、低盐干酪也成为干酪研发的方向之一。该文综述了骆驼凝乳酶
食品与发酵工业 2016年10期2016-12-02
- 解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶培养基组成的优化
GSBa-1产凝乳酶培养基组成的优化腾军伟，杨贞耐*（北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心/食品质量与安全北京实验室，北京 100048）从甜酒曲中分离筛选得到1株解淀粉芽孢杆菌菌株GSBa-1，为了提高该菌株液态发酵产凝乳酶的能力，采用单因素实验和响应面法优化其产酶培养基组成。通过单因素实验分析了碳源、氮源、金属盐、磷源对菌株GSBa-1产凝乳酶的影响，并采用响应面法对产酶培养基中麦芽糖、蛋白胨和酵母浸粉含量3个主要因素的优化组合进行了定量研
食品科学技术学报 2016年4期2016-10-18
- Paenibacillus spp. BD3526发酵小麦麸皮生产凝乳酶
酵小麦麸皮生产凝乳酶杭锋1,2，洪青2，陶源1，王钦博2，刘振民2，陈卫1*1(江南大学 食品学院，食品科学与技术国家重点实验室，江苏 无锡, 214122)2(乳业生物技术国家重点实验室，光明乳业股份有限公司乳业研究院，上海，200436)摘要对Paenibacillus spp. BD3526凝乳酶的发酵条件和凝乳性能进行了研究，探讨了不同培养基、发酵时间、碳源、氮源和装液量对凝乳酶活力和活菌数的影响，并与商业化的小牛皱胃酶、重组凝乳酶、Rhizomu
食品与发酵工业 2016年2期2016-06-07
- 酒曲发酵产凝乳酶及其酶学特性研究
8)酒曲发酵产凝乳酶及其酶学特性研究赵爱梅，赵笑，段紫怡,杨亚威，滕军伟，杨贞耐(北京工商大学食品质量与安全北京实验室,北京100048)通过研究不同因素对酒曲发酵产凝乳酶的影响，确定适宜的产酶条件：酒曲添加量3%（质量分数），发酵时间4 d，培养基初始pH值为6.0，摇床转速120 r/m in。利用乙醇分级沉淀对酒曲发酵液中的凝乳酶进行提取，得到体积分数为70%乙醇沉淀蛋白具有凝乳活力；进一步进行Sephadex G-75凝胶过滤得到纯化凝乳酶，并经S
中国乳品工业 2016年2期2016-04-27
- 贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取工艺研究
）贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取工艺研究王红燕1，陶 亮1，2，陈 森1，李 涛1，黄艾祥1*（1.云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201；2.云南农业大学植物保护学院云南昆明650201）以云南西北部地区的野生植物贯筋藤的鲜茎为原料，在单因素的试验基础上，采用L9（33）正交试验方法，以贯筋藤鲜茎中凝乳酶活力为评价指标，研究了不同的预处理方式、料液比、浸泡时间、浸泡温度对其提取工艺的影响，确定了贯筋藤鲜茎中凝乳酶的最佳提取条件和提取率。结果表明，贯筋
中国酿造 2015年3期2015-12-27
- 干酪用牛凝乳酶替代品的研究进展*
830046)凝乳酶(milk clotting enzyme，MCE)，广义上讲是指能使乳液凝固的一类酶，被广泛用于干酪加工初期的凝乳过程。凝乳酶由于来源不同，为了便于区分，进行如下定义:狭义上的凝乳酶(EC3.4.23.4)称为chymosin，表示由哺乳动物体内chymosin基因表达出的凝乳酶。从新生小动物(皱)胃中提取的天然的具有凝乳功能并用于干酪生产的酶制剂称为rennet或皱胃酶粗提物，它的成分主要包括chymosin和胃蛋白酶，其中chym
食品与发酵工业 2015年5期2015-12-25
- 类芽孢杆菌发酵液提取凝乳酶方法研究*
200436)凝乳酶是干酪生产过程中起凝乳作用的关键性酶，通过水解k-酪蛋白中的Phe105-Met106肽键导致牛乳凝结［1］。近年来有关凝乳酶的来源、凝乳机理及小牛皱胃酶替代物均有较详细的报道研究［2-3］。随着世界干酪产业规模的不断扩大和小牛皱胃酶的短缺，微生物来源凝乳酶因其产量大、成本较低、经济效益高的优势越来越广泛地应用于工业化生产中［4-8］。目前相关微生物产凝乳酶及其提纯研究报道多集中在 Rhizomucor spp.、Mucor spp.、
食品与发酵工业 2015年12期2015-12-25
- 重组牛凝乳酶原与重组单峰驼凝乳酶原活化速率的初步比较*
830046)凝乳酶最先是以凝乳酶原的形式由胃黏膜细胞分泌，在胃的酸性环境下，酶原活化，从凝乳酶原的N端释放出42个AA的肽段(propeptide)，形成有活性的凝乳酶［1］。凝乳酶从进化上来源于胃蛋白酶家族，不同种属动物凝乳酶基因与蛋白的序列相似度极高［2］，将genbank获得的单峰驼凝乳酶与牛凝乳酶编码序列进行比对，其核酸与氨基酸的相似度分别为87.87% 和83.73%，比对两种酶原的propeptide氨基酸序列，相似度为76.2%。有研究报道
食品与发酵工业 2015年7期2015-12-16
- 微小毛霉凝乳酶基因的定点突变及突变菌株的筛选
业新的增长点，凝乳酶是干酪产业的核心原料，其品质决定了干酪的品质。世界干酪生产中所使用凝乳酶约30%为微生物来源的基因工程凝乳酶[1-2]。我国干酪生产所使用的高品质凝乳酶基本依赖进口，国产凝乳酶主要从小牛皱胃中获得，来源不稳定且成本较高。开发成本低、生产周期短的基因工程凝乳酶对于我国干酪产业的发展具有重要意义[3-5]。然而，微生物来源的基因工程凝乳酶普遍具有水解专一性差和热稳定性过高的缺陷[6-8]。本研究针对前期构建的微小毛霉凝乳酶表达载体[9,10
中国乳品工业 2015年2期2015-12-16
- 凝乳酶对牦牛乳硬质干酪成熟期间蛋白降解的影响
730070）凝乳酶对牦牛乳硬质干酪成熟期间蛋白降解的影响王玲1，2，梁琪1，2，*，宋雪梅1，2，张炎1，2（1.甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州730070；2.甘肃省功能乳品工程实验室，甘肃兰州730070）以新鲜牦牛乳为原料，采用小牛皱胃酶、木瓜蛋白酶和微生物凝乳酶制作硬质干酪，探讨凝乳酶种类对牦牛乳硬质干酪成熟期间蛋白质降解的影响。结果表明：三种凝乳酶牦牛乳硬质干酪成熟过程中，不同凝乳酶牦牛乳硬质干酪在成熟期间蛋白质降解能力存在较大差异，
食品工业科技 2015年14期2015-11-07
- 凝乳酶效价测定方法研究
00050)凝乳酶效价测定方法研究李京，王悦，刘莉莎，任雪，范慧红Δ(中国食品药品检定研究院，北京 100050)目的 考察凝乳酶效价测定方法的影响因素，改进凝乳酶效价测定方法；考察凝乳酶国家标准品稳定性、适用性。方法 考察不同奶粉底物和酶浓度对凝乳酶效价测定的影响；建立3×3量反应平行线法，并对多批样品进行测定，结果与绝对法、单点相对法进行比较；使用绝对法和统计分析对凝乳酶标准品稳定性进行考察；通过量反应平行线法考察凝乳酶标准品的适用性。结果 不同奶粉
中国生化药物杂志 2015年10期2015-07-07
- 米黑毛霉产凝乳酶发酵条件研究
0）米黑毛霉产凝乳酶发酵条件研究文 / 关晓艳，师希雄，文鹏程，汪月，张忠明，张卫兵（甘肃农业大学食品科学与工程学院 甘肃兰州，730070）为了进一步提高米黑毛霉发酵产凝乳酶的活力，采用单因素和正交试验设计，对影响米黑毛霉产凝乳酶活力的起始pH、温度、接种量及发酵时间等主要因素进行了优化。结果表明: 温度对米黑毛霉产凝乳酶活力影响最大，其次是接种量，发酵时间，起始pH 的影响较小。单因素和正交试验结果确定的最佳发酵条件为: 在250mL三角瓶中装发酵培养
中国食品工业 2015年7期2015-03-02
- 双峰驼凝乳酶原基因的生物信息学分析
制作干酪所用的凝乳酶需求量大增。干酪加工中添加凝乳酶的主要目的是促使牛乳凝结，为排除乳清提供条件［1］。凝乳酶是一种从未断奶的小牛皱胃中发现的天门冬氨酸蛋白酶，可以专一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe105-Met106之间的肽键，破坏乳中的酪蛋白胶束引起蛋白质凝聚，因此在乳制品尤其是在干酪加工制作中应用广泛［2］，理想的凝乳酶应能迅速、专一地打开κ-酪蛋白Phe105-Met106键，但水解蛋白其他肽键的能力较低，即两者的活力比值要高［3］。凝乳酶凝乳后制成
生物信息学 2014年1期2014-11-14
- 发酵条件对产酶的影响
12400）产凝乳酶活力及C/P（clotting activities/proteolytic activities）值不仅受菌株本身性质的影响，还和发酵条件有关。由于液态发酵的发酵条件可控，在工业化生产凝乳酶方面有较大优势。由于丝状真菌适合在固态培养条件下生长，本章首先将固态发酵培养与液态发酵培养进行对比实验，选择优势较大的液态发酵培养基；然后对液态培养不同孢子培养基、接种量、发酵时间及温度进行优化试验。发酵；条件；产酶1 材料与方法1.1 菌株及培养
中国医药指南 2014年14期2014-04-19
- 牛凝乳酶基因在毕赤酵母中的表达
62）0 引言凝乳酶是从未断奶的小牛第四胃中提取的一种天冬氨酸蛋白酶，它可以切断牛乳κ－酪蛋白的Phe－Met肽键，导致牛乳凝结［1］.在小牛皱胃中，凝乳酶通常合成为一个含有381个氨基酸的前体聚肽—凝乳酶原前体，凝乳酶原前体在分泌过程中去掉16个信号肽形成含有365个氨基酸的凝乳酶原［2］.凝乳酶原无活性，它在酸性pH下通过多步的自动催化过程，去掉N末端42个氨基酸形成有活性的含有323个氨基酸的蛋白－凝乳酶［3］.目前，凝乳酶年均需求量为2.5×107
湖北大学学报(自然科学版) 2014年3期2014-03-27
- 产凝乳酶微生物的研究概况
程，张卫兵*产凝乳酶微生物的研究概况李学朋1，梁琪1，师希雄1，冯瑞章2，张炎1，文鹏程1，张卫兵1*（1.甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州730070；2.宜宾学院发酵资源与应用四川省高校重点实验室，四川宜宾644000）凝乳酶用途广泛，其来源主要有动物凝乳酶、植物凝乳酶和微生物凝乳酶，微生物凝乳酶一直是凝乳酶研究的热点。对近年来国内外产凝乳酶真菌、细菌和放线菌种类以及产凝乳酶微生物的选育的研究情况进行了综述，以期为微生物凝乳酶的研究和开发提供参
中国酿造 2014年4期2014-03-04
- 牛凝乳酶原基因在食品级乳酸乳球菌中的重组表达
00081）牛凝乳酶原基因在食品级乳酸乳球菌中的重组表达张艳丽1,2，聂春明2，周利伟2，张 伟2，张宇宏2,*，杨晓红1,*（1.南方山地园艺学教育部重点实验室，西南大学园艺园林学院，重庆 400715；2.中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081）将牛凝乳酶原基因连接pNZ8149载体，并转化乳酸乳球菌NZ3900，经乳酸链球菌素Nisin诱导，测得重组菌株胞内凝乳酶活力达到0.7 SU/mL，培养基中检测不到凝乳酶活力，实现了牛凝乳酶原基因在
食品科学 2014年7期2014-01-18
- 原核表达重组牛凝乳酶原及重组牛凝乳酶酶学特性*
830046)凝乳酶是制造干酪过程中起凝乳作用的关键性酶，对干酪的质构及干酪特有风味的形成有非常重要的作用。它存在于未断奶的哺乳动物胃中，能够专一性裂解κ-酪蛋白多肽链105～106位的苯丙氨酸和甲硫氨酸之间的肽键［1－3］，使得酪蛋白沉淀凝聚，乳清排出。凝乳酶的传统来源是吃奶的小牛皱胃(第四胃)，可用来制作各种类型的干酪，也是衡量其他凝乳酶代用品的标准。随着世界范围内干酪市场需求的日益增长，来源于小牛皱胃的凝乳酶制剂难以满足干酪制作的需求量，人们开始寻找
食品与发酵工业 2013年8期2013-11-19
- 凝乳酶在干酪生产中的应用
型干酪，即通过凝乳酶的作用促进凝乳的形成。凝乳酶的作用关系到干酪品质的好坏与干酪生产的经济效益，在干酪生产中的作用至关重要。目前，随着干酪产量的快速增长，传统的小牛皱胃凝乳酶的生产已经处于供不应求的状态，探寻新来源凝乳酶成为了目前研究的热点。1 凝乳酶概述凝乳酶在干酪生产中的使用可以追溯到约公元前6000年，旧石器时代的人们用小牛的皱胃作为容器盛装牛乳的过程中发现牛乳凝集现象，从而使得皱胃凝乳酶在干酪生产中的应用成为了可能[1]。凝乳酶按来源可分为动物性凝
中国乳业 2013年1期2013-10-09
- 一株产凝乳酶解淀粉芽孢杆菌的筛选、鉴定及酶学性质
000）一株产凝乳酶解淀粉芽孢杆菌的筛选、鉴定及酶学性质张卫兵1，2，3，甘伯中1，2，3，*，梁 琪1，2，3，米 兰1，2，3，张 炎1，2，3（1.甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州730070；2.甘肃省功能乳品工程实验室，甘肃兰州730070；3.甘肃省干酪素工程技术研究中心，甘肃兰州730000）采用酪蛋白培养基，从甘南牦牛放牧区分离筛选产凝乳酶细菌。通过形态学、生理生化特征和16S rDNA序列同源分析对菌株进行鉴定，并对该菌株所产凝乳
食品工业科技 2012年7期2012-11-02
- 复合凝乳酶胶囊治疗功能性消化不良的临床疗效观察
用单独服用复合凝乳酶胶囊、莫沙比利和联合使用复合凝乳酶胶囊、莫沙比利的方式进行治疗，以观察应用复合凝乳酶治疗FD的临床疗效。研究结果报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料 以2010年6月至2011年2月来我院消化内科门诊治疗的150例功能性消化不良患者作为研究对象，按随机数字表法将病例分为3组:复合凝乳酶组50例，男23例，女27例，年龄24～68岁，平均年龄46岁;莫沙比利组50例，男21例，女29例，年龄23～72岁，平均51岁;复合凝乳酶联用莫沙
中国现代药物应用 2012年1期2012-11-01
- 酸-酶共促凝乳的研究进展
中会加入少量的凝乳酶以促进凝乳，这种凝乳方式为酸-酶共促型凝乳。尽管酸-酶共促凝乳对新鲜干酪的生产极其重要，但有关酸-酶共促作用的研究直到近些年才有所报道。本文在概述酶凝、酸凝的基础之上，对酸-酶共促凝乳的性质及影响等研究进行了论述，以期明确酸及凝乳酶在促进凝胶形成过程中的作用。1 酶凝乳及酸凝乳概述酪蛋白是形成凝乳的主要成分，在自然状态下，牛乳中的酪蛋白多以胶束的形式存在，粒径为20～300 nm，由αs1-，αs2-，β-，κ- 这4 种酪蛋白组成，其
中国乳业 2012年5期2012-04-13
- 微小毛霉凝乳酶的分离纯化研究
730070)凝乳酶是生产奶酪及凝乳酶干酪素中使牛乳凝固的关键性酶，它是一种天冬氨酸蛋白酶，其主要的生物学功能是限制性剪切酪蛋白Phe105～Met106之间的肽键，从而导致牛奶的凝结，因此被广泛应用于奶酪制造业和干酪素产业［1］。凝乳酶来源广泛，在动植物以及微生物中都有，传统的凝乳酶来源于小牛的皱胃，但是随着世界奶酪产业的不断壮大，单纯靠宰杀大量的小牛获取凝乳酶显然与现代工业的发展不相符，植物凝乳酶虽然来源广泛，但是其蛋白水解力强，并且受时间、地点等的限
微生物学杂志 2012年2期2012-01-12
- 牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的高效表达及活性检测
02206）牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的高效表达及活性检测张俊瑞1，马夏吟1，张红星2，郝彦玲1（1.中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083；2.北京农学院食品科学学院，北京 102206）以实验室保存的携带凝乳酶原前体基因的重组载体pMD 19-T/bPPC为模板克隆凝乳酶原基因，经双酶切后与载体pET-30a连接得到重组载体pET-30a/bPC，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导后，采用SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况
中国乳品工业 2012年3期2012-01-08
- 微小毛霉发酵制取凝乳酶的培养基优化研究
小毛霉发酵制取凝乳酶的培养基优化研究张丽红1，2，王 昕1，朴姍善1，郑 丽1，2，杨贞耐1，2，*(1.吉林大学生物与农业工程学院，吉林长春130024;2.中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心，吉林长春130033)利用响应面分析法优化微小毛霉的发酵培养基，提高微小毛霉凝乳酶的凝乳活力。在单因素实验的基础上，用Design－Expert软件对实验数据进行多元回归分析，建立了3种因素与凝乳酶活力之间的函数关系，得出在基础发酵培养基中加入的氯化钙、乳
食品工业科技 2011年9期2011-10-25
- 牛初乳乳清制备的研究
。1.3 试剂凝乳酶：效价1:5000；CaCl2·2H2O：分析纯；NaCl：分析纯。1.4 试验方法1.4.1 原料奶的脱脂脱脂的目的是除去腥味，有助于对初乳乳清的进一步提取，防止由于原料奶中脂肪的存在而对凝乳效果产生影响。由于原料的特殊性，在对原料奶进行脱脂前，应将其预热到25～30 ℃，以保证其中的活性因子不被破坏。分离过程如下：原料奶预热→分离→收集。1.4.2 凝乳酶活力的测定凝乳酶的活力指1 mL凝乳酶溶液（或1 g）干粉在35 ℃的条件下，
中国乳业 2011年3期2011-04-13
- 枯草芽孢杆菌产凝乳酶发酵条件的优化
枯草芽孢杆菌产凝乳酶发酵条件的优化丁明亮，欧阳安然，王望斐，顾正华，丁重阳*，张 梁，石贵阳(工业生物技术教育部重点实验室，江南大学生物工程学院，江苏 无锡 214122)为进一步提高枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液态发酵产凝乳酶(milking-clotting enzyme，MCE)的能力，采用单因素试验和响应曲面法对枯草芽孢杆菌液态发酵的产酶条件进行研究和优化。结果表明：最优发酵工艺为：葡萄糖添加量16.2g/L，在500mL三角
食品科学 2011年3期2011-03-30
- 新疆奶酪现状及前景探讨
酪的凝乳机理、凝乳酶特性及其在新疆奶酪中的应用现状等问题进行了详细介绍，进而探讨了新疆奶酪产业的发展前景。奶酪；凝乳；酸凝奶酪；酶凝奶酪；凝乳酶0 引 言奶酪具有悠久历史，据说世界上关于奶酪最早的记录是在12000年以前，当时人们将牛奶倒入动物内脏内携带，在迁徙路途中，牛奶经过不停的振荡发酵形成奶酪。在新疆，哈萨克族、蒙古族等游牧民族素来习惯制作并食用称“奶疙瘩”的奶酪。奶疙瘩是一种以牛奶为原料，约1/10比例浓缩原料奶中的蛋白质和脂肪的奶酪。同时牛奶经乳
中国乳品工业 2011年10期2011-02-14
- 我国凝乳酶产生菌育种的研究进展
2000）我国凝乳酶产生菌育种的研究进展张超垒1，王成忠1，张志国1,2,张玲梅3（1.山东轻工业学院食品与生物工程学院,济南 250353；2.南京农业大学食品科技学院,南京 210095；3.山东龙大植物油有限公司，山东聊城 252000）综述了目前我国在凝乳酶产生菌在自然选育、诱变育种和基因工程育种这3方面的研究进展情况。微生物凝乳酶；自然选育；诱变育种；基因工程育种0 引言随着人们生活水平的提高及生活观念的转变，奶酪生产行业得到了很快的发展，与之相
中国乳品工业 2011年4期2011-02-13
- 凝乳酶的研究进展
150010）凝乳酶的研究进展刘佟1， 崔艳华1，张兰威1，曲晓军2（1.哈尔滨工业大学 食品科学与工程学院，哈尔滨 150090；2.黑龙江省科学院微生物研究所，哈尔滨 150010）凝乳酶是一种最早在未断奶的小牛胃中发现的天门冬氨酸蛋白酶，可专一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe105-Met106之间的肽键，破坏酪蛋白胶束使牛奶凝结，凝乳酶的凝乳能力及蛋白水解能力使其成为干酪生产中形成质构和特殊风味的关键性酶，被广泛地应用于奶酪和酸奶的制作。本文以牛凝乳酶
中国乳品工业 2011年8期2011-01-04
- 重组凝乳酶原在大肠杆菌中的表达及活性研究
0046）重组凝乳酶原在大肠杆菌中的表达及活性研究李新苹，刘欢欢，普燕，张富春，李轶杰（新疆大学 生命科学与技术学院，乌鲁木齐 830046）为了提高干酪生产中起重要凝乳作用的凝乳酶的原核表达效率，分析了Genbank中牛、羊和骆驼凝乳酶原（prochymosin，pCHY）的保守序列及大肠杆菌密码子的偏爱性，合成了凝乳酶原序列，并将其克隆至大肠杆菌原核表达载体上。经IPTG的诱导得到高效表达的凝乳酶原；Western blotting检测证明了其具有免疫
中国乳品工业 2011年9期2011-01-04
- 6种凝乳酶在干酪制作过程中理化特性的研究
5021）6种凝乳酶在干酪制作过程中理化特性的研究赵秀玲（黄山学院 旅游学院，安徽 黄山 245021）以西安常兴乳品厂的新鲜奶为原料，添加EZAL MAO11乳酸发酵剂，研究牛奶干酪加工过程中酸度和出品率的变化，以及不同凝乳酶对它们的影响。结果表明，牛奶干酪加工过程中，酸度缓慢上升，而不同凝乳酶对酸度无显著影响（P＞0.05）;不同凝乳酶对干酪出品率的影响：羔羊皱胃酶＞小牛皱胃酶＞微生物凝乳酶＞猪胃蛋白酶＞木瓜蛋白酶＞无花果蛋白酶。凝乳酶；干酪制作；理化
黄山学院学报 2010年5期2010-12-21
- 重组微小毛霉凝乳酶的发酵条件及其酶学性质
*重组微小毛霉凝乳酶的发酵条件及其酶学性质李玉秋，王景会，李铁柱，张 莉，杨贞耐*(吉林省农业科学院农产品加工研究中心，吉林 长春 130033)通过对重组微小毛霉凝乳酶(recombinant Mucor pusillus rennet，RMPR)发酵条件的研究，确定甲醇诱导体积分数1%、初始OD600nm0.5、装瓶量100mL/500mL摇瓶、诱导时间96h为发酵最适条件。培养液离心取上清用硫酸铵分级沉淀获得粗酶液，并对其酶学性质进行研究，经测定该酶
食品科学 2010年19期2010-09-15
- 牛凝乳酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建
30033)牛凝乳酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建张莉, 姜媛媛, 张健, 杨贞耐＊(吉林省农业科学院农产品加工研究中心,吉林长春 130033)从小牛皱胃中提取凝乳酶(Chymosin)总RNA,经过RT-PCR获得凝乳酶cDNA,纯化后与pMD-18T载体连接,转化大肠杆菌JM109,通过双酶切和序列测定,获得了凝乳酶全长基因序列。序列测定表明,凝乳酶全长核苷酸长度为1 143 bp,编码381个氨基酸。与GenBank上已发表序列NM_18
食品与生物技术学报 2010年2期2010-08-27
- 凝乳酶的研究进展
730070）凝乳酶的研究进展朱仁俊1，石振兴1，甘伯中2，胡永金1（1.云南农业大学 食品科技学院，昆明 650201；2.甘肃农业大学 食品与科学技术学院，兰州 730070）介绍了凝乳酶的来源结构、理化特性及凝乳机理，对提高微生物源凝乳酶的活力、产量的研究进展及未来凝乳酶研究领域的开发进行了综述，并对其应用前景和开发进行展望。凝乳酶；干酪；凝乳活力；蛋白分解力0 引 言凝乳酶是干酪生产中使乳液凝固的关键性酶。它对干酪的质构形成及特有风味的形成有非常重
中国乳品工业 2010年1期2010-02-12
- 重组凝乳酶摇瓶发酵条件的初步优化研究
魏祥法摘 要:凝乳酶是一种酸性蛋白酶,用作动物饲料添加剂,可提高动物特别是幼龄动物对饲料中蛋白成分的消化吸收率,促进其生长。本试验研究了由毕赤酵母胞外表达多拷微小毛霉凝乳酶的摇瓶发酵条件。确定最佳表达条件为:甲醇每24 h添加1.0%,无氨基酵母氮源培养基(YNB)添加1.5%,采用pH 6.0的磷酸缓冲液,诱导120 h,在此条件下,重组凝乳酶的产量可达6 500 IU/ml。关键词:凝乳酶;发酵条件;毕赤酵母中图分类号:S816.79 文献标识号:A
山东农业科学 2009年12期2009-01-15